不同炮制方法的淫羊藿对小鼠抗炎作用的影响

不同炮制方法的淫羊藿对小鼠抗炎作用的影响 不同炮制方法的淫羊藿对小鼠抗炎作用的 影响 时珍国医国药2006年第17卷第1期 LISHIZHENMEDICINEANDMA'I'ERIAMEDICARESEARCH2006VOL,17NO.1 不同炮制方法的淫羊藿对小鼠抗炎作用的影响 陈正爱一,曲香芝,尹大维,徐正哲 (1.吉林敖东药业集团股份有限公司博士后工作站,吉林敦化133700; 2.延边大学医学院,吉林延吉133000; 3.延边大学医学院附属医院,吉林延吉133000) 摘要:目的研究淫羊藿不同炮制方法对实验小鼠抗炎作用的影响.方法采用二甲苯, 巴豆油致小鼠耳壳炎症法测定 不同炮制方法的淫羊藿对小鼠耳壳肿胀的影响,计算肿胀度,并与生理盐水组,消 炎痛组进行比较.结果制淫羊藿炒至 发亮有光泽提取液(制淫羊藿1i)与生理盐水组进行比较对二甲苯及巴豆油所致小 鼠耳壳肿胀明显减少(P<0.05),而 与消炎痛组比较,无显着性差异.结论炮制淫羊藿炒至发亮有光泽,提取液具有抗 炎作用. 关键词:淫羊藿;制淫羊藿;抗炎 中图分类号:R283.1;R285.5文献标识码:A文章编号:1008-O805(2006)01-0048-01 Anti.inflammatoryActionofEpimediumProcessedbyDifferentMethodsonMice CHENZheng—ai,QuXiang—zhi,YINDa—wei,xuZheng—zhe (1.PostdoctoralStation,JilinAodongMedicineIndustryGroupCo.,Ltd.Dunhua,Jilin,1337 00,China;2. DepartmentofPharmacology,MedicalCollege,YanbianUniversity,Ya,Jilin,133000,Chin a;3.Depart— mentofCardiothoracicSurgery,AffiliatedHospitalofMedicalCollege,YanbianUniversity, Yanil,Jilin, 133000,China) Abstract:ObjectiveTostudytheanti— inflammatoryactionofEpimediumprocessedbydifferentmethodsonmice.MethodsEf- feetofEpimediumprocessedbydifferentmethodsonswellingoftheearflapsofmiceinduced byxylene,crotonoilwasassayed, degreeofswellingwascalculated.andcomparedwithsalineorindomthaeinum.ResultsSwel lingoftheearflapsofmiceinduced byxylene,crotonoilWasreducedbyEpimediumI/ofthedifferentprocessedmethods,andthe rewassignificantdifference,COnl— paredwithsaline(P<0.05),buttherewasnosignificantdifference,comparedwithindomet haeinumConclusionEpimedium IIhasanti—in?ammationeffect. Keywords:Epimedium;Anti—inflammation 淫羊藿(Epimedium)是小檗科植物淫羊藿E.brevieornum Maxim,箭叶淫羊藿E.sagittatum(Sieb.erZuee.)Maxim.,柔毛淫 羊藿E.pubescensMaxim.,巫山淫羊藿EwushanenseT.S.Ying.或 朝鲜淫羊藿E.koreanumNakm的干燥地上部分.根据其炮制方 法不同可分为生淫羊藿和制淫羊藿两种,将原药洗净切片或切成 块状,晒干为生淫羊藿.