免疫荧光步骤

免疫荧光步骤 我做的是zo-1的免疫荧光，步骤如下： 1、细胞在盖片上生长融合到95％－100％时，从孵箱中取出。 2、用预温的1×PBS洗3次，每次10分钟 3、4％的甲醛室温固定20－30分钟 4、1×PBS洗3次，每次10分钟 5、0.2％Triton X－100透化2－5分钟 6、1×PBS洗3次，每次10分钟 7、5%BSA室温封闭30分钟 8、加一抗（用1％BSA稀释）放在湿盒里，4度过夜 9、1×PBS洗3次，每次10分钟 10、加二抗（用1％BSA稀释）30分钟，闭光！！！ 11、1×PBS洗3次，每次10分钟 12、95％甘油封片 注：4%甲醛，0.2%Triton，5%BSA均用1×PBS稀释