[分享]9[1].22氨氮测定(纳氏比色法Ⅰ)

[分享]9[1].22氨氮测定(纳氏比色法Ⅰ) 水样中氨氮的测定 (?.纳氏试剂比色法)(A) 1.试验目的及要求 (1)掌握纳氏试剂比色法的原理及操作; (2)熟悉水样中干扰组分的去除方法; (3)进一步熟练分光光度计的使用及标准曲线制作方法。 2.方法原理 在水样中加入碘化钾和碘化汞的强碱溶液(纳氏试剂)，与氨反应生成淡红棕色胶态化合物，此颜色在较宽的波长范围内具有强烈吸收。通常于410~425nm波长范围内测吸光度，利用标准曲线法求出水样中氨氮的含量、 本法最低检出浓度为0.025mg,L，测定上限为2mg,L。水样作适当的预处理后，本法适用于地面水，地下水，工业废水和生活污水中氨氮的测定。 3.仪器和试剂 (1)分光光度计。 (2)50mL比色管及常用的玻璃仪器。 (3)无氨水(水样稀释及试剂配制均用无氨水)。 (4)10,硫酸锌溶液:称取10g硫酸锌溶于水，稀释至100mL。 (5)25,氢氧化钠溶液:称取25g氢氧化钠溶于水，稀释至100mL。贮于聚乙烯瓶中。 (6)1mol,L盐酸溶液，用于调节水样pH值。 (7)1mol,L氢氧化钠溶液，用于调节水样pH值。 (8)淀粉-碘化钾试纸 (9)纳氏试剂:称取20g碘化钾溶于100ml水中，边搅拌边分次少量加入二氯化汞(HgCl)2结晶粉末约10g，至出现朱红色沉淀不易溶解时，改为滴加饱和二氯化汞溶液，并充分搅拌，当出现微量朱红色沉淀不易溶解时，停止滴加氯化汞溶液。 另称取60g氢氧化钾溶于水，并稀释至250ml，充分冷却至室温后，将上述溶液在搅拌下，徐徐注入氢氧化钾溶液中，用水稀释至400ml，混匀。静置过夜。将上清液移入聚乙烯瓶中，密塞保存。 (10)酒石酸钾钠溶液:称取50g酒石酸钾钠(KNaCHO4HO)溶于100mL水中，加热煮?4462 沸以除去氨，放冷，定容至100mL。 (11)铵标准贮备液:称取3.819g经100?干燥的优级纯氯化铵(NHCl)溶于水中，移入1000mL4 容量瓶中，稀释至标线。此溶液每毫升含1.00mg氨氮。 (12)铵标准使用液:移取5.00mL铵标准贮备液于500mL容量瓶中，用水稀释至标线。此溶液每毫升含氨氮0.010mg。 4.操作步骤 (1)样品采集与保存 采集具有代性的水样于聚乙烯瓶或玻璃瓶中。采样后尽快分析，否则应在2~5?下存放，或用硫酸(加入量要少)将样品酸化，使其pH值小于2(应注意防止酸化后的样品吸收空气中的氨而被污染)。 (2)水样预处理 对于较清洁水样，采用絮凝沉淀法;对于污染严重的地面水或工业废水，则用蒸馏法消除 干扰。此处采用絮凝沉淀法。 步骤:取100mL水样于具塞量筒或比色管中，加入10,硫酸锌溶液1mL和25,氢氧化钠溶液0.1~0.2mL，调节pH至10.5左右，摇匀。放置使之沉淀，用经无氨水充分洗涤过的中速滤纸过滤，弃去初滤液20mL。若样品中含有余氯，可在絮凝沉淀前加入适量硫代硫酸钠溶液，用淀粉—碘化钾试纸检验。若絮凝沉淀法处理后仍浑浊或有色，应采用蒸馏法处理水样，用硼酸水溶液吸收。 (3)标准曲线的绘制 吸取0、0.50、1.00、3.00、5.00、7.00、和10.00mL铵标准使用液分别于一组50mL比色管中，加水至标线，加1.0mL酒石酸钾钠溶液，混匀。加1.5mL钠氏试剂，混匀。放置10min后，在波长420nm处，用光程20mm的比色皿，以水为参比测定吸光度。经空白校正后，得到校正吸光度，绘制以氨氮含量(mg)对校正吸光度的标准曲线。 (4)水样测定 ?对于经絮凝沉淀预处理后的水样，分别适量该水样(使氨氮含量不超过0.1mg)，加入50mL比色管中，稀释至标线。 ?向上述比色管中分别加入1.0mL酒石酸钾钠溶液，混匀。再加入1.5mL钠氏试剂，混匀。放置10min后，铵标准曲线绘制的条件测定水样的吸光度。 (5)空白实验 以50mL无氨水代替水样，做全程序空白测定。 (6)数据的记录及处理 表1 标准曲线绘制的数据记录表(9.22) 铵标液的体0 0.50 1.00 3.00 5.00 7.00 10.00 积V/mL 氨氮的量0 0.005 0.01 0.03 0.05 0.07 0.1 mg/ml 吸光度A 0.00 0.025 0.042 0.098 0.195 0.292 0.378 表2 水样氨氮测定的数据记录表(9.21) 水样编号 水样的体积 水样的吸光度 1调节池(1) 4 0.176 2调节池(2) 6 0.289 3调节池(3) 8 0.377 4二沉池(1) 4 -0.012 5二沉池(2) 6 -0.003 6二沉池(3) 8 -0.001 7厌氧池(1) 4 0.239 8厌氧池(2) 6 0.360 9厌氧池(3) 8 0.468 5.结果处理 (1)纳氏比色法测定氨氮的标准曲线 0.45 y = 0.0387x + 0.00060.42R = 0.99290.35 0.3 0.25系列1 线性 (系列1)0.2 0.15 0.1 0.05 0 024681012 (2)水样中氨氮含量的计算 由水样测得的吸光度减去空白实验的吸光度后，从标准曲线上查得氨氮含量(mg)。 氨氮(mg,L)=m,V×1000 样 式中 m—由标准曲线查得的氨氮含量，mg; V样—水样体积，mL。 表3 水样氨氮测定的数据处理结果表(9.21) 水样编号 水样的体积 水样的吸光度 水样中氨氮的含量 mg/L 1调节池(1) 4 0.176 13.36 2调节池(2) 6 0.289 0.534 3调节池(3) 8 0.377 0.588 4二沉池(1) 4 -0.012 17 5二沉池(2) 6 -0.003 16.42 6二沉池(3) 8 -0.001 12.94 7厌氧池(1) 4 0.239 8厌氧池(2) 6 0.360 9厌氧池(3) 8 0.468 6.注意事项 (1)钠氏试剂中碘化汞与碘化钾的比例对显色反应的灵敏度有较大影响，因此静置后生成的沉淀应除去。 (2)滤纸中常含有痕量铵盐，使用时注意用无氨水洗涤。所有玻璃皿应避免实验室空气中氨的玷污。