【doc】固真方,益气聪明汤及活血方对果蝇寿命,遗传损伤和自由基代…

【doc】固真方,益气聪明汤及活血方对果蝇寿命,遗传损伤和自由基代… 固真方,益气聪明汤及活血方对果蝇寿命,遗 传损伤和自由基代… f啦/lo5 ?104?中国老年学杂志1994年第14卷第2期 固真方,益气聪明汤及活血方对果蝇寿命,遗传损伤和自由基 代谢影响实验研究友. 陈淑傻吴敦序童普德高述祥徐品初(r上海中医学院,上海200032) 摘要固真方,益气聪明汤,活血方分别有补肾,益气升阳健脾,活血作用.本实验研究发现:三方与 对照组相比均能延长果蝇平均寿命(P<o.05)l固真方延长I2.91%,益气聪明汤延长II.09%,活血方延长 5.70%.三方均能降低小鼠骨髓PCE的微核率(P<o,05),其中固真青3c倍组效果更佳.三方均能降小鼠肝 LPO含量(P<o.05),益气聪明汤作用较明显,并能显着提高老年小鼠肝SOD活性l固真方与活血方有提高 趋势,但无统计学意义. 关键词固真方益气聪明汤活血方果蝇寿命徽核宜由基. 中医延缓衰老大都从.补肾","健脾"入手,近 年来有人提出.活血"的延衰理论,本文以固真方, 益气聪明汤,活血方作为上述三法的代表方,进行了 果蝇寿命,小鼠微核遗传损伤及老年小鼠肝LPO, SOD含量的观察和分析., 1材料和方法 1.1实验动物及中药黑腹果蝇(DrosophilaMel— onogaster),由复旦大学遗传研究所提供.昆明种小 鼠4月龄270只,雌雄各半,体重2o士2g.ICR系16 月龄小鼠35只,同系青年4月龄小鼠7只,由本院 实验动物中心室提供.固真方由苁蓉,首乌等六味补 舒中药组成.由我院中药系制剂教研室提供.益气聪 明汤的组成与制备参照吴敦序"法,主要由黄芪,人 参等八味益气健脾升阳中药组成.活血方由红花,丹 参等六味活血中药组成,由铁路中心医院提供. 1.2实验方法果蝇寿命实验参照王厚德"法略 作修改.基础培养参照HollingsWorth.法,含玉米 粉】0,蔗糖13.5,干酵母粉1,琼酯1.5, .分组见表1.小鼠骨髓多染红细胞微核 自然pH值 (Micronucleusofpolychromaticerythrocyte简称 MNPCE)实验方法参照童普德等",分致微核遗传 损伤与抗微核遗传损伤二部分,前者从略,后部分分 组情况见表2.LPO测定参照大石诚子法,SOD测 定用光化学扩增法,参考Misra"法.蛋白测定用 Lorway法.分组见表3. 2实验结果 2.1各组果蝇平均寿命及最高寿命如表1所示. 经方差分析后,作'检验,空白对照组与三用药组比 差异均有显着性<G.o5),提示三方药均有延长果 蝇平均寿命的作用,固真方组与活血方组比差异显 着(P<o.05),与益气聪明汤组比无显着性差异(P >O.05),提示固真方延长平均寿命的效果较活血方 佳.各组最高寿命比无显着性差异(P>O.05).提示 三方不能延长最高寿命. 表1各组果蝇寿命比较 删芸平如增最命 注:*与空白组比较P<0.05 2.2三方诱发小鼠骨髓MNPCE的观察结果本 部分实验结果经统计处理后发现:生理盐水对照组 与三用药组比差异均不显着(P>0.05),与环磷酰胺 (CP)组比差异非常显着(P<O.O1),提示三方均无 致微核的遗传损伤作用,而CP则明显造成了遗传损 伤.微核见图l,2 囝l经NS处理的MNPCE _ 图2经CF处理的MNPCE 三方抗微核遗传损伤实验结果见表2,经方差分 ?105? 现三方的剂量与CP诱发的微核率呈负相关,同时也 进行了三方各剂量组均效的两两比较,发现三方的 10.30倍组均有抗微核形成作用,其中固真方30倍 组效果尤佳. 2.3三方对老年小鼠肝LPO,sOD含量影响结果 见表3.. 经方差分析和均效的两两比较后发现.老年对 照组肝LPO含量明显高于其他各组,青年组则最 低,三方药均能降低其含量,其中益气聪明汤作用效 果最明显,可与VE媲美,并且发现此方有明显提高 老年小鼠肝SOD含量的作用,固真方与活血方有提 析及剂量与微核率之间的回归检验(P-~0.01)后,发高趋势,但无统计学意义. 表2三方抗CP诱发的小鼠骨髓MNPCE的观察结果 注t与NS+CP组比*P<O.05,?*P<O.01 表3三方对老年小鼠肝LPO,sOD笛量l影晦结果. .-.————.-.--—--—-——.--....-.—....................-...........'..I1.:....-...L …. 动物数肝组织LPO含量肝组织SOD含量组别 (只)(M,g湿组织)(g,g蛋白一 注l与老年对照组比*P<O.05,与VE组比#P<o.05 3讨论 判断一种药物是否有延衰效果,最为准确可靠 的方法是进行动物生存试验,由于果蝇具有高度纯 种性,繁殖快,管理简便,生存期短,并且它的许多 ? 代谢途径,发育分段同哺乳动物基本相似",所以果 蝇生存实验是国内外常用的检验药物延寿接应的可 靠方法..