【doc】5种消毒剂对龟分枝杆菌脓肿亚种的杀灭效果

【doc】5种消毒剂对龟分枝杆菌脓肿亚种的杀灭效果 5种消毒剂对龟分枝杆菌脓肿亚种的杀灭效 果 中国公共卫生2004年l0月第20卷第l0期ChmJPublicHealthOct2004Vo1.20No.101161 文章编号:1001.0580(2004)10.1161.03中圈分类号:R187.2文献标识码:A 5种消毒剂对龟分枝杆菌脓肿亚种的杀灭效果 王国庆,张朝武 【论着】 摘要:目的了解5种常用消毒剂对临床分离的龟分枝杆菌脓肿亚种的杀灭效果.方法细菌在分枝杆菌干 燥培养基斜面上培养7d,转至装有玻珠的小三角瓶中振摇,稀释至100cfu/rTl1.取0.1ml试验菌悬液加入5rTl1消费 剂溶液中.一定时间后中止消毒剂的作用,采用平板涂抹法接种罗氏培养基面,37?培养7d检测残存菌数,计算杀 灭率.结果含40ms/L有效碘的艾利克溶液作用5mln;0.2%过氧乙酸作用5mln;含40ms/L有效氯的TC一101 消毒片溶液作用5min;含1%戊二醛的GA一50医用器械消毒液作用1min或含60%乙醇的消毒酒精作用1min,以 上消毒剂对龟分枝杆菌脓肿亚种临床株的杀灭率均大于99.90%.结论5种常用消毒剂均能够杀灭该龟分枝杆菌 脓肿亚种临床分离株,达到消毒合格的要求. 关键词:龟分支杆菌脓肿亚种;消毒剂;杀灭效果 Bactericidalefficacyoffivedisinfectantsagainstrnycobacteriurncheloneisubsp.abscessus CJlao-T.~tt.HuaziSdwolofPublicHealth.SichuanUniversity(O~gdu610041,China) Abstract:ObjectiveTocomparethebactericidalefficacyof5disirdectantsagainstaelinicalis olateandstandardstrain 0fM.che/one/subsp.abscessus.MethodsCultureofclinicalisolateofM.chelonelsubsp.absc essusinoculatedonmycobacte— riamediaslantfor7dayswastransferredtoasterileflaskcontainingwithglassbeads,shakefor5to10minutes,diluteto 10cfu/rTl1.0.1rnloftKssuspensionwasaddedto5rnlofdisinfectantsolution.afteracertaincontacttime.0.5mlofthis mixturewasaddedto4.5mlneutralizersolutiontoinactivatethedisirdectantseffect.than0.2mloftheneutralizedsolution wasinoculatedonsurfaceofL—Jmediaplate.culturedat37? for7daystorecovertheviablebacteria.Toevaluatethemy— cobactericidalefficacyofeachdisinfectant,killingratesofthreedisin/ectantconcentrationsandfourcontacttimeswerecaleu. 1ated.ResultsERICsolutionwith40ms/Lavailableiodine.TC一 191solutionwith40ms/Lavailablechorineor0.2% peracerdcacidcankinthetestedmycobacteriabymorethan99.90%after5一minute— contacttime.GA一50solutionwith 1%glutaraldehydeor60%ethanolcanalsokillmorethan99.90%oftestedmycobacteriaafter1一minute—contacttime. ConclusionThese5disinfectantscankillthetestedstrainofM.cheloneisubsp.abscessustoanacceptableleve1. Keywords:mycobacteriumcheloneisubsp.abscessus;disinfectants;bactericidalefficacy 龟分枝杆菌(Mycobacteriumche~na)广泛存在于自然 界,特别是水和土壤中.