四环素软膏剂和眼膏剂的薄层色谱鉴别

四环素软膏剂和眼膏剂的薄层色谱鉴别 中国药事2005年第19卷第2期?109? 四环素软膏剂和眼膏剂的薄层色谱鉴别 金建平(安徽省芜湖市药品检验所,241000) 中图分类号:R916文献标识码:A文章编号:1002—7777(2005)02—0109—02 四环素是由链霉菌产生或经半合成制取的广谱 抗生素,临床一般用其盐酸盐.四环素的水溶液随 pH的不同会发生差向异构化,降解等反应….特 别是在加热情况下,四环素A环上手性碳原子C4 发生差向异构化,生成差向四环素(4一ET?);而 C6上的醇羟基和C5.上的氢则易发生反式消去反应 生成脱水四环素,(),脱水四环素亦可形成差 向异构体,即差向脱水四环素(EATC).按现行标 准软膏剂和眼膏剂的鉴别方法在标准品斑点的相 应位置常常看不到供试品的斑点(见图A).作者 通过反复试验比较,采取用乙醚溶解基质,盐酸提 取的方法处理样品,并对试验条件做了进一步的改 进,得到的结果满意. 1仪器,试剂与药品. 薄层层析缸,微量点样器,玻璃板(20cm× 10em),干燥箱等.乙醚,盐酸,丙酮,醋酸乙酯, 浓氨水,氯仿,乙二胺四醋酸二钠(试剂均为分析 纯),硅藻土G(青岛海洋化工厂).盐酸四环素标 准品,4一差向四环素标准品,差向脱水四环素标 准品,脱水四环素标准品(中国药品生物制品检定 所),四环素软膏,四环素眼膏(芜湖市三益制药 有限公司). 2实验与结果' 2.1薄层板的制备取硅藻土G适量,加10倍量 的盐酸溶液(6mol?L),煮沸约15分钟,过滤, 用蒸馏水洗涤至滤液对刚果红指示液显碱性,再用 5倍量的丙酮一醋酸乙酯(5:1)洗涤,滤过,在 105oC干燥.取上述干燥硅藻土G适量,以用浓氨 溶液调节pH值至7.0的4%乙二胺四醋酸二钠溶 液一甘油(95:5)为黏合剂,将干燥硅藻土G一黏 合剂lg:3m1)混合物调成糊状后,均匀地涂布于 (20cm×10em)玻璃板上(厚度约为0.4mm),在室 温下放置干燥,再105oC干燥1小时后,备用. 2.2展开剂5%乙二胺四醋酸二钠溶液(浓氨溶 液调节pH值至7.0)5ml,与醋酸乙酯一氯仿一丙 酮(2:2:1)200ml的混合溶液. 2.3实验方法取样品约1g,加乙醚20Hd,振摇 使基质溶解,用盐酸溶液(0.1mol?L)提取2 次,每次5ml,合并提取液,混匀.取提取液2ml, 置蒸发皿中,在水浴上蒸干.取残渣和盐酸四环素 等4种标准品,分~tj)jn甲醇制成每lml中含0.5mg 的溶液,照薄层层析法【3试验.吸取上述溶液各 1,分别点于同一薄层板上,用上述展开剂展开 约15cm处,取出,在热空气中干燥,用氨蒸气熏 后,置紫外光灯(365nm)下检视,结果供试品溶 液所显主斑点的颜色和位置与标准品的斑点相同, 见图B. 图四环素软膏及眼膏薄层色谱图 A.现行标准图谱;B.本文方法图谱 1.盐酸四环素标准品;2.4一差向四环素标准品; 3.差向脱水四环素标准品;4.脱水四环素标准品;5.样品 3讨论. 3.1四环素的薄层色谱法采用的载体硅藻土可以 是H或G,为了获得较好的分离效果,在黏合剂中 加有甘油和中性的ElYrA缓冲剂.ElYrA可以克服 因痕量金属离子存在而引起的斑点拖尾现象. 3.2为了减少强碱对四环素的影响,将原方法中 调节乙二胺四醋酸二钠溶液pH值的氢氧化钠溶液 (5mol?L)改为浓氨溶液;pH值调至7.8比原 8.28.5有利于鉴别进行,且重现性好. 