实验肿瘤
金荞麦提取物治疗肺癌的临床前预测研究
西川省肿瘤研冤所 马云鹏 程 佳 傅晓涪
云南省 曲靖地区医院 吴友仁
末文 :用小蔬、肾囊摸下移植法 (SRCA)预刹评价 了金 荠宜提取物金 E扣 Cj]-辞12斜肺癌
姐 虮址异种移植后治疗的敏 感性 ,钾 争观察 了两种捉乳物司荷瘤宿主的毒 作用 移 啦 实验 总可
评 价章 g:33.3 (10/12) 以移植 前后 癌组 织体 积改 变0MU< 一1 0为有效 标 ,垒 E和 CDl的
有最儿分别西4/10~ /10 肺鳞癌对堂E治开的每£感性 高于其它鲤担类型的肺癌。两 刊 捉 取抽对
宿主毛明显毒岳c反应 利用SRCA法进行 庳前期预删评价有苗头的抗癌荆尚属新的毒试。
金荞麦 (Fagopyrum CymOSum(T rev)
Meis=~系近年来新发现的一 种 具 有 抗 癌
活性的中草药。临床观察发现金 葬 麦 根 嚼
化吞服 ,水煎剂和 提取 物 CD 、CB。等 能明
显改善肺癌、宫颤癌患 者机体状 况,缩小瘤
块体积和延长患者生存时闯}在体外能明显
杀伤Hela和肺癌细胞。金E是新近利用活性
追踪法从金养麦根中分离提取的一种抗癌活
’J生最高的原花色素缩台性单宁 ,主要 含 有
(一)一
儿茶索,(一 )一表儿茶素一 3一
没食子酸酯及原矢车菊素 B一2,B一 4等。
本实验利用SRCA法预测金E对个体人肺 癌
块异种移植物治疗的敏感性,为临床研究提
供更为可靠的依据。
实 验 方 法
一
、 人肺癌组织块的制备
外科取材的肺组织经病理检查证实为肺
癌后置于加适量抗生素的Tc 培养 液 中,
冰浴保存, 2小时内送作SRCA。剔除癌旁
及坏死组织,用刀片将癌组织切割 成 1.5~
2.Omm。的小块,重新放入新鲜的培养 液 中
备用。随机取 3块制备好的癌组织块固定于
iO 中性福尔马林溶液中,供病理组织形态
学分类及实验质量控制。
二、人肺癌小鼠肾囊下移植
详细
见前文 。简述如下;小 鼠(B-
ab}/c,体重20~24g,雌雄皆有,获 自卫生
l9B9年 第16卷第 5期
部成都生物制品所动物查)称重薪 乙醚吸入
麻醉,伏卧固定,背部皮毛常规消毒后切开
左肾部 盥皮肤 (8ram),打开腹腔 后 托 出
肾脏,将制备好的瘤块放入一 自制的塑料穿
刺针内,刺入肾囊膜下 ,借助空气压力轻轻
将组织块推入内侧肾囊下 (切忌 损 伤 肾 实
质),随后在体视显微镜下原位测量植入组
织块相互垂直的 2个直径,嚣后复位肾脏,
缝合皮肤。 瘤组织离体到移植结束不宜超
过 6小时 。
三、治疗方法及疗效评价
金E和CD 均为云南曲靖地区医院提供,
2种提取物均不溶予水,使用前先以玛瑙研
钵研为细末,加入数滴二甲基亚枫助溶后再
充分研磨,最后加入 0.85 NaCI稀释至所
需浓度,4℃保存备用。
sRcA后第 1— 5天,小鼠连续 5次 口
服金E或CD ,剂量均 为 100mg/kg/次,对
照组口服等体积含 5%二甲基亚枫的盐水溶
液。sRcA后第 6天 ,动物称重后脱颈椎处
死,剔出荷瘤肾脏 ,脾脏和右侧股骨,按上
述方法原位测量最终天肿瘤体积。癌组织 6
天内体积的变化以体视测量单 位 (OMU)
表达。率试验中,1 OMU=0.02ram,OMU
计算
见前文 。+OMU值表示移植物呈
阳性生长,一OMU剐相反。如果 对照组移
植物OMU呈负值,则表盼移植不 成 功。在
,09
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本试验中,我们以OMU<一i0为治疗 有效
。此外,我们以移植前后动 物 体 重 变
化,脾重及骨髓有核细胞计数等指标观察提
取物对宿主的主要毒副反应。
实 验 结 果
一
、 金莽麦提取物对移植人肺癌组织的
敏感性 ‘
评价了I2例肺癌患者对金E和 CD 的敏
感性,对照组移植物OMU值有10次呈正值,
2次负值,总可评价率为83.3% (1O/12),
,TO
— lel
— iO
-2口
C D1
对照
在10次可评价的试验中对照组平均 OMU为
6.34。
l0例肺癌患者的一般情况,组织类型及
术前放化疗史详见表 1。金E和 CD 组平均
OMU值 分 别 为 一5.29±8.10和 一3.36±
6.88。从金E和CD,oMU 的 标准值可以看
出,肺癌患者间因组织类型,分化程度,治
疗史及取材部位等方面的差异,故疗效反应
差异明显。按上述有效标准,金E和 CD 的
总有效比分别为4/1O和2/10,图 1为 4例对
0
- 4.D
一 2O
对照
