KM-SOP0304.82志贺氏菌血清凝集试验操作规程

广州金域医学检验中心 KM-SOP0304•82 Guangzhou Kingmed Center for Clinical Laboratory Edition 1.0 《文件已阅声明表》 《Procedure circulation form》 文件名称: 志贺氏菌血清凝集试验操作 表号: KM-MP03•02•02 已阅声明：本人承诺已了解此文件中的相关内容,今后的工作中将严格按照此文件执行,不随意对外传阅此文件,如有因与文件不相符的操作,责任由本人承担。 （I have understood the relevant content of the document。I will keep the document secret and be responsible to properly perform procedure） 阅读人签名表 姓名（NAME） 职务（POSITION） 签名（SIGNATURE） 签名日期（DATE） 汪凡军 微生物主任 张永军 主任助理 罗春梅 授权签字人 郭海波 授权签字人 胡敏玲 技术员 徐帮 技术员 张磊 技术员 胡慧霞 技术员 魏胜兵 技术员 《文件修改页》 《Procedure amendment form》 表号:KM-MP03•02•03 序号 NO. 页码(Page) 内容更改说明(Description of Modified contents) 审批人 (Approved by) 批准生效日期 (Approved date) 《文件信息表》 《Procedure information form》 表号: KM-MP03•02•04 文件名(Title of document) 志贺氏菌血清凝集试验操作规程(KM-SOP0304.82) 版本号(Edition No.) Edition 1.0 生效日期 (Operative date) 2008-02-03 文控部门 (Doc. Control Dept.) 实验室文控室 回顾人员签名/日期(Reviewed by Signature/ Review date) 回顾人(reviewed by : Signature) 回顾日期(Review date) 替代文件(Replaces) 存放地点(Location)/持有人（Holder） Copy No. 地点(Location) 持有人(Holder) 1 诊断部文控室 陈彬 2 微生物室 张永军 作者签名/日期(Author signature/Date) 张永军 审批人签名/日期(Authorized by : Signature/Date) 汪凡军 接收人签名/日期 （Receiptor/Date） 副本数(Copy No.) 本文件是第 个文件拷贝 / 共发放 2 个文件拷贝 志贺氏菌血清凝集试验操作规程 (Standard Operating Procedure of Serum Agglutination Test for Shigella) 1.试验原理（Test Principle）： 根据抗原抗体反应原理，以志贺菌四种多价抗血清及宋内，福氏，痢疾和鲍氏抗血清和怀疑菌进行玻片凝集来鉴定志贺菌菌株。 2.标本采集（Specimen Collection）： 克氏双糖（KIA）或适当的培养基中生长的新鲜、可疑菌落。 3．试剂（Reagents）： 3．1 试剂厂商(Manufacturer)：宁波天润生物药业有限公司 3．2 SFDA注册号：国药准字S20053050 3．3 试剂盒组成（Content of Reagents）： 志贺氏菌属四种多价血清，宋内志贺菌血清，福氏志贺菌血清，鲍氏志贺菌血清，痢疾志贺菌血清。 3.4 必须但未提供的材料（Materials Needed）： 无菌生理盐水 清洁玻片 蜡笔 3.5 试剂储存条件(Store of Reagents)： 3.5.1试剂贮存于2-8℃,不能冷冻试剂,若试剂结冰请丢弃勿用。 3.5.2开启后的试剂应保证密闭，以避免污染。有效期请参考试剂上的标签。 4.操作步骤（Procedural Steps）： 4.1以蜡笔在一个干净，清洁玻片标示多个区域； 4.2用灭菌的接种环挑取三环志贺菌四种多价抗血清于片上之一个区域。 4.3于其旁区域滴一滴生理盐水，作为阴性对照。 4.4从克氏双糖或适当的培养基中挑取适量生长物与生理盐水混合。 4.5另取适量生长物与志贺氏菌属四种多价血清混合 4.6旋转玻片1分钟，避免过度挥发。 4.7记录凝集结果如下：志贺氏菌属四种多价血清凝集（+），或沙志贺氏菌属四种多价血清凝集（-）； 4.8志贺氏菌属四种多价血清凝集，再与四种志贺菌血清凝集操作同上。 5.结果判断（Results）: 阳性：出现明显凝集颗粒； 阴性：没有凝集颗粒产生。 6.质量控制（Quality Control）： 6.1质控菌株：宋内志贺氏菌、福氏志贺氏菌、伤寒沙门菌 6.2质控操作：请参见操作步骤4.1～4.8 6.3质控结果和： 志贺血清质控记录 （quality control record of sera for shigella ） 表号： KM-SOP0304.82.01 检测日期 试剂批号 菌株名称 来源\编号 结果判断 志贺四种多价 宋内志贺 福氏志贺多价 福氏志贺Ⅰ 福氏志贺Ⅱ 福氏志贺Ⅲ 操作者 审核者 备注 宋内志贺氏菌 购买/ ATCC9290 预期结果 P P N N N N 实际结果 结果 福氏志贺氏菌 购买/ ATCC12022 预期结果 P N P N P N 实际结果 结果分析 伤寒沙门菌 购买/ ATCC14028 预期结果 N 实际结果 结果分析 6.4质控频率：每使用一个新的批号的试剂时和每六个月做一次。 7.注意事项（Notices）： 7.1志贺菌是传染性较强的致病菌，操作时需注意做好个人防护。 7.2试验过程中使用的器材，均应小心丢弃在消毒液中，以最大程度减少污染的可能性。 8.临床意义： 志贺菌属会引起急慢性细菌性痢疾，表现为腹痛、发热、大量水样便，1～2天后转为少量腹泻（有里急后重现象）。痢疾志贺菌引起的菌痢特别严重，死亡率可高达20%。 9.已检标本的处理: 已检标本保存于2-8℃的冷库中，并写上日期，贮存一周后按医用垃圾高温消毒 后处理。 10.参考文献(References)： 10.1沙门氏菌属诊断血清试剂说明 10.2全国临床检验操作规程（第3版） 11.相关表格： 《志贺血清质控记录表》(KM-SOP0304.82.01) 《细菌培养记录底单》（KM-SOP0304.38.01） LABORATORY procedure page 1/6 志贺氏菌血清凝集试验操作规程 （末次修订生效日期：2008-02-03）