3.3展开剂为醋酸乙酯一氯仿一丙酮(2:2:1), 在其中加人少量的5%乙二胺四醋酸二钠溶液(浓 氨溶液调节pH值至7.8),可缩短展开时间,提高 ? llO?中国药事2005年第19卷第2期 小剂量阿司匹林肠溶片含量测定方法商榷 何英梅,贺军权(甘肃省药品检验所,兰州730000) 中图分类号:R927.2文献标识码:A文章编号:1002—7777(2005)02一OllO一02 阿司匹林属常用解热镇痛药,小剂量可用于防 治心脑血管疾病.近年来,随着人们预防保健意识 增强,小剂量阿司匹林肠溶片的生产和使用逐年增 长,其质量不合格的现象也屡有发生.小剂量阿司 匹林肠溶片(以下简称阿肠片)含量测定地方标准 采用酸碱滴定法1],后改为紫外分光光度法_2J. 2002年11月份颁布的国家标准(化学药品地方标 准上升国家标准)[3J仍为酸碱滴定法.然而我们在 实际检验工作中发现采用酸碱滴定法测定结果严重 120%(含量限 偏高,有多批检品含量高至1lO%, 度为95.O%,105.O%);而采用紫外分光光度法测 定,结果为98%,100%,两种方法测定结果相差 甚远.因此我们参考有关文献_4及《中国药典》 阿司匹林栓剂含量测定方法,采用高效液相法测 定小剂量阿司匹林肠溶片含量,并将液相,紫外, 酸碱滴定三种方法进行了比较. 1仪器与试药 美国SP8810型高效液相色谱仪,SP100型可见紫外检测器,SP4400型电脑积分仪;TU一1800型 紫外可见分光光度计. 阿司匹林肠溶片(规格:25r—1g,片,陕西白鹿制 药股份有限公司;批号:010628,010704, 030203);阿司匹林,水杨酸对照品(中国药品生物 制品检定所,批号10113—0101,0106—9702);无 水乙醇,甲醇,二乙胺等均为分析纯或色谱纯试剂. 2方法与结果 2.1色谱条件及系统适应性试验 色谱柱:Hypersil—CI8柱(250mm×4.6mm, 5pan大连依利特);流动相:甲醇一0.1%二乙胺水 溶液一冰醋酸(40:60:4);流速1.0ml?min,;检 测波长:276nm;进样量:20;衰减:128.柱 温:室温. 取阿司匹林,水杨酸对照品适量,加无水乙醇 溶解,按上述色谱条件进样,结果阿司匹林峰理论 塔板数大于1500,阿司匹林峰与水杨酸峰分离度 大于1.5,见图. 图HPLC色谱图 a.阿司匹林和水杨酸对照品;b.阿司匹林对照品;c.样品 1.阿司匹林;2.水杨酸 2.2线性关系考察 精密称取阿司匹林对照品0.10434g,置50ml 量瓶中,加无水乙醇溶解并稀释至刻度,制成阿司 匹林对照品贮备液.精密吸取贮备液1,2,4,5, 6,7ml,分别置25nll量瓶中,加无水乙醇稀释至 检测效率. 3.42000年版《中国药典》和USP(25)版中, 盐酸四环素原料的鉴别采用的是高效液相色谱法. 在含量测定项下记录的色谱图中,供试品主峰的保 留时间应与对照品主峰的保留时间一致.液相色谱中对油性膏剂的样品处理很高,否则易造成色 谱柱的损坏.由于薄层色谱法鉴别四环素软膏及眼 膏,设备简单,操作容易,且成本低,分离效果亦 佳,在常规检验中,特别是对于基层药检机构是一 种好的选择. 参考文献: [1]刘文英.药物分析[M].第5版.北京:人民卫生出版社, 2003:290 [2]中华人民共和国卫生部药品标准.抗生素药品[s].第一 册,1989:12.13 [3]中国药典[S].二部,2OOO:31(附录VB)