本实验结果表明三个用药组均可延长果蝇 平均寿命,但不能延长其最高寿命.按Bindrac,'观 点,把仅能延长平均寿命的药物也列入延衰药范围, 撤固真方,益气聪明汤,活血方有延衰作用,其中补 肾延寿的作用最明显. 目前有学者认为生存过程中DNA损伤及修复 的错误是致衰的主要原因.微核在临床骨髓和外周 血检查中称为豪——杰氏小体,七十年代初Mat: ter0等建立了体内微核试验方法,并指出测定骨髓 PCE的微核发生率是检验细胞遗传损伤的一个非常 有用,简便的指标,因而此法广泛被采用.由于药物 毒性可能抑制骨髓增殖,PCE与NCE的比值下降 (P<0.01),而造成微核减少,本实验统计了PCE/ ? 10分? NCE值,均大于0.1,说明采用的药物剂量无明显的 骨髓抑制毒性,即微核的减少是中药作用的结果.由 于中药组成,配伍,剂量等不同,效果也有所不一, 其中圊真方效果最好,提示补肾法有保护DNA,减 少DNA损伤积累的作用,从而达到延衰的目的,也 证实了中医以肾为先天的理论. 自由基学说认为机体清除自由基能力降低,过 多的自由基使体内脂质迁氧化(LP0)作用增强,使 富含不饱和脂肪酸的生韧膜,动脉和中枢神经系统 受到损害,因此加速?'衰老.超氧化物歧化酶 (SoD)广泛分布于生物体内,能催化0的化学反 t,,n 应:20+2H_=H:C+0t,现已证实S0D活力 的降低与衰老关系密切..VE是一种抗氧化剂,可 抑制多不饱和脂肪酸的过氧化作用,本实验从益气 升阳健脾方药提高SOD,降LP0含量可与VE媲 美,证实了中医养后天使机体内外环境中不良因素 的作用得以保全,而能延年. 在中医衰老理论中影响最大的是"五脏虚衰" 说,其中肾,脾的虚衰尤被重视,因此中医延年亦大 都强调培补先后天之根本.瘀血是一种病理产物,如 <医林改错》."元气既虚,必不能达于血管,血管无 气,必停留而瘀",瘀血虽可致病,却是继发病因,故 中国老年学杂志1994年第14卷第2期 活血化瘀虽可延衰,但毕竟非治本之法,这可能就是 其效果不如补肾与益气健脾法的原因. 4参考文献 1.吴敦序.益气聪明汤的研究..国际中西医学术会议论文 汇编,上海t1987t页码. 2.王厚德,老年学实验用果蝇饲养管理方法的研究.老年 学杂志,1983}3(2)i4. 3.HollingsworthMI.Thenutritionalrequiementsfor longevityindrosophila.JInsetphysiol,1970;16:1017. 4.童普德.固真胶囊的遗传损伤和抗遗传损伤作用的研究 . 上海中医药杂志,1987;(5):46. 5.大石诚子.过酸化脂质测定方法.最新医学,1987; (4)t660. 6.MisraHP.ArchBiochemistryandBiophysic,1977;181: 308. 7.BindraIs(肖德桢译).抗衰老药物.老年生物学与医学 . 北京科学出版社,1981;68. 8.MatterB,SchmidW.MutationRes,1971;12:417. 9.刘吉生.自由基与衰老.国外医学?老年医学分册, 1984;(5)l147. [1993—07—06收稿1993—10—08修回] (编辑胡国义) l9一f..).. 棉花根对老年小鼠红细胞和脑内SOD活性及 MDA含量的影响' 欧王玉民白书阁玄花1(佳木斯医学院生化教研室,佳木斯154002) (佳木斯医学院附属医院?.?0_-?_?0'r,r??r? ,?' 摘要采用自然衰老的小鼠,观察棉花根水煎荆对老年小鼠红细胞和脑内超氧化物歧化酶(SOD)活性 和脂质过氧化物的代谢产物丙二醛(MDA)含量的影响.实验结果表明t棉花根可使老年小鼠红细胞和脑内 MDA含量明显下降,SOD活性增高,SOD/MDA的比值显着升高.提示棉花根可抑制老年小鼠体内脂质过氧 化物的生成,提高SOD活性,进而延缓机体,尤其是脑的衰老过程. 关键词蒽垄芝超氧化物歧化酶垦三耄继衰—---?'-——?一?—————'_,I,,V衰 老是一个极为复杂的过程,自由基促使衰老老年小鼠红细胞和脑内SOD活性及脂 质过氧化产 过程加快的作用已有确切报道.有些研究提出SOD 可作为较敏感的指标,SOD活性随增龄而下降,而脂 质过氧化作用增强.中药黄苠的抗衰老作用已得到 证实.棉花根(RadixGossypiihirsuti)的药物效应 与黄芪相似,关于棉花根的抗衰老作用的实验研究 目前尚未见.本文选用棉花根水提液观察它对 ' 1在读硕士研究生 物MDA含量的影响,寻求较为理想的抗衰老药物. 1材料与方法 1.1动物的选择与处理实验用25只健康昆明种 老年小鼠(12,14月龄).随机分为三组,第1组为 老年对照组,每日10ml自来水灌服;第2组为实验 组,每日Sg/kg体重灌服棉花根水煎剂,棉花根常法 煎制,浓缩至每毫升含生药量0.5g,连续灌服40日;