雄激素对SOD1-G93A转基因小鼠发病机制作用的研究.pdf.doc

雄激素对SOD1-G93A转基因小鼠发病机制作用的研究.pdf.doc 河 北医 科 大学 学位 论 文 使用授 权及 知 识 产权归属 承 诺 矽 , 珲 ; 月 落 目 日 , 吾 ?????????????????????????? 材 料 与 方 法???????????????????????, 结果 ??????????????????????????, ( , 附 图??????????????????????????, 讨 论 ??????????????????????????, 结论 ??????????????????????????, 参 考 文 献????????????????????????, , , 瑂 , , 。 大约 , , 家 族 性 , 琒 , , 突变有 关 。 , , , 苁 奔羧? 哟 , 笪 膊孔 橹 , , 谢, 蚣 , ǎ, 悦 魅 贩 裥, , 衕 , , 基 脱 水 ; 透 明; 封 片 , , 摇 床过夜 。 次日 ， , , 洗 膜 , 危 , 看, 分 钟 。 然后 分 别加 入 抗 兔 , ( , , 软 件 ， 统 计 方 法为 多 样 本 悬尾 实 验 时可 见小 鼠开始 出 现双 后 肢 震 颤 ; 在 , , , , 天 左 右 , , ( , , 小 鼠逐 渐 出 现一侧 或双 侧 后 肢 明显无 力 、 步 态异 常 及 轻 微的 肌 肉 萎 缩; 随 后 ， 双 后 肢 进行性 肌肉 萎 缩， 不能 支撑身体 ， 进而 至少 一侧 后 肢 完 全瘫痪 ， 行走时拖 拽 ; 约 在 , , , , 天 左 右 ， 将 其 仰卧 后 , 秒 内 小 鼠不 能 自行翻 转， 体 重 下 降 超过, , ， 达 到 终末 期 。 阴 性 非转基 因小 鼠无 上述临床现。 通过免疫 印 记 法观 察在 转基 因小 鼠中 各 时期 去 势 组 较 假 手 术 组 腰髓 , 的 表达 量 均 增 加 , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , 琣 , , , , , , , , , 浚 瓵 , , , , , , , , , , : , , , , , , , 瓵 , ， , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , 【 , , 】; , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , 瑃 , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , 琽 , , , , , , , , , , , , , 琩 , , , , , , , , , , 疭 , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , В琔 , , 甌 , , , , , , , , , , , , , , , , , ( , , , , , , , , , , , ( , , , , , , , , , ， , , , , , , 痶 , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , 琧, , , , , , , ; , , , , , , , , , , , , , , , , 籥 , , , , , , , , , , , , , , ; , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , ( , , , — , , , , , , , , , , , , , , , 罶 ( , , , 羢 , 甋, , , , , , , , , , , ( , , , , , , , , , , , , , , , , , 瑃 , , , , , , , , , , , , ィ , , , 甌 , , , , , , , , , , , , , , , , , ( , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , ， , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , ( , , 畇 , , , , , , , , , , , , , , , , , 瑆 , , , , , , , , 言 和 致命性 神 经 退行性 疾病 ， 累 及 脑干及 脊 髓 前角 运 动 神 经 元 ， 逐 渐 出 现进行 , 和 :退, 庳 和 , 可 以 增 加 神 经 生长因子的 表达 ， 促进神 经 突起 的 生长 和 神 经 突触间 的 联 系， 睾酮还 可 以 在 脑内 通过芳香 化 酶的 作 用转化 为 雌 激 素 发挥 神 经 保 护 作 用。 睾酮还 具 有 抗 凋亡 及 抗 星 形 胶 质 细 胞增 生作 用， 在 材 料 与 方 法 , , 实 验 动 物 , , 膜 抗 小 鼠, , , , 荧 光二 抗 , 多 克 隆 抗 体 羊 抗 , , 多 克 隆 抗 体 , , , , ， , , , , , , , , ， , , , , , , , , 诱 袅 笏, , , , 充 分 溶 解 后 ， 高压 , , , , 罫 , , , , ( , , , , , , ， 甘 油 , , , ， 加 双 蒸 水 至 , , ， 充 分 溶 解 ， 用, , , , 管 分 装 为 , 恋 缬 局 , 敢海 撼迫 「 拾 彼 , , ， , , , , ( , , , , ( , : , , , , , , , : 量 , ， 常 温保 存 。 取 , , , , , , , 十 二 烷 基 硫 酸 , , , 诱 袅 笏, , , , 钠 , 撼迫 , , , , , 保 存 。 , , , , , , , , , , 咳 , ( , , , 电 泳缓冲 液: , , 分 离 胶 : , , , 主 要 实 验 仪 器 、 设 备 普通冰 箱 制冰 机 江苏 苏 净 集团 , , , , 瓾 , , , , 甇, , 傥 行, , , , , , , , 下 游 , , , , , 实 验 分 组 及 病 程 分 期 , , ( , , 转基 因小 鼠， 对照 组 为 成 年非转基 因同 窝 对照 小 鼠， 每 组 每 , , 手 术 处理 , , 实 验 取 材 , , 琹 , 光径 ， 蒸 馏 水 调零 后 ， 读出 取 出 玻璃 板 ， 剥离 分 离 胶 ， 分 别切 取 已 知 分 子量 的 待测 蛋白条 带 ， 标 , , 膜 置 稀 释好的一抗 中 孵 育， , 摇 床过夜 。 , , 摇 震 漂洗 , , , 次; 用, , , 性 过氧 化 物 酶; , , , , , , , , , , 魏 螅 琌( , , , , , ( , , 蚩 , , , ; , , , 、 , , , , , 糜 , , 摇 床过 , 夜 ; , , , , , , , , , 次; 加 辣根 过 氧 化 物 酶 , ( , , 软 件 进行统 计 学处理， 统 计 方 采 用, , 法为 多 样 本 参 数方 差 ; 日 附 一 , , 緊, , , , , , , , , 韈 , , ?, 篏 ? 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队 诟 咚 , 降 男奂 に于 , , 】。 , , , , , ( , , , , , , , , : , , , , , , , , , , , , , , , , 篴 甁 , , , , , ( , , , , , , : , , , ( , , , , , , , 瓾 , , , , , , ( , , , , , , , , , , , , , , 甁 , , , , ， , , , , , , , , , , , 珿, , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , : , , , , ( , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , ( , 琎 , , , , , , , , , , , , , , , , , 瓵 , , 篈 , , , 琕 , , , , , , , , , , ， , , — , , ( , , , ， , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , 甁 , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , 甁 , , , , , , , , , : , , , , ( , , , , , , , , , , , 珿, , , , , , 篴 , , ; , , : , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , 甁 , 珻 , , , , , , , , ( , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , : , , , , , , , , , , , ,,, , , , , , , , , , , , , , , , , , , ?, , , , , ; , , , , , , , , , , , , , , 甁 , , , , — , , , , , ， , , , , , , , , , , , 甆, , , , ( , , , : , , , , , , ( , , ; , , , : , , 瓾 , , , , , 甁 , 琇 , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , ， , , , , , , , , , , , 甆, , , , , , , — , ， , , , , , , , , , , , ( , , ; , , , , , , , , , , , , 甀 , 心 , , , , , ， , , , , , , ， , , 琒 , , , , , , , , , , , ( , , , , , , , , , , ( , , , , , , , , ( , , , , , , , , , , , , 篿 , , , , , , , , , , , , , , , , : , , , , , , , , ( , , , , , , ( , , ; , , , : , , , , , , , , , , , , , , , — , , , , , ( , , ; , , , : , , , , , 甁 , , , , , : , , — , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , ( , , ; , , , , , , , ( , , , , , , , , , , 疭 , , 一, , , , , ， , , ， , 籺 , , , , , , , , , , , , , , ， , 瓽， , , , , , , , , 琍 ( ， , , , , , , , 疭 , , , , , , , , 琈 ( , , , ( , , , , , , , , ( , , , ( , , , , , , , , , , ( , , 琕 , , , 珻 ( ， , , , , , , , , , ( , , , , , , 猯 , , , , , 琂 ( , 琖 , , , , , , ( , , , , ， , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , 疭 , , , , , ( , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , 琇 ( , , , ( , , , , , , , , , , , , 甁 ( , , , ( , , , , , , , , , , , , , , , , 甆, , , , ( , , , , , , , , , , , , , , , 瓺, , , , , , , , ( , , , , , , , , , , , 甆, , , , , , , , , , , , , , , , , , , 甁 ( , , , ( , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , ， , , , , , ， , , , , , , , , , , ( , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , ， , , , : , , , , , ( , , , , , , , , , , , , 瓻 , , , , , , , , , , , , : , , , , , , , , , ( , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , ， , , , , , , , , 瓵 , , , , , 首 先 感谢我 的 导师李 春 岩 院 士 ， 他不 仅 悉 心 指 导我 进行课 设 计 ， 并 在 科 研 进程 中 给 予我 许多 支持 和 帮 助， 同 时， 还 在 学习 和 生活 中 给 与 我 诸 多 关 怀 。 他科 研 作 风严谨 ， 坚持 创 新 求 实 的科 研 态度， 对科 学研 究事 业的 无 私奉 献精神 及 认 真负责 的 崇高品 德 为 我 树 立了学习 的 榜 样 ， 使我 受 益 终