HPLC法测定乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液中的有关物质

试 验 研 究 HPLC法测定乳酸左氧氟沙星氯化钠 注射液中的有关物质 吴 燕 ，郑秀梅 【1．牡丹江友搏药业有限责任公司，牡丹江 157000； 2．哈尔滨凯程制药有限公司。哈尔滨 1 50000) 摘 要：建立测定乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液有关物质的高效液相色谱法。 关键词：乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液；有关物质；高效液相色谱法 DOl：10．3969／J．ISSN．1671-6027．2012．1．026 本实验通过高效液相色谱法(HPLC)对乳酸左氧氟沙星氯 化钠注射液中的有关物质进行了测定，发现标准上流动相比例 时间太长，从而调换了流动相的比例发现主峰与各杂质峰均能 达到较好的分离。 1 材 料 1．1 仪 器 LC一10ATvp(岛津 )高效液相色谱仪和 SPD一10AVP(岛津)紫外检测器；CHROMTEK色谱工作站。 1．2 试 剂 乳酸左氧氟沙星原料药(含量99％)由太洋药 物研究所提供，已烷磺酸钠为高效液相色谱专用试剂。 2 方法与结果 2．1 检测波长选择 取左氧氟沙星对照品适量，加0．03mol／L 盐酸溶液溶解并稀释成每 lmL中约含 5txg的溶液 ，在 200～400nm间紫外扫描，左氧氟沙星在 293nm处有最大吸 收，而辅料在此无吸收，故选择检测波长为293nm。 2．2 流动相选择 乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液国家药品 标准原采用的流动相为：己烷磺酸钠溶液，乳酸左氧氟沙星 氯化钠主峰保留时间为45．2min，保留值太大。故调整流动相 比例为己烷磺酸钠溶液甲醇(2：1)时，乳酸左氧氟沙星氯化 钠主峰保留时间为 13．7min，保留值适中，且与相对于主峰保 留时间约为 1．2倍处的相邻杂质峰(保留时间为 16．3min)能 完全分离(分离度为2．203)。 2．3 理论塔掘数测定 精密量取本品适量，用流动相稀释成 每 lmL中约含左氧氟沙星0．5mg的溶液，精密量取 10 L注 入液相色谱仪，色谱图至主成分峰保留时间的2倍，理 论塔板数按乳酸左氧氟沙星峰计算为3473。 2．4 溶剂干扰试验 称取氯化钠约 90mg，置 10mL量瓶中， 加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取2．5mL，置 10mL量 瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取 1O L，注入液 相色谱仪，记录色谱图，空白溶剂峰不干扰本品有关物质测 定。 2．5 最小检出量 精密称取乳酸左氧氟沙星适量，加流动相 溶解并稀释至适当浓度，精密量取 10 L，注入液相色谱仪， 使记录的色谱图中主峰峰高约为噪音的3倍 (信噪比3：1) 时的色谱图，乳酸左氧氟沙星的最小检出量为0．4ng。 2．6 精密度试验 精密量取本品适量，用流动相稀释制成每 lmL中含左氧氟沙星2．5 g的溶液，按上述色谱条件，精密 量取10 L注入液相色谱仪，记录色谱图。连续进样6次，试 验结果见 1。 2．7 有关物质测定方法 取本品，加流动相制成每 lmL中 含0．5rag的溶液，作为供试品溶液；量取适量稀释制成每 lmL中含2．5IXg的溶液，作为对照溶液。取对照溶液 10 L 注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分的峰高为满量 程的20％一25％，再取供试品溶液与对照溶液各 10 L注 入色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍。供试品 溶液的色谱图中如显示杂质峰，各杂质峰面积之和不得大于 对照溶液的主峰面积(O．5％)。用此方法测定 3批样品，均符合 要求，见表2： 表 2 乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液有关物质测定结果 4 讨 论 本实验采用HPLC法对乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液 的有关物质进行了测定 ，其测定结果表明 3批样品的有关物 质含量均未超过 0．5％，且主峰与各杂质峰均能达到较好的 分离。还考察了流动相的比例认为标准上的比例时间太长， 所以用现在的流动相可以缩短主峰的时间又可以达到较好 的分离效果。用HPLC法分析的结果误差小，重珊『生好，操作 简便快速，是研究药物质量标准的一种较好的分析方法。 表 1 有关物质精密度试验 瞻 2012年第 1期