偶尔也能从健康人的呼吸道分泌物等 ,由龟分枝杆菌引起的感染,尤其是 样本中分离到.近20年来 医院感染,已越来越多[1],逐渐引起了人们的重视.加强对 医疗设备和医院环境的消毒管理工作,是控制该菌医院感染 的重要手段.本研究采用龟分枝杆菌脓肿亚种临床分离株. 观察几种常用消毒剂对其的杀灭效果.如下. 1和方法 1.1材料 1.1.1试验菌龟分枝杆菌脓肿亚种(M.che~nd subsp.abscessus)临床分离株,深圳市疾病预防控制中心提供. 1.1.2试验用消毒剂(1)艾利克(WD复合碘):成都永安 制药有限公司生产,主要杀菌成分为聚维酮碘;(2)GA一50 医用器械消毒液:川大华西卫生保健公司生产.主要杀菌成分 为戊二醛;(3)过氧乙酸:按文献[6]提供的方法于实验室自行 配制;(4)酒精:实验室内将无水乙醇用灭菌水稀释而成;(5) TC一101消毒片:解放军7018工厂生产,主要杀菌成分为二 氯异氰尿酸钠. 1.1.3培养基分枝杆菌干燥培养基(上海金桥国际生物技 术交流中心,根据产品说明配制使用);改良罗氏(LowensteJn — Jensen,L—J)培养基:按文献[7]制作. 1.1.4其他试剂稀释液(0.5%吐温80一PBS,于0.03 *基金项目:国家自然科学基金资助(30070685) 作者单位:四川大学华西公共卫生学院医检教研室,成都610041 作者简介:王国庆(1975一).男.贵州人.讲师.博士在读.主要从事 卫生微生物学检验及消毒学的教学与科研. mol/LpH7.2PBS中加入0.5%的吐温80);灭菌蒸馏水;中 和剂(2%硫代硫酸钠+0.5%吐温80一PBS;1%甘氨酸+1% 卵磷脂+1%吐温80一PBS;0.5%卵磷脂+1%吐温80一 PBS). 1.2实验方法 1.2.1消毒剂含量测定按照卫生部<消毒与灭菌实验技术 规范)1999第一分册的要求对试验所用的消毒剂有效成分的 实际含量进行测定,并根据实测含量配制消毒剂使用液. 1.2.2菌悬液的准备龟分枝杆菌脓肿亚种(第5,6代培 养物)接种在分枝杆菌干燥培养基斜面上,37?培养7d,用 稀释液刮洗下菌苔,转入灭菌三角瓶(内含玻璃珠)内,旋转振 摇5,10rain;然后用稀释液将菌悬液稀释至10',100cfu/ ml,备用. 1.2.3中和剂鉴定试验根据卫生部<消毒与灭菌实验技术 规范)1999第一分册进行.实验分8组:(1)消毒剂+菌悬 液;(2)(消毒剂+菌悬液)+中和剂;(3)中和剂+菌悬液;(4) (消毒剂+中和剂)+菌悬液;(5)稀释液+菌悬液;(6)实验同 批次稀释液对照;(7)实验同批次中和剂对照;(8)实验同批次 培养基对照.当第1组无试验菌生长或仅有少数菌生长,第 5组;第3, 2组菌落数明显多于第1组,但又明显少于第3, 5组生长菌落数相近,为5×105,5×106cfu/ml;3,4,5组间 误差率小于15%;第6,8组无菌生长时.表明所选中和剂能 完全中和所用浓度的消毒剂.该中和剂才能应用于杀菌试验. 1.2.4分枝杆菌定量杀灭试验采用悬液定量杀菌试验进 行.分别取各试验浓度的消毒剂5.0ml于灭菌试管中,加入 0.1ml菌悬液.作用至预定时间,取0.5ml该菌药混合液加 ll62中国公共卫生2004年lO月第20卷第lO期 cnJPub//.HealthOct2004Vo1.205to.10 入4.5ml中和剂中混匀.作用10min后取0.2ml接种改良 罗氏培养基表面,并用L型玻棒涂抹均匀.37?培养7d后 计数菌落数.按下式计算杀灭率: KR:×100% 0 式中,KR为杀灭率,%;N0为试验菌阳性对照菌落数, cfu/ml;N为各时间的回收菌落数,cfu/ml. 2结果 2.1中和剂鉴定试验结果显示:(1)2%硫代硫酸钠+ 0.5%吐温80一PBS能有效中和40mg/L及以下浓度有效氯 的TC一101消毒片溶液,40mg/L及以下浓度有效碘的艾利 克溶液和0.2%及以下浓度的过氧乙酸溶液;(2)1%甘氨酸 +1%卵磷脂+1%吐温80一PBS能有效中和1%及以下浓度 戊二醛的GA一50医用器械消毒液;(3)0.5%卵磷脂+1%吐 温80一PBS能有效中和乙醇含量为60%及以下浓度的消毒 酒精溶液,见表1. 