转基因食品论文转基因检测论文：某市市售马铃薯转基因成份检测

转基因食品论文转基因检测论文：某市市售马铃薯转基因成份检测 转基因食品论文转基因检测论文:某市市售马铃薯转基因成 份检测 【摘要】目的 检测某市售马铃薯转基因成分。方法 采 用ctab法提取样品的基因组dna，分别设计启动子camv 35s (promoter from canliflomer mosaic virus，花椰菜花叶 病毒35s启动子)和终止子nos(nopaline synthase lerminator，胭脂碱合成酶3’转录终止子)作为特异性引 物，然后对基因组dna进行pcr扩增检测，根据扩增后产物 的琼脂糖凝胶电泳图可分析出其中是否含有转基因成分。结 果 10份马铃薯样品中5份检测出含有转基因成份，占检测 样品的50%。结论 由结果推断出出现在银川市场上销售的转 基因马铃薯占总的马铃薯销售量的比例为50%。 【关键词】转基因食品 转基因检测 dna提取 马铃薯 detection of genetically modified potatos from market 【abstract】objective detection of genetically modified potatos frommarket. methods this study is about using the exogenous promoter and lerminator which often used in genetically modified organisms such as camv 35s (promoter from canliflomer mosaic virus) and nos (nopaline synthase lerminator) as the detection primers to genetically engineered detect on yinchuan city’s commercial potato. first of all is extract genomic dna with ctab, then carried out pcr amplification on genomic dna. according to the pcr amplification product’s agarose gel electrophoresis can analyze whether it contains genetically modified ingredients. results the results showed that: 50 % of potato samples were detected to contain genetically modified ingredients.conclusion wereduce that 50 % of potato include genetically modified ingredients in yinchuan’s market. 【key words】 genetically modified food gm testing dna extraction potato 本研究以转基因作物使用的启动子和终止子作为转基 因检测指标，分别设计启动子camv 35s(promoter from canliflomer mosaic virus，花椰菜花叶病毒35s启动子) 和终止子nos(nopaline synthase lerminator，胭脂碱合 成酶3’转录终止子)的特异性引物，对银川市售马铃薯进 行转基因检测。 1 和方法 1.1 材料 从银川市各个市场及超市随机购买马铃薯。 液氮、研钵、1.5ml ep管、恒温水浴锅、离心机、电泳 仪、微波炉、凝胶成像系统、pcr扩增仪、高压灭菌锅等。1mol/l tris-hcl(ph8.0)、0.5m edta(ph 8.0)、ctab提取液、3mol/l醋酸钠(ph 5.6) 1.2 方法 1.2.1 基因组dna的提取 按照参考文献[2] 提取基因组dna。 1.2.2 电泳检测 将提取出来的10组dna产物进行琼脂糖凝胶电泳，用凝胶成像系统观察、照相、记录。检测其是否为dna以及其纯度如何。 1.2.3 对提取产物的pcr检测[3-4] 1.2.3.1 设计引物 18s:18s rdna camv 35s:promoter from canliflomer mosaic virus，花椰菜花叶病毒35s启动子 nos:nopaline synthase lerminator，胭脂碱合成酶3’转录终止子 1.2.3.2 pcr反应体系 按照wizard pcr prepsdnapurification system试剂盒要求进行pcr反应。 2 结果 2.1 马铃薯dna的电泳图 从图中(图1-1)可见1-10号样品均成功提取出基因组dna。 2.2 pcr检测 2.2.1 内标的检测 对马铃薯样品dna用18s rdna引物进行pcr扩增，如果出现预期大小的条带，则说明提取出的基因组dna能够经过pcr扩增得出特定序列，可进一步用于外源基因检测并进行转基因成分的判定;如果没有出现预期大小的条带，则重复dna提取，直到扩增出目标条带。本实验分别对马铃薯样品dna用18s rdna引物进行pcr扩增后，扩增出特异条带且大小与理论值相符，扩增结果如图1-2。 图1-2 马铃薯18s引物pcr扩增电泳图 2.2.2 外源基因的检测 对提取出的马铃薯样品基因组dna设计适当的引物进行pcr测试，如果待测样品pcr扩增产物的电泳图中出现预期大小的电泳条带，则可初步判定待测样品中含有可疑的外源基因;如果电泳图中未出现预期大小的电泳条带，则可断定待测样品中不含有该外源基因。 下图为马铃薯nos扩增图片(图1-3)，图中可见4号样品出现了预期的200bp左右的目标条带，与理论的180bp相符，可判定其含有转基因成分。 图1-3 马铃薯nos引物pcr扩增电泳图 下图为马铃薯35s扩增图片(图1-4)，图中可见1、2、3、4、6号这五个样品出现了预期的200bp左右的目标条带，与理论的195bp相符，可判定其含有转基因成分。 图1-4 马铃薯35s引物pcr扩增电泳图 3 结论 观察外源基因扩增电泳图，可发现:马铃薯nos电泳图中，只有4号样品出现180bp的目标条带，明其中含有nos基因，马铃薯35s电泳图中， 1、2、3、4、6五个样品出现了195bp大小的目标条带，表明1、2、3、4、6五个样品中含有camv 35s基因，综合判定该五个样品含有转基因成份。由此可推断出现某市场上销售的转基因马铃薯占总的马铃薯销售量的比例为50%(由于受取材时间和地点的影响，本实验结果仅供参考)。 4 讨论 一般而言、对某种物质安全性检测的指标主要包括急、慢性毒性，遗传毒性，致癌，致畸，致突变性等。转基因食品由于在生产设计中是针对食品品质改造或增加已知健康作用的成分，一般来说，安全问不会太突出。这与从自然条件下经杂交所获得之动植物新品种作为新型食品不存在安全问题的道理是一样的。目前国际上也没有发现人们食用转基因食品后有什么不良反应。但是在科学上，对一种没有表现短期毒性和安全性的食品，则必须观察其远期毒性和安 全性问题是否存在，因此，在远期安全性问题未得到明确结 论之前，加强对转基因食品的管理是非常重要和合理的。 参考文献 [1]雷虹.关于转基因食品问题的探讨[j].商场现代 化,2008,08(547):57-58. [2] 张莹,张永军,吴孔明等.转基因植物的检测策略和 检测技术[j].植物保护,2007,33(1):11-14. [3] transformation methods and genetic elements introduced into crops [eb/ol] 2 /97. http : //www. bats. ch/abster/297 intro.html.