经过不同的炮制方法制得的淫羊藿叫制 淫羊藿.淫羊藿性辛,甘,味温,主要成分淫羊藿黄酮,淫羊藿多 糖等.淫羊藿具有补肾壮阳,祛风除湿等药理作用….有关淫 羊藿的研究很多,但尚未见不同炮制方法抗炎作用的研究.本实 验研究不同炮制方法淫羊藿对小鼠抗炎作用的影响. 1实验材料 1.1主要药品淫羊藿由吉林敖东药业集团股份有限公司提供; 生淫羊藿,制淫羊藿有3种提取液,分别为制淫羊藿炒至吸尽油 脂提取液(简称制淫羊藿I),制淫羊藿炒至发亮有光泽提取液 (简称制淫羊藿?),制淫羊藿炒至微焦提取液(简称制淫羊藿 ?),由延边大学医学院药剂教研室提供.二甲苯为沈阳市东兴 试剂厂产品,批号:2002925;巴豆油合剂为自制品,致炎液中含 2%巴豆油,20%无水乙醇,5%蒸馏水和73%乙醚;消炎痛为沈 阳制药一厂产品,批号:03091901. 1.2动物昆明种小鼠,雌雄各半,体重18—22g,延边大学医学 院动物科提供. 收稿日期:2005-04—13;修订日期:2005—11-Ol 作者简介:陈正爱(1968一),女(朝鲜族),吉林延吉人,现任建边大学医学 院讲师,博士学位,主要从事心血管,抗炎免疫,神经药理研完工作. - 48- 2方法和结果 2.1对二甲苯致小鼠耳壳肿胀的影响取体重(20?2)g的昆 明种小鼠60只,雌雄各半,随机分为6组,按表1灌胃给药,灌 胃给药1次/d,连续灌胃7d(淫羊藿制剂给药量均为10g/kg,消 炎痛为7,5mg/kg,灌胃量为0.2ml/lOg).取样当天末次给药 30min后将20II甲苯涂于小鼠右耳壳两面致炎,致炎2h后 然后在同一部位取每只小鼠的左右耳片,称重,求 将动物处死. 肿胀差值.对6组数据用SPSS10.0软件进行单因素方差分析 处理,结果见表1. 表1不同炮制方法淫羊藿对二甲苯致小鼠耳壳肿胀的影响(4-)mg 组别致炎前与致炎2h后耳重之差 生理盐水 生淫羊藿 制淫羊藿l 制淫羊藿? 制淫羊蕾? 消炎痛 与生理盐水组比较,'P<0.05,一P<0.O1,n=10 2.2对巴豆油致小鼠耳壳肿胀的影响取体重(20?2)g的 昆明种小鼠60只,雌雄各半,随机分为6组,按表2灌胃给药, 灌胃给药1O(/d,连续灌胃7d.(淫羊藿制剂给药量均为10 kg,消炎痛为7.5mg/kg,灌胃量为0.2ml/10g).取样当天末次 给药30min后将25巴豆油合剂涂于小鼠右耳壳两面致炎,致 炎4h后将动物处死.然后在同一部位取每只小鼠的左右耳片, 称重,求肿胀差值.对6组数据用SPSS10.0软件进行单因素方 差分析处理.结果见表2 939577 7155OO {1l2 士士士?士士 ??巧鳃 452835 HSHIZHENMEDICINEANDNATERIAMEDICARESEARCH2006VOL.17NO.1时 珍国医国药2006年第l7卷第1期 )nag 表2不同炮制方法淫羊藿对巴豆油致小鼠耳壳肿胀的影响(?组别致炎前与致炎4h后耳重之差 生理盐水 生淫羊藿 制淫羊藿l 制淫羊藿? 制淫羊藿? 消炎痛 与生理盐水组比较,P<O.05,n=10 3讨论 二甲苯和巴豆油诱发小鼠耳壳水肿主要是某些炎症介质如 组胺,激肽和纤维蛋白溶解释放,引起局部毛细血管通透性增加, 炎症细胞浸润,造成耳部急性渗出性炎症水肿.制淫羊藿?明显 减轻二甲苯和巴豆油所致小鼠耳壳红,肿症状,与生理盐水组比 较有显着性差异(P<0.05),且抗炎强度与消炎痛相当.综上所 述,制淫羊藿?这种炮制方法具有抗炎作用,而另外二种方法炮 制的制淫羊藿I和制淫羊藿?无抗炎作用,其机理有待进一步 探讨. 参考文献: [1]王访,张有权.抗衰老中药的药理研究近况[J].时珍日医药, 2002,13(4):236. [2]沈雅琴.苦刺总生物碱的抗炎作用[J].中国药理学通报,1990,6 (1):685. [3]朱秀媛,徐桂芳,张祖济.麝香的药理研究I[J].药学,1979,14 (14):685. 高效液相色谱法测定 泰脂安胶囊中熊果酸和齐墩果酸的含量 姜从良,黎翩 (1.湖北省秭归县医疗中心443000;2.