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从系统生物学角度探讨细胞因子表达谱研究在V型狼疮性肾炎患者中的作用

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从系统生物学角度探讨细胞因子表达谱研究在V型狼疮性肾炎患者中的作用 第 31巷第 2期 2 0 1 0年 3月 西 安 交 通 大 学 学 报 (医 学 版 ) Journal of Xi’an Jiaotong University(Medical Sciences) Vo1.31 N0.2 M ar.2010 SUs ’ 从系统生物学角度探讨细胞因子表达谱研究 在 V型狼疮性肾炎患者中的作用 孙吉平,尹爱萍,杨世峰 ,严俊飞 (西安交通大学医学院第一附属医院肾病中心肾内科,陕西西安 710061) 摘要 :目的 探讨 Thl和 Th2细胞 因子表达谱研...
从系统生物学角度探讨细胞因子表达谱研究在V型狼疮性肾炎患者中的作用
第 31巷第 2期 2 0 1 0年 3月 西 安 交 通 大 学 学 报 (医 学 版 ) Journal of Xi’an Jiaotong University(Medical Sciences) Vo1.31 N0.2 M ar.2010 SUs ’ 从系统生物学角度探讨细胞因子表达谱研究 在 V型狼疮性肾炎患者中的作用 孙吉平,尹爱萍,杨世峰 ,严俊飞 (西安交通大学医学院第一附属医院肾病中心肾内科,陕西西安 710061) 摘要 :目的 探讨 Thl和 Th2细胞 因子表达谱研究在 V型疮性 肾炎 (V—I N)患者中的作用 。方法 分 离血 清,通过 抗体芯片技术同时检测 4种 Thl和 5种Th2细胞因子表达谱,并探讨其与临床指标之间的相关性。结果 ①细胞因 子表达谱:在同时检测的9种细胞因子中,V—LN患者有 4种表达上调,除了 IL-2属于 Thl细胞因子外,其他三种 (II 一4、II 一10和 IL一13)均属于 Th2细胞因子 ,其中 IL一10较健康对照升高 了 1O倍 以上 。②相关性研究 :Pearson相关 分析 示 IL一10与 SuEDAI呈正相关 、与血红蛋白浓度呈负相关 ;此外 ,IL一4和 IL一13均与尿蛋 白浓度呈负相关 ,IL一1 与血肌苷之间呈 相关 。结论 V-LN患者体内细胞因子表达异常以 Th2细胞因子为主 ,提示抗 Tb2细胞因子可能 在 V型狼疮患者中具有一定的治疗作用。 关键词:狼疮性 肾炎 ;细胞因子 ;免疫 中图分类号 :R593.24’2 文献码 :A 文章编号:167卜8259(2010)02—0193-04 Role of study on cytokine profiling in class V lupus nephritis from the perspective of system ic biology SUN Ji—ping,YIN Ai ping,YANG Shi—feng,YAN Jun fei (Department of Kidney M edicine,the First Affiliated Hospital, Medical School of Xi 3n Jiaotong University,Xi’an 710061,China) ABSTRACT:Objective To study the effects of cytokines Thl and Th2 in Class V lupus nephritis(V.LN). Methods Serum concentration of Thl cytokines(IFN一7,IL 1,IL.2 and TNF-口)and Th2 cytokines(IL.4,IL一5, IL-6,IL一10 and IL一13)were simultaneously analyzed using fast quant human Thl/Th2 protein array,and Pearson analysis was used to evaluate the association between cytokines and clinical parameters.Results ① Cytokine profiling:Among the 9 cytokines detected simultaneously by fast quant human Thl/Th2 protein array,the expression of four cytokines was up-regulated obviously,namely,Thl cytokines(IL一2)and Th2 cytokines(IL一4. IL一1 0 and IL一1 3);that of IL一1 0 was 1 0 times above the normal contro1.② Pearson correlation analysis:There was a positive correlation between 1L一10 and SLEDAI(r一 0.877,P< O.01),but a negative correlation between IL-1O and hemoglobin concentration (r一 一 0.856.P< 0 01).There was also a negative correlation between IL一4 and 24 h urine protein(,一 一0.754。