放射增效剂9402号对小鼠小肠隐窝上皮细胞增敏作用的研究

放射增效剂9402号对小鼠小肠隐窝上皮细胞增敏作用的研究 放射增效剂9402号对小鼠小肠隐窝上皮细 胞增敏作用的研究 ? 1O?中国辐射卫生2007年3月第16卷第1期ChinJRadiolHealth,Mar2007,Vol16,No1 【论着】 放射增效剂9402号对小鼠小肠隐窝上皮细胞增敏作用的研究 刘晓秋.王荣先.李美佳.顾菲.韩英 中图分类号:R81文献标识码:A文章编号:1004—714X(2007)01-0010-02 【摘要】目的观察9402号对小鼠小肠隐窝上皮细胞的增敏作用.方法制做小鼠小肠组织切片,镜下观察 不同剂量点单纯照射组和加药照射组小鼠小肠再生隐窝数.结果各剂量点的单纯照射组小鼠小肠再生隐窝数与加 药照射组相比均无明显差异,经统计学处理P>0.05.9402号与?co射线联合作用,对小鼠小肠隐窝上皮细胞的增 敏比为1.02.结论9402号对正常小肠粘膜隐窝上皮细胞无明显增敏作用. 【关键词】放射增效剂;小鼠小肠隐窝;9401号药 Effectsof9402totheSensibilityoftheEpitheliaofMouseSmallIntestinalCrypts.LIUXiao —qiu,WANGRong—xian. cta1.InstituteofRadiationMedicine,ChineseAcademyofMedicalSciences,PekingUnion MedicalCollege,Tia~n 30ol92.China. 【Abstract】ObjectiveToobserveontheeffectof9402tothesensibilityoftheepitheliaofmousesmallintes tinal crypts.MethodsPuttissueslicesofthemousesmallintestinalunderthemicroscope.andthent oobservethenumberofthe regeneratedmousesmallintestinalcryptsunderdifferentdoseofsoleradiation,andradiation plusdrug.ResultsInthecir— cumstancesofdifferentdose,itallshowednoobviousdifferencebetweenthesoleradiationgr oupandthegroupofradiation plusdrug.Uponstatisticadiustment.itstilldidnotshowobviousdifference(P>0.05).Inca seofiointimplementationof 9402andCo,thesensibilityratiois1.02.Conclusion9402hasnoobviouseffecttothesensibili tyofnormalsmallin— t~stirha]crypts. 【Keywords】Radiosensitizer;MouseSmallIntestinalCrypts;No.9402Drug 烟酰胺是近年来国内外研究较多的放射增敏剂, 经研究发现,它对体外培养的恶性肿瘤细胞以及对人 类恶性肿瘤移植瘤均有明显的放疗增敏作用,而且毒 性低?l2J.9402号是以烟酰胺为母体化合物合成的烟 酰氨基酸类化合物,其放射增敏作用比母体化合物烟 酰胺效果更好,而且毒性更低.为了观察9402号对 正常组织是否有增敏作用,我们研究了9402号对小鼠 小肠隐窝上皮细胞的增敏作用. 基金项目:天津市自然科学基金资助(No.043610411) 作者单位:巾国医学科学院放射医学研究所,天津300192 作者筒介:刘晓秋(1959一)女,研究员,研究方向:放射生物学. 1材料与方法 1.1实验动物昆明种小鼠,由中国医学科学院实 验动物研究所提供,体重18—22g.许可证号:SCXK 京2004—0001. 1.2药物94O2号药(N一烟酰基一L一天门冬氨酸), 为白色块状晶体,含量大于99%,熔点182—191oC.由 中国医学科学院放射医学研究所药物室合成. 1.3照射条件?co射线,全身照射,剂量率81.79 cGy/min. 1.4给药及实验分组实验分为单纯照射组,加药 照射组和正常对照组.照射剂量分别为7Gy,9Gy, 离辐射可能作为应激源,刺激机体细胞因子网络激 活,导致造血组织等损伤.我们的研究表明,除全身 照射外,半身照射也可引起血清中TNF—ot水平的增 高,可能与未照射部位损害表现相关. 因此我们推测,局部照射后,一方面,电离辐射可 引起受照局部组织产生直接损害,同时形成大量自由 基,激活细胞因子网络,通过血液循环,导致未受照部 位组织细胞的继发损伤;另一方面,在一定程度上影 响造血干/祖细胞的动员,再分布,定植,存活等环节, 抑制骨髓造血细胞功能.