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CDI
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对朋
中国肿删临 床
L
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10
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— 20
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● ●
o
0
●●
0 ●
o
o 0 ●
盒 E C 对照
z
金养麦提取物治疗有效的肺癌移植物敏感性
图解,图2则以图解形式描绘了对照及治疗
组移tifOoMu分布情况。从上述图表可见,
金E对肺癌的敏感性高于 CD ,前者所有患
者的OMU值均低于相应对照组,后者则有2
例OMu值高于对照。如果以肺癌的组 织 类
型分类评价,金E对肺鳞癌最敏感,有效比
为3/6,对肺腺癌则疗效不明显。有 1倒小细
胞性肺癌对金E和CD,均敏感,提示 金 养麦
提取物可能对此类肺癌有一 定的治疗作用。
二、金荞麦提取物对荷癌鼠体重、脾重
和骨髓有核细胞数的影 响
金荞麦煎剂及CD,经动物及临床实验证
明长期服用无任何毒副反应。金E和CD 对
造血和免疫功能的作用目前尚无报道,我们
的初步研究提示 (表 2):2种提取物对小
鼠体重和骨髓有核细胞均无统计学意义的改
变,但金E治疗后动物体重较治疗前略有 减
轻,CD,则相反,后者与临床观察相 符。值
襄 1 10倒肺癌SRCA试验结果
腺 癌
腺 墙 一
旅 描
鳞 瘟
赣 癌
鳞 癌
鳞 据 一
鳞 癌
赣 癌
小 细胞性肺 糟 +
2.00 — 1.75
— 6。50 2—20
一 d。O0 4.B0
5。B0 — 1.20
3.30 2.50
— 15。4(I 一11.60
— 13.50 —7。40
— 10。1D 2—4O
1.0O 一 8.0O
一 1j。5D 一15.5O
5.29±8.1 —3.36±6.9
10.90
2.5O
3.8D
4.20
6.34±6.1
襄 2 盒E、CD 对特■鼠体重、脾置和骨髓有核细胞的影响
组 别
观察 指标
动物数
体 重 (E)
O天 6天 FBW/IBW’
脾 重
×10 有棱细 胞/骰骨
‘Ⅲg)
对 照 组
盘 E
CD1
24 22.08± 2.5
20 21.85±2.6
20 21.56±2.1
0.9日
0.94
1.0d
l5.56±2.19
14.60±1。8l
14.28±3.B1
FBW/lBW :最终天体重/起始天体重
1989年第l6卷第 5嘏 ,"
耵 螗 曲 站 {三 ∞ ∞
男 男 男 男 另 男 女 男 男 男
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帅 加 帅
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孔 加 让
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得注意的是金E在连续 5天口服给药后,动
物脾重量较对照组明显减轻。
讨 论
免疫功能健垒 鼠肾囊膜下短期 (6天)
移植人体肿瘤法是直接把保留个体肿瘤生物
学特性的组织块移植于营养物质和药物极易
到达的肾囊膜下,因为肾脏是免疫排斥避发
性脏器 ,所 以在免疰排斥反应出现之前通过
药物处理可以反映出个体肿瘤对不同药物处
理的敏感性。。SRCA与临床前 瞻 性 回顾
性对 比研究证明,该方法与临床反应相关性
好,真阳性率达80 ,真阴性率高于9O 。
目前,sRcA已用于抗癌药物筛选;个体肿
瘤化疗敏感性评价以及检测各种特异性抗肿
瘤的生物活洼因子如干扰素,肿瘤坏死因子
和抗肿瘤单克隆抗体等领域 。用 于 预 测
临床前期新药抗癌效价方面尚属新的 尝试。。
金养麦具有止咳、消炎、镇痛和改善机
体状况等多种药理 活性。活性追踪法证明,
主要含缩台单宁曲金E抗癌活性明显高 于其
它金养麦提取物,奥因和西岗等学者近年来
发现在化学结构上具有多羟基的单宁具有十
分广泛的生物活性,如抗酯脂过氧化物酶,
抗突变,抑制致癌促进因子和宿主介导性抗
肿瘤作用 (如仙鹤草及马桑单宁) 。。我
们则首次发现金养麦单宁对人肺癌有明显的
治疗作用。 目前,越来越多的证据表明从单
宁类化台物中筛选抗癌剂具有广阔前景。