2.2各消毒剂对试验的龟分枝杆菌脓肿亚种临床分离株的 杀灭效果含40mg/L有效碘的艾利克溶液作用5min或含 20mg/L有效碘的艾利克溶液作用20min,对试验的龟分枝 杆菌脓肿亚种临床分离株的平均杀灭率大于99.90%;含40 mg/L有效碘的艾利克溶液作用10min,对试验的龟分枝杆菌 表1中和剂鉴定试验结果 注:所用艾利克浓度为40mg/L有效碘,作用时间5min;过氧乙酸 浓度为0.2%,作用时间1min;TC一101片溶液浓度为80mg/L,作用 时间2min;戊二醛浓度为1%,作用时间2min;消毒酒精浓度为60% 乙醇.作用时间1min 脓肿亚种临床分离株平均杀灭率可达100%.符合消毒 技术规范中对消毒合格的要求,见表2. 表2艾利克对龟分枝杆菌脓肿亚种临床分离株的杀灭效果 注:()内为平均杀灭率(%) GA一50医用器械消毒液杀灭试验结果显示,1.0%戊二 醛作用1min,0.5%戊二醛作用5min或0.25%戊二醛作用 20min,对试验的龟分枝杆菌脓肿亚种临床分离株的平均杀 灭率均大于99.90%;1.0%或0.5%戊二醛作用20min,对试 验的龟分枝杆菌脓肿亚种临床分离株的平均杀灭率可达 100%. 60%的消毒酒精作用1min,可杀灭99.99%以上的试验 菌,作用5min的杀灭率达100%;45%的消毒酒精作用5 min,平均可杀灭99.96%的龟分枝杆菌脓肿亚种临床分离 株,作用20min可完全杀灭.0.2%或0.1%的过氧乙酸作用 5min,对试验龟分枝杆菌脓肿亚种临床分离株的杀灭率大于 99.90%,0.05%过氧乙酸作用10min也能杀灭99.90%以上 的试验菌;0.2%过氧乙酸作用10min或0.1%过氧乙酸作用 20min,可完全杀灭试验的龟分枝杆菌脓肿亚种临床分离株. 含40me,/L有效氯的TC一101消毒片溶液作用5min, 对龟分枝杆菌脓肿亚种临床分离株的平均杀灭率为 99.98%,相同浓度的TC一101消毒片溶液完全杀灭该试验 菌则需要10rain;含20me,/L有效氯的TC一101消毒片溶液 作用5min或10mg/L有效氯作用20min.对龟分枝杆菌脓肿 亚种临床分离株的平均杀灭率均大于99.90%,而20me,/L 的有效氯作用20rain,对该试验菌可全部杀灭. 3讨论 近几十年来,非结核分枝杆菌所引起的感染也日益增多, 其中以龟分枝杆菌脓肿亚种,偶发分枝杆菌感染较为常见. 所导致的疾病多为皮肤以及软组织病变.加强针对性的消毒 是控制分枝杆菌感染的有效途径之一. 化因子 分枝杆菌细胞壁的脂质含量很高,对消毒剂等理 的抵抗力强于普通的细菌繁殖体,因此,不能用繁殖体来代表 分枝杆菌评价消毒剂对分枝杆菌的杀灭效果.作为结核病的 病原体,结核分枝杆菌自然成为研究消毒剂杀灭分枝杆菌效 果的首选对象,但是结核分枝杆菌生长缓慢,且对研究人员的 健康有严重威胁,所以寻找致病性弱并生长快速的其他分枝 杆菌进行研究极为重要.龟分枝杆菌于1923年由Bergey等 发现,包括两个亚种:龟分枝杆菌龟亚种(M.che/one/ subsp.chelone1)和龟分枝杆菌脓肿亚种(M.chelonel subsp.ab$ce$$u$).该菌生长快速,营养要求不高,容易培养, 致病性弱,是研究和评价消毒剂杀灭分枝杆菌效果的理想菌 株之一. 本研究所用的菌株为一株龟分枝杆菌脓肿亚种的临床分 离株,经过鉴定证实属于龟分枝杆菌脓肿亚种(8一.对临床 分离菌株的研究结果有助于监测临床分离株对临床一线使用 的消毒剂敏感性变化情况,了解是否有对消毒剂产生耐受或 中国公共卫生2004年10月第20卷第1O期cHJAI6? HealthOct2004Vo1.20No.101163 合理选择和使用消毒剂提供更准确的 抗性的菌株产生,对于 依据. 参考文献: [1]张莹蓉,桂晓虹,李静.非结核分枝杆菌引起医院感染的分析 [JJ.中华医院感染学杂志,2000,10(6):425—426. [2]周惠平.非典型分枝杆菌与感染【J].