P%0.05),between IL-13 and 24 h urine protein (r一 一0.769,P< 0.05) Besides, IL.1 and creatininc were positively correlated (r一 0.784,P< 0.05).Conclusion There were extensively abnormal Th2 cytokines in V—LN patients,suggesting that anti—Th2 therapy may produce a marked effect on V-LN● KEY W ORDS:lupus nephritis;cytokine;immunity 系统性红斑 狼l疮 (systemic lupus erythemato— SI E)是 一种 T细胞介导的、自身反应性 B细 胞高度增生、大量高亲和力的致病性的自身抗体产生 的自身免疫性疾病 。狼疮性。肾炎(1upus nephritis. LN)是 SLE患者较常见的最严重的并发症和死亡的 收稿 日期 :2009—06—05 修 回日期:2009—09 04 作者简介 :孙吉平(1 97 5),女 (汉族).医学博士,搏 士后 (已出站).研 究方向:狼疮性肾炎的基础和临床研究. E mail:sunjiping angel@yahoo.COFI1.cn 主要原因之一 。LN患者病程反复,伴有进展性的 组织病变 ,疾病的死亡率居高不下,目前主要是通过 应用非特异性免疫抑制剂和进行抗炎治疗。如果能 了解SLE导致肾损伤的发病机制,发现新型的低毒 性治疗方法,会更好的进行特异性的治疗,改善狼疮 性肾炎患者的预后。 伴随着免疫细胞的数量和功能上的异常,细胞因 子网络的变化对 LN病程的演进有重要的作用 :Thl 型和 Th2型细胞因子 比例失调、细胞因子水平分泌 194 西 安 交 通 大 学 学 报 (医 学 版 ) 第 31卷 增加或减少、细胞因子间相互的拮抗或协同作用增强 或减弱等都参与了 LN 的发病过程_3]。但是 ,LN属 于一种以肾脏形态学异常为基础的临床综合征 ,而且 LN发病机制十分复杂,同一个患者可 以同时存在多 种细胞因子的异常,不能孤立的看待某一种细胞因子 的异常,而多种细胞因子间的相互作用可能更为重 要 。因此,本实验以 V型 LN患者为基础 ,通过系统生 物学的研究方法,借助高通量的抗体芯片技术同时观 察 V型 LN患者血清多种细胞因子(包括 Thl细胞因 子和Th2细胞因子)的变化 ,以期从免疫学网络失衡角 度阐明 LN可能的发病机制 ,为治疗奠定基础。 1 材料与方法 1.1 病例选择 按照 1982年美 国风湿病协会 SLE 的诊断_4 选择狼疮性肾炎患者 20例 ,均为女性 , 具有肾脏累及的临床表现;均进行肾活检。根据 1985 年 WHO改良病理分型标准进行分型诊断符合弥漫膜 性肾炎(V型),根据 SLEDAI评分(SLE Disease Activi— ty Index)标准判断LN患者肾活检时疾病活动情况[5], 所有患者 3月内未使用霉酚酸酯 (M )或环磷酰胺 (CTX)等强免疫抑制剂治疗。同时选择年龄和性别匹 配的健康志愿者20例作为正常对照。 1.2 血 清细胞 因子 检测 清 晨抽 取空腹 静脉 血 5 mL,离心后留取血清,一70℃保存待测。血清细胞 因子的检测采用德 国 Whatman公 司提供 的抗体芯 片,同时定量检测 9种细胞因子的表达,其中包括 4种Thl细胞因子IL一1(白细胞介素-1)、IL-2(白细胞 介素一2)、IFNT(7一干扰素)、TNFa(肿瘤坏死 因子一a) 和 5种 Th2细胞因子 IL一4(白细胞介素-4)、IL-5(白 细胞介素一5)、IL一6(白细胞介素-6)、IL一10(白细胞介 素-10)、IL一13(白细胞介素-13)的表达。每个 因子检 测设立 3个复孔,取平均值。具体操作简述如下:玻 片装上孵育室并将玻片/孵育室一起装入玻片夹; 7O L封闭液室温封闭 15 min;常温孵育样 品过夜(轻 微振荡);洗涤 5次;生物素标记的抗体室温孵育 60 rain(轻微振荡);洗涤 5次;Streptavidin—Cy5室温 孵育45 rain(轻微振荡);洗涤 5次;DiH。0冲洗玻片 并干燥;扫描玻片,进行资料分析。 1.3 其他实验室检查 所有患者同时进行以下检 查 :①24 h尿蛋白定量 :采用双缩脲比色法,正常值< 0.4 g/24 h;②自身抗体:抗核抗体(ANA)采用间接 免疫荧光法,抗双链 DNA(dsDNA)采用短膜虫法; ③补体 C。、C :采用散射比浊法。 1.4 统计学方法 结果以均数±标准差表示。组间 差异采用Student’S t检验,并通过 Pearson相关性分 析研究细胞因子表达及淋巴细胞亚群与临床指标之 间的相关性。以 P<0.05为具有统计学差异。 2 结 果 2.1 患者的临床 实验室的相关检查 V型 LN患者 一 般临床资料见表1。V型 LN患者白细胞、血红蛋白、 补体 G和 C4均明显低于健康对照组。与健康对照相 比,白细胞计数分别为(5.015±1.426)×10。/L和 (6.271±2.730)×10。/L(P<0.O5);血红蛋 白分别为 (118.3±21.1)g/L和(124.3士6.1)g/L(P