在金E进入临床研究的前夕,我们 用S
RcA预测了其抗肺癌活性,并 比 较 了已知
列肺癌有明显治疗作用的 CD-和金E的抗癌
效价。临床初步观察表明,CD 对肺鳞癌较
敏感,总有效率约50 ,SRcA试 验 发 现
CD 有效比为2/10,这一差异可麓与治疗方
案,病铡选择,有效标准等多种因素不同有
关,但sRcA试验也提示金莽麦对肺鳞癌较
敏感,这一点与临床观察相吻合。动物瘤谱
筛选及SRcA研究表明,金E抗癌活性明显
高于CD ,这一结论将有待于正在进行的临
床研究来验证 。
金E抗癌活性高于其它金荞麦提取物,但
对动物脾脏尚有一定影响,这一作用可能与
给药剂量偏高有关,剂量如加 大 到 500mg/
kg,脾重减轻则更明显。这一现象希望临床
学者在
I期临床实验时给予注意。
参 考 文 敝
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台沧 文集, (昆明)P.97,l988
2.马云鹏 菩, 中华 医学杂 志 87:508, 1g87
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5. }3~gdea AE t al, Proc. AACR AsCO 19:
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1988
(198 .11.18收 稍)
(1988.7.z0笫 二敬修 回)
Pred;ctio rl of Responsiveness of H um~rl Lung Cancer Xenograft8 to
Extracts of Fagopy rum CyIrtOZUm (T rev) MeIsn by SRC Assay
Ma n tn-Peng et 81
ichuan Institute ,or riCer Research,Chengd“
Responsiveness of hum8n lung Caneer expl2tlxts to ext acts E &ild 匕D1 o± ago—
pyrulit Cymosum (Trev)Meisn,a newly discovered antitumoF agent of Chinese medi~
ciⅡ8I herb。 was determ ined by subrenal capsule (SRC)assay. A total of 12 lung can—
cers W ere tested in which 60 xenografts were implanted·W ith n m
.
ean g~o)vth of> 5
0MU (1 0MU :0.02mil1)in the C011irof anima1 an 8ssar Was COilSidered eYaluable·l'he
trials provided an ev~luable assay r&te of 83.3 .Taking<:一10 OMU of tumor xe=o
faft size as standard of responsiveness extraCtS E and CD] offered response
rates of 40% a.nd 20 respectirely.Squamous ceII carcinoma was more sezis{tive t0
E thaⅡ other types of lung cancer.These findings 、vere similar to 地 e clinical ef
fects of CD1 phase—I trials.SRC assay might be of value in predicti2Z huma n tumor
resportse to new antitamor dr“gs P1ior to olinicaI Pbase—J triaIs· l he study 8lso
eonfirreed that extracts E aed CD1 had no toxicity and side—effeet to the 111ige·
Key W ords: Lung canGer Chineso herb SuhrenaI capsule assay
,,2 中国肿瘤监库
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