中华医院感染学杂志, 2000,10(6):423—424. (3】CamposHeneroMI,BordesA,RuizMC,etaI.Mycobacteriumch— donaesubspeciesabscessussoft—ussueinfectionfollowingplastic surgery[J].ClinicalMicrobiologyNewsletter,1995,17(5):39— 40. [4]RamaswamyAA,BiswasJ.BhaskarV,eta1.PostoperativeMy- cobacteriumchelonaeEndophthalmltisafterextracapsulaxcataract extIlactionandposteriorchamberintraocu/arlensimplantation[J]. Ophthalmology,2000,107(7):1283—1286. [5]BusinM,Por~inD,ArffaRC.M3~aacteriumchdonaeInterface Infectionafterendokeratoplasty[J].AmericanJoun1alofophthal- mology.2003,135(3):393—395. [6]王芳,杨华明.过氧化物类消毒剂.见杨华明,易滨主编.现代医 院消毒学[M】.北京:人民军医出版社,2002.79—86. [7]中国防痨协会.结核病诊断细菌学检验【J].中国防痨杂志, 1996.18(I):28—31. [8】扈庆华,李良成,庄玉辉,等.16S23SrDNA间隔区序列聚合 酶链反应鉴定术后龟分枝杆菌暴发感染【J].中华结核和呼吸杂 志.1999,22(11):648—651. [9]李良成,扈庆华,刘军,等.一起由龟分枝杆菌脓肿亚种引起院内 术后暴发感染的病原学研究【J].中国防痨杂志,1998,20:198. 收稿日期:2004.O1.19(蔡天德编辑宋艳萍校对) 文章编号:1001.0580l2004)10.1163.01中图分类号:R179文献标识码:B 永嘉县0,10岁儿童发中锌钙铁铜含量分析 何斌,汤敏,胡红蔚 为了解永嘉县儿童锌,铜,铁,钙营养状况及变化情况, 2002,2003年,对永嘉县共计816名0,1O岁儿童头发中 锌,铜,铁,钙含量进行测定,并分析其含量与儿童性别,年龄, 季节之间的关系.现报告如下. 对象与方法(1)对象:选择本县城儿童816名,年龄为 0,10岁,大多数为县城幼儿园的儿童.(2)测试:剪取枕部 发际离头皮1,3cm的头发,每人不少于0.5g,保存,将发样 洗净,烘干,准确称取恒重发样0.10g,置1Om1试管,加1.0 rn1分析纯硝酸消化,冷却后定容至刻度.应用原子吸收分光 光度计(上海惠普3500G)测定.(3)统计分析:不同性别,不 同年龄,不同季节的测定结果采用(;?s)g/g表示,各组之 间差别采用t检验和方差分析. 结果(1)不同性别儿童头发中锌,钙,铁,铜含量测 定:儿童头发中锌,钙,铁,铜含量分别为(122.5?44.4), (581.1?206.6),(71.16?46.44),(14.40?6.46)~tg/g.男 性和女性发中锌,钙,铁,铜含量分别为(122.4?44.1), (579.1?205.5),(70.95?45.86),(14.34?6.05);(122.6? 45.0),(584.8?208.8),(71.55?47.60),(14.32?6.11)g/ g,均无显着性差异(P>0.05).(2)不同年龄儿童头发中锌, 钙,铁及铜含量测定结果见表1.儿童头发中钙,铁,铜含量 与儿童年龄密切相关,有显着性差异(P<0.01);而头发中锌 含量在各年龄组之间无显着性差异(P>0.05).(3)不同季 节儿童头发中锌,铜,铁,钙测定见表2.调查发现,儿童头发 中锌,钙,铁,铜含量与测定的季节密切相关,有显着性差异 (P<0.01). 讨论本县儿童头发中钙,铁及铜含量高于国内其它 地区儿童头发中微量元素及矿物质的含量[】?,发锌含量相 对偏低.发中锌,钙,铁及铜的含量与测定的季节相关.发中 作者单位:1.浙江省永嘉县疾病预防控制中心,325100; 2.浙江省永嘉县中医院 作者简介:何斌(1965一),女,浙江永嘉人,主管检验师,学士.主要从 事检验工作. 【基层公共卫生】 表1不同年龄儿童头发锌,铜,铁,钙测定结果(;?s.~g/g) 表2不周季节儿童头发锌,铜,铁,钙测定结果f;?.g) 锌含量在冬季最高,发钙含量在夏季最高,发铁含量在秋季最 高,这与陈影[)的报道一致.而发铜含量在冬季最高.与陈 影[的报道不一致.值得进一步研究.这可能与本县儿童在 不同的季节所摄取的食物品种,数量,rb)L饮食习惯及营养结 构有关. 参考文献: [1]陈影,王秀玲,冯周清,等.8035名儿童头发锌铜铁钙值的调查 分析【J].实用预防医学,2003,10(1):94—95. (2]陈影,黄妙辉.赵子庆,等.福州地区小儿锌,铜,铁,钙缺乏的调 查【J].福建医药杂志,2000,22(6):125—126. 收稿日期:2004.03.07(任旭红编辑宋艳萍校对)