癌症进展杂志翟穿盖5.q芰7雾惫;期 3310NCOLOGY PROGR 2009VoL7Ess.M删 . ,№3
半枝莲多糖的抗肝癌作用及其机制的研究△
叶华崔燎
广东医学院广东天然药物研究与开发重点
,湛江524023
摘要 目的探讨半枝莲多糖(SPS)的抗肝癌作用及其机制。方法建立小鼠移
植瘤模型,采用荷瘤小鼠抑瘤率
SPS对H22肝癌小鼠的抗肿瘤作用;制备荷瘤小鼠
脾细胞悬液,检测SPS对脾淋巴细胞增殖和脾细胞分泌IL一2和TNF—d的影响。结果
SPS在50—200ms/(kg·d)范围内可抑制小鼠H22肝癌的生长,促进荷瘤小鼠脾淋巴
细胞增殖,提高脾细胞分泌IL一2和TNF—d的水平。结论SPS可能是通过增强机体免
疫功能达到治疗肿瘤的功效。
关键词半枝莲多糖抗肿瘤脾细胞增殖IL一2-rNF—d
中图分类号耵35.7 文献标识码A
Anti——hepatocarcinoma
polysaccharides
effectofscutellariabarbata
anditsmechanism△
YeHuaCuiLiao
GuangdongKeyLaboratoryforResearchandDevelopmentofNaturalDrugs,GuangdongMedicalCoHege,Zhanjiang524023,China
ObjectiveTostudytheanti—·hepatocarcinomaeffectofScutellariabarbataPolysaccharidesandits
mechanism.MethodsThebearingtumormousemodelwithHepatoma一22wasestablished.andthein-
hibitoryrateofSPSwasdetected.ThespleencellsfromH22一bearingmicewereculturedinvitro,and
theproliferationoflymphocytesWasdetected.Furthermore.IL一2andTNF一仅intheculturesupema。
rantsweredetectedbyELISAassay.ResultSPSat50—200mg·kg~·d一1inhibitedthedevelopment
oftransplantedtumorinmice,stimulatedtheproliferationoflymphocytes,andactivatedmousespleen
cellstosecreteIL一2andTlNF一仅significantly.ConclusionSPSinhibitsthedevelopmentoftransplan—
tedtumorinmiceevidently,whichmaybemediatedbyenhancingthefunctionofimmunecells.
KeywordsScutellariabarbatapolysaccharides;anti—tumoractivity;proliferationoflymphocytes;
IL一2:TNF—a
OneolProg,2009,7(3)
△基金项目:广东医学院青年基金资助项目(项目编号:XQ0717)
论
著
万方数据
论
著
癌症进展杂志2009年5月第7卷第3期
半枝莲为唇形科植物半枝莲(Scutellaria
barbataD.Don)的干燥全草,别名并头草、狭
叶韩信草等,具有良好的抗肿瘤活性¨’21,是近
年来国内外抗肿瘤中药的研究热点。半枝莲多
糖(Scutellariabarbatapolysaccharides,SPS)是
从半枝莲中分离的主要有效成分之一,研究
明可提高小鼠溶血素水平pJ,抑制S180荷瘤小
鼠肿瘤的生长[4’5]。本文通过建立小鼠体内移植
性肝癌模型,观察半枝莲多糖的抗肝癌作用,
并对其作用机制进行初步探讨。
阿一砑料和方法一
1.1实验材料
昆明种小鼠,18~229,雌雄各半,广东医
学院实验动物中心提供;小鼠肝癌H22细胞株,
本室保存;半枝莲多糖,本室自制;注射用环
磷酰胺(cytoxan,CTX),上海华联制药有限公
司;M1,I'、ConA和LPS,美国Sigma公司;
RPMI一1640,美国GIBCO公司;小鼠IL一2和
TNF—Ot定量ELISA试剂盒,晶美生物
有
限公司提供(进口分装)。
1.2实验方法
1.2.1荷瘤小鼠模型的建立无菌条件下取传
代6~7d的H22肝癌小鼠腹水,用生理盐水
(normalsaline,NS)稀释成含量为1×107/ml
的细胞悬液。小鼠右侧腋窝皮下接种0.2IIll细
胞悬液制备实体瘤模型。
1.2.2分组及给药将接种H22细胞24h后
的小鼠随机分为5组,每组各12只。模型组,
每天灌胃给予NS0.4ml;CTX组,腹腔注射给
予CTX20mg/(kg·d),SPS低、中、高剂量
组分别灌胃给予SPS50mg/(kg·d)、100mg/
(kg·d)、200ms/(kg·d)(用NS配制)。连
续给药10d。
1.2.3对荷瘤小鼠抑瘤率的影响末次给药24
h后,颈椎脱臼处死,常规取实体瘤称重,计
算肿瘤生长的抑制百分率(抑瘤率)。抑瘤率=
(模型组平均瘤重一治疗组平均瘤重)/模型组
平均瘤重×100%。
1.2.4荷瘤小鼠脾细胞悬液的制备无菌条件
0NCOLOGYPROGRESS,May2009.VoL7,No.3
下分离小鼠脾脏,剪碎后在200目不锈钢滤网
上用玻璃注射器针芯研磨,RPMI一1640培养液
洗涤2次制成单细胞悬液。
1.2.5小鼠脾淋巴细胞增殖实验将制得的脾
细胞悬液用RPMI一1640培养液调整浓度至1X
10‘/rnl,96孔板每:fLirt入100斗1细胞悬液,再
分别加入含ConA和LPS的RPMI一1640完全培
养液1001xl(不含酚红,终浓度为5mg/L),48h
后加入MTI'液100肛1(终浓度0.5mg/L),继续
培养4h,弃上清,每孔加二甲基亚砜150一。
酶标仪测A啪值。刺激指数SI=实验孔A值/对
照孔A值。
1.2.6IL一2和TNF—Ot含量测定收集培养
的脾细胞上清液,ELISA测定IL一2和TNF一仅
的含量。
1.3统计学方法
应用SPSSIL0软件处理数据,采用单因素
方差分析。
{2 结 果
2.I SPS对H22肝癌小鼠瘤重的影响
50~200ms/(kg·d)SPS均能抑制1-122肝
癌在小鼠体内的生长,随着给药剂量加大,瘤
重下降,抑瘤率上升,显示出一定的抑瘤趋势,
50ms/(kg·d)剂量组与模型组相比有差异
(P<0.05),100、200me,/(kg·d)剂量组与
模型组相比有显著性差异(P<0.01,表1)。
表1 SPS对1-122肝癌小鼠瘤重的影响(叉±s。n=10)
组 体重(g) 抑瘤率(%)
模型 2.424-0.93 一
CTX 0.95±0.32” 60.74
SPS(L) 2.04±0.72’ 15.7
SPS(M)1.64±0.57” 32.23
SPS(H)1.50±0.59” 38.02
注:‘P