电离辐射的旁效应,为辐射 防护提出了新的研究思路和方向?…. 参考文献: [1]LorimoreSA,CoatesPJ,WrightEG.Radiation—induced genomieinstabilityandbystandereffects:inter—related nonttr-getedeffectsofexposuretoionizingradiation[J]. 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(收稿日期:2006—07—07) 中国辐射卫生2007年3月第】鲞第cIl垦!尘!竺!1 11Gy,13Gy,和15Gy,每一剂量组8只小鼠.照射前 40min,加药照射组腹腔注射9402号1000mg/kg(生 理盐水稀释),照后3.5d断颈处死小鼠取小肠(幽门 下3cm处取2cm长度,分5段,每段做3张切片), 10%福尔马林固定后石蜡包埋,HE染色. 1.5实验结果的评价方法按WithersHR方法镜 下计数小肠隐窝数.隐窝再生为:隐窝细胞数> l0个,核大,胞浆少,嗜碱性明显以及有核分裂象,细 胞呈密集状.不能再生的隐窝为无细胞或细胞分散, 增大,胞浆嗜酸性. 1.6统计学处理全部实验数据用origin软件处理 拟合作图,求增敏比. 2结果 正常组小鼠小肠肠环组织切片可见小肠绒毛尖 耸致密,排列有序,隐窝深遂,腺体丰富.绒毛上皮细 胞整齐,形态正常.照射后,由于隐窝底部的干细胞 失去增殖能力,绒毛上皮变性肿胀,胞浆空泡,胞核崩 解.照后3.5d处死小鼠开腹取材,镜下可见照射组 和加药照射组自11Gy起肠管明显充血,水肿,肠壁变 薄,随照射剂量的加大,上述改变逐渐加重,两组小鼠 肉眼检查所见差别不大.镜下7Gy组小肠隐窝上皮 细胞与正常组无明显差别,随照射剂量的增大,小肠 粘膜绒毛逐渐变短,存活隐窝上皮细胞数量逐渐减少 直到绒毛变平,消失.照射组和加药照射组小鼠小肠 再生隐窝数量的变化见表l.根据所得数据,得出照 射组及加药照射组的剂量生存曲线如图l所示,两条 曲线的直线部分斜率之比为((6.779/6.6518),增敏 比(SER)为1.02.对两条剂量生存曲线的直线部分 进行回归分析,得出加药照射组回归方程为Y= 6.6518X+96.878(y为再生隐窝数,为照射剂量, 单位:Gy.r=0.96113),照射组的回归方程为Y= 6.779X+96.725(r=0.96291). 表1每个肠圈再生隐窝数(?s) 注:各荆量点的单纯照射组小鼠小肠再生隐窝数与加药照射组相比 差异均无显着性,p>O.05. 1o0 盏10 矗 照射剂量/Gy 图l照射组和加药照射组的剂量生存曲线 3讨论 理想的增敏剂为即能增强对肿瘤细胞的辐射敏 感性,而又对正常组织无明显毒性,因为在放疗中,照 射视野内也包括有部分正常组织,因此在研究增敏剂 对肿瘤细胞增敏作用的同时,也应对正常组织的效应 做出评价.为了提高肿瘤细胞的辐射敏感性,国际上 从上世纪60年代起研究放射增敏剂,已获得一些增敏 效价很高的药物,并试用于临床,如硝基咪唑类化合 物MISO等,但由于存在明显的毒副作用,且有效剂量 与中毒剂量接近,从而限制了其在临床上的应用J. 烟酰胺是近年来国外研究较多的放射增敏剂,毒 性低,放射增敏作用显着,现已进入三期临床试用阶 段.9402号是以烟酰胺为母体化合物合成的烟酰氮 基酸类化合物,9402号对肿瘤细胞的增敏作用已经 肯定,但对正常组织是否有增敏作用,本实验主要观 察9402号与辐射联合应用对小鼠小肠隐窝的影响. 小肪隐窝上皮细胞是哺乳动物体内更新最快,也 是对电离辐射最敏感的组织之一.Quastler等通过大 量实验证明,当全身1次照射的剂量超过导致100% 死亡的剂量时,动物的死亡时间一般在3.5d左右,即 使剂量再增加l0倍,动物死亡时间也不会改变,小肠 隐窝可在动物死亡之前出现再生,由于小肠上皮细胞 的这些生物学特点,我们选在照后3.5d断颈处死小 鼠,制作小肠组织切片,镜下观察不同剂量点单纯照 射组和加药照射组小鼠小肠再生隐窝数,研究结果表 明,各剂量点单纯照射组小肠再生隐窝数与加药照射 组相比,差异均无显着性(P>0.05),这与小肠切片 的形态观察结果也相一致.9402号与帅co射线联 合作用,对小鼠小肠隐窝上皮细胞的增敏比为1.02, 其增敏比明显低于对肿瘤细胞的增敏比,表明9402号 对正常小肠粘膜隐窝上皮细胞无明显增敏作用,这可 能与正常小肠隐窝上皮细胞与肿瘤细胞的含氧量不 同有关.目前这方面所做工作不多,今后我们还将继 续对几种正常组织(如皮肤等)进行观察研究,从而得 出比较客观的最后评价. 参考文献:. 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