仅限于未经强免 疫抑制剂治疗的患者 ,如果能增加部分治疗后的随访 观察结果 ,可能会对狼疮性肾炎的免疫学发病机制及 免疫抑制剂的治疗机制提供进一步的理论基础 。 参考文献 [1JHALE MB,KRUTZIK PO,SAMRA SS,et a1.Stage depend· ent aberrant regulation of cytokine-STAT signaling in murine systemiclupus erythematosus[J].PLoSOne,2009,4(8):6756. [2]刘红,丁小强.狼疮性肾炎的诊断和治疗进展 [J].郑州大学学 报 :医学版 ,2008,43(5):861-865. E3]CHENG S,HU D,SHI X,et a1.The relationship between Thl/Th2 type cells and disease activity in patients with lupus ne- phritis_J].Chin Med J(Eng1),2000,113(10):877—880. 】4】TAN EM,COHEN AS,FRIES JF,et a1.The 1982 revised cri. teria for the classification of systemic lupus erythematosus[J]. Arthritis Rheum ,1982,25(11):127l一1277. r5]wONG CK,HO CY,LI EK,et a1.Elavation of proinflamma. tory cytokine(IL一18,IL一17,IL-12)and Th2 cytokine(IL一4) concentrations in patients with system ic lupus erythem atosus 【J】.Lupus,2000,9(8):589.593. E6]DE LA TORRE M,URRA JM,BLANCO J.Raised expression of cytokine receptor gpl30 subunit on peripheral lymphocytes of patients with active lupus.A useful tool for monitoring the dis- ease activity_JJ?Lupus,2009,18(3):216-222. [7]CHUN HY,CHUNG JW,KIM HA,et a1.Cytokine IL一6 and IL-10 as biomarkers in systemic lupus erythematosus[J].J Clin Immunol,2007,27(5):461-466. [8]ZHOU YB,YE RG,LI YJ,et a1.Effect of anti.CD134L mAb and CTLA4Ig on ConA-induced proliferation,Th cytokine se- cretion,and anti-dsDNA antibody production in spleen cells from lupus-prone BXSB mice[J].Autoimmunity,2008,4 1(5): 395.4O4. [9]LU MC,LAI NS,Yu HC,et a1.Nifedipine suppresses Thl/ Th2 cytokine production and increased apoptosis of anti-CD3+ anti.CD28-activated mononuclear cells from patients with sys. temic lupus erythematosus via calcineurin pathway[J].Clin Im— munol,2008,129(3):462-470. r10]RIPLEY BJ,GONCALVES B,ISENBERG DA,et a1.Raised levels of interleukin 6 in systemic lupus erythematosus correlate with anaemia_J].Ann Rheum Dis,2005,64(6):849.853. r11]WAIS T,FIERZ W ,SToLL T,et a1.Subclinical disease activ. ity in systemic lupus erythematosus: immunoinflam matory markers do not normalize in clinical remission[J].J Rheuma. tol,2003,30(10):2133.2139. [12]MATHIAN A,KOUTOUZOV S.Interferon-alpha:a key cyto— kine in systemic lupus erythematosus pathogenesis j.Rev Med Interne,2008,29(9):696-700. [13]毕黎琦,赵吉生,王国光.系统性红斑狼疮患者免疫细胞系列分化 抗原的表达 l-J].吉林大学学报:医学版,2005,31(3):429.431. (编辑 韩维栋) (上接第 192页) [-3]WEN J,LEON E,KOST LJ,et a1.Duodenal motility in fasting dogs:humoral and neural pathways mediating the colonic brake IJ].Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol,1998,274(1): G192.G195. [4]ETO B,BOISSET M,ANINI Y,et a1.Comparison of the anti. secretory effect of endogenous forms of peptide YY on fed and fasted rat jejunum _J].Peptides,1997,18(8):1249·1255. r5]HOENTJEN F,HOPMAN WP,JANSEN JB.Effect of circu. 