八珍颗粒微生物限度检查法的验证[权威精品]

八珍颗粒微生物限度检查法的验证[权威精品] 八珍颗粒微生物限度检查法的验证-权威精品 本文档格式为WORD,感谢你的阅读。 最新最全的 学术 期刊文献 年终总结 年终报告 个人总结 述职报告 实习报告 单位总结 摘要:目的 建立八珍颗粒微生物限度检查并进行验证。方法 按《中国药典》2010年版一部的要求，对细菌、霉菌及酵母菌计数方法和控制菌检查方法进行验证。结果 八珍颗粒可按常规法进行微生物限度检查。 结论 为保证药品的微生物污染能被检出，应对药品的微生物限度检查进行验证。 关键词:八珍颗粒 微生物限度检查 方法验证 八珍颗粒由党参、炒白术、茯苓、炙甘草、当归、炒白芍、川芎、熟地黄八种中草药组成，用于气血两亏，面色萎黄，食欲不振，四肢乏力，月经过多。 为保证微生物限度检查结果的可靠有效，应对检查进行方法验证，保证药品的微生物污染能被检出。 1.试药、仪器与培养基 1.1 试药 八珍颗粒(宁波利华制药有限公司，批号:130204) 1.2 仪器 电热恒温培养箱，电子天平，高压蒸汽灭菌器。 1.3 实验用菌种 大肠埃希菌[CMCC〔B〕44 102]、金黄色葡萄球菌[CMCC〔B〕26 003]、枯草芽孢杆菌[CMCC〔B〕63 501]、白色念珠菌[CMCC〔F〕98 001]、黑曲霉[CMCC〔F〕98 003]，以上均为购自山东省食品药品检验所的第三代菌种。 1.4 培养基 营养琼脂培养基(1103162)，玫瑰红钠培养基(110222)，营养肉汤培养基(101215)，改良马丁培养基(110211)，pH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液(1103232)，北京三药科技开发公司;胆盐乳糖培养基(20130326)，MUG培养基(20121126)，青岛高科园海博生物技术有限公司。 1.5 供试液制备 取供试品10g，加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，混匀，作为1:10的供试液。 2.细菌、霉菌及酵母菌计数方法验证 2.1 菌液制备 取大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中，34?培养24小时，取白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基中，26?培养24小时，上述培养物用0.9%氯化钠溶液稀释到50-100cfu/ml的菌悬液备用;取黑曲霉的新鲜培养物至改良马丁琼脂斜面培养基上，26?培养7天，加入5ml含0.05%聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱，吸出孢子悬液至无菌试管，用含0.05%聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液稀释到50-100cfu/ml的孢子悬液备用。 2.2 细菌计数方法验证[1] 2.2.1 试验组 取1:10的供试液1ml注入平皿中，再分别注入1ml 2.1中制备好的大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌菌悬液，倾注营养琼脂培养基。 2.2.2 菌液组 各取1ml 2.1中制备好的大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌菌悬液，分别注入平皿中，倾注营养琼脂培养基。 2.2.3 供试品对照组取1:10的供试液1ml注入平皿中，倾注营养琼脂培养基。 2.3 霉菌及酵母菌计数方法验证[1] 2.3.1 试验组 取1:10的供试液1ml注入平皿中，再分别注入1ml 2.1中制备好的白色念珠菌菌悬液和黑曲霉孢子悬液，倾注玫瑰红钠琼脂培养基。 2.3.2 菌液组 各取1ml 2.1中制备好的白色念珠菌菌悬液和黑曲霉孢子悬液，分别注入平皿中，倾注玫瑰红钠琼脂培养基。 2.3.3 供试品对照组 取1:10的供试液1ml注入平皿中，倾注玫瑰红钠琼脂培养基。 各试验菌分别进行3次独立的平行试验，分别计算各试验菌每次实验的回收率。各组计数及试验组的菌数回收率见表1。 2.4 结果 表1显示5株试验菌株的3次回收率均高于70%，八珍颗粒可用常规法进行细菌、霉菌及酵母菌计数。 3 控制菌检查方法验证[1] 3.1 菌液制备 取大肠埃希菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中，34?培养24小时，上述培养物用0.9%氯化钠溶液稀释到50-100cfu/ml的菌悬液备用。 3.2 供试品组 取1:10供试液10ml接种至100ml胆盐乳糖培养基中， 34?培养24小时，取上述培养物0.2ml至5mlMUG培养基试管中，于5小时、24小时在366nm紫外光下观察;沿培养管的管壁加入数滴靛基质试液，观察液面颜色。 3.3 试验组 取1:10供试液10ml、3.1中制备好的大肠埃希菌菌悬液1ml(50-100cfu)接种至100ml胆盐乳糖培养基中，方法同3.2。 3.3 阳性对照实验 取3.1中制备好的大肠埃希菌菌悬液1ml(50-100cfu)至100ml胆盐乳糖培养基中，方法同3.2。 3.4 阴性对照实验 取pH7.0无菌氯化钠蛋白胨缓冲液10ml至100ml胆盐乳糖培养基中，方法同3.2。 观察结果见表2 3.5 结果 试验组检出大肠埃希菌，表明八珍颗粒可用常规法进行控制菌检查。 4 讨论 通过方法验证，八珍颗粒可以采用常规平皿法进行细菌、霉菌和酵母菌计数，可用常规法进行控制菌检查。由于微生物限度检查易受试验条件的影响，中国药典规定要进行方法验证，以确保在检验条件下被污染的微生物能被检出，因此所有药品的微生物限度检查均需进行方法验证，确保所用方法适用于该药品的微生物限度检查。 参考文献: [1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].中国医药科技出版社，2010，附录:附录? C 79-88. 阅读相关文档:吡咯列酮治疗2型糖尿病的疗效及安全性 孕期问与答 乳房术后修复重建意愿的调查分析 血清CA125水平升高在肝硬化和原发性肝细胞癌中的检验价值 血清孕酮(PGN)检测在异常妊娠诊治中的临床意义 β—阻滞剂治疗充血性心力衰竭的应用分析 乳腺癌保乳手术60例临床观察 妈妈淘宝 2013年9期 童书排行榜 新隔代情 2013年9期 健康留言板 教育问与答 放松身体,发挥潜力 营养问与答 治慢性盆腔炎验方 健康问与答 那本最该读的书 环球资讯 2013年9期 农场风情一日游 爱打嗝的斑马 妈妈俱乐部 社区独特的风景线 关于儿童哮喘妈妈应该知道的7个为什 最新最全【学术论文】【总结报告】 【演讲致辞】【领导讲话】 【】 【党建材料】 【常用范文】【分析报告】 【应用文档】 免费阅读下载 *本文收集于因特网，所有权为原作者所有。若侵犯了您的权益，请留言。我将尽快处理，多谢。*