1ating peptide YY on gallbladder emptying in humans[J]. Scand J Gastroenter01,2001,36(1O):1086.1091. [6]PETER JM.JENNIFER M.Peptide YY Y1 receptor activates mitogen-activated protein kinase and proliferation in gut epithe- lial cells via the epidermal growth factor receptor[J].Biochem J,2000,350:655-661. r7]KAZANJIAN KK,TOWFIGH S,MCFADDEN DW.Peptide YY exhibits a mitogenic effect on pancreatic cells while impro— ving acute pancreatitis in vitro EJ].J Surg Res,2003,114(1): 95-99. [8]陈英群,董福轮,马贵同,等.三硝基苯磺酸诱导大鼠溃疡性结肠 炎的实验研究 _J].同济大学学报,2006,27(6):31-33. ~9]LA JH,KIM Tw ,SUNG TS,et a1.Visceral hypersensitivity and altered colonic m otility after subsidence of inflam mation in a rat model of colitis l-J].World J Gastroenterol,2003,9(12): 2791—2795. [1o]邹百仓,董蕾,曹铭波,等.肠易激综合征模型大鼠的大脑和消化 道中5-HT的表达与病理作用 [J].西安交通大学学报:医学版, 2008,29(1):43-46. r11]MURER H,AMMANN E,BIBER J,et a1.The surface mem. brane of the small intestinal epithelial cell: I.Localization of adenyl cyclase I-j].Biochim Biophys Acta,1976,433(3):509— 528. [12]闫嫒,董蕾.大鼠空肠粘膜上皮细胞酪酪肽受体的分布与特性 EJ].西安交通大学学报:医学版,2009,30(1):57-59. r13]KOCH TR,CARNEY JA,MORRIS VA,et a1.Somatostatin in the idiopathic inflammatory bowel disease[J].Dic Colon Rec- rum ,1988,31(3):198.203. r14]SURRENTI C,RENZI D,GARCEA MR,et a1.Colonic vaso. active intestinal polypeptide in ulcerative colitis[J].J Physiol Paris,1993,87(5):307.311. r15]EVANGELISTA S,TRAMONTANA M.Involvement of calci. tonin gene-related peptide in rat experimental colitis[J].J Physiol Paris,1993,87(4):277-280. r16]WATANABE T,KUBOTA Y,MUTO T.Substance P contai. ning nerve fibers in rectal mucosa of ulcerative colitis|J].Dis- Colon.Rectum,1997,40(6):718—725. r17]ADRIAN TE,FERRI GL,FuESSL HS,et a1.Human distri bution of a putative new gut hormone·peptide YY F-J].Gastro- enterology,1985,89(5):1070.1077. r18]ADRIAN TE,BALLANTYNE GH,ZUCKER KA,et a1.Lack of peptide YY immunoreactivity in adenomatous colonic polyps: evidence in favor of an adenoma-carcinoma sequence LJJ.J Surg Res,1988,44(5):561-565. [19]许昌泰,王瑞玲.溃疡性结肠炎患者血清胃动素肽 YYIgG和铁 蛋白的变化及意义 [J].Med J NDFNC,1997,18(3):177-178. r20]LABURTHE M,CHENUT B,TATEMOTOK,et a1.Interac. tion of peptide YY with rat intestinal epithelial plasm a mem- branes:binding of the radioiodinated peptide[J].Endocrinolo— gY,1986,118(5):1910.1917. (编辑 韩维栋)
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