三九黄石制药厂,湖北黄石435002) 摘要:目的采用高效液相色谱法(HPLC)测定泰脂安胶囊中熊果酸和齐墩果酸的含量.方法流动相:乙醇一磷酸盐缓冲 液(87:13);流速0.6m~min;检测波长为220nm.熊果酸线性范围0.976—4.88g,r0.9990(n=5).结果平均回 收率为100.9%,RSD为1.3%(n=5).齐墩果酸线性范围0.36—1.80g,r=0.9998(n=5). 平均回收率为99.0%, RSD为1.52%(n=5).结论该法分析简便,灵敏,迅速,准确. 关键词:泰脂安胶囊;熊果酸;齐墩果酸;高效液相色谱法 中图分类号:R284.2文献标识码:B文章编号:1008-0805(2006)Ol-0049-01 泰脂安胶囊是从木樨科植物女贞叶中提取总三萜类物质加 适宜辅料精制而成,其主要成分为熊果酸和齐墩果酸,用于肝肾 阴虚,阴虚阳亢证所致的原发性高脂血症.由于熊果酸和齐墩果 酸结构极相似,两者分离较困难,在薄层板上不易分离,且操作繁 琐,重现性差.本实验参考有关文献,采用HPI_E法,对泰脂 安胶囊中熊果酸和齐墩果酸的含量测定进行了研究. 1仪器与试剂 LabAlliance高效液相色谱仪,Alliance检测器.甲醇为色谱 纯,其余均为分析纯,水为双蒸水,熊果酸和齐墩果酸均为中国药 品生物制品检定所提供. 2方法与结果 2.1色谱条件色谱柱pelcosilLC一18(250mmx4.6mm),流动 相:甲醇.磷酸盐缓冲液(87:13),临用前超声脱气处理,检测波 长220nm,灵敏度:0.05AUFS,柱温:室温,流速:0.6ml/min. 2.2对照品溶液的配制精密称取齐墩果酸和熊果酸对照品,用 甲醇配制成0.18mg/ml(齐墩果酸)和0.488mg/ml(熊果酸)的 混合对照品溶液. 2.3供试品溶液的制备精密称取泰脂安胶囊(040901)50nag 置25ml容量瓶中,加适量甲醇,超声提取(30Hz,250W)10rain, 放置室温,加甲醇定容至25ml,滤过,取续滤液用0.45m微孑L 滤膜滤过备用. 2.4线性实验分别吸取齐墩果酸和熊果酸混合对照品溶液 1.0,2.0,3.0,4.0,5.0m1分别加甲醇定容至5ml,各进样1O, 测定峰面积值,以峰面积对浓度进行线性回归,得齐墩果酸和熊 果酸回归方程分别为:A=2892.8+2.19×106C,r=0.9998, n=5:A=20814.7+2.38×106C,r=0.9990,=5. 收稿日期:2005~3-24;修订日期:2005-11_2O 作者简介:姜从良(1966一),男(汉族),湖北秭归人,现任湖北省秭归县医 疗中心副主任药师,学士学位,主要从事药品质量管理工作. 2.5精密度实验取供试品(040901)溶液,重复进样5次,按齐 墩果酸和熊果酸的峰面积分别计算得齐墩果酸RSD为1.3%,熊 果酸RSD为1.7%. 2.6重现性实验精密称取批号为040901的供试品,照上述供 试品溶液制备方法制备5份供试品溶液,依法测定,结果齐墩果 酸和熊果酸RSD分别为1.62%和2.03%. 2.7回收率实验取已测定含量的供试品5份,每份50mg(批 号为040901),精密称定,分别精密加入齐墩果酸和熊果酸对照 品各1.0mg,照含量测定方法测定含量,计算加样回收率.结果 齐墩果酸和熊果酸平均回收率分别为101.7%,100.9%. 2.8样品测定结果及含量限度取泰脂安胶囊5批,照含量测定 方法依法测定,按标准曲线法计算样品中齐墩果酸和熊果酸含 量,测定结果见表1. 表1样品测定结果% 3讨论 在本实验中发现甲醇比例的增减对两者的分离与保留影响 较大,采用磷酸盐缓冲液使流动相显弱酸性,有利于此两种三萜 酸的分离,并为泰脂安胶囊的定量分析提供了准确的测定方法, 泰脂安胶囊中两酸的平均含量达12.27%. 参考文献: 蔡宝昌,邱建红.HPLC法测定山茱萸中熊果酸和齐墩果酸 [1]皮文霞, 含量[J].中草药,2003,34(12):1103. [2]谢莹,杭太俊,程赞.等.高效液相色潜法测定中药中齐墩果酸 和熊果酸含量[J].中国qJ药杂志,2001,26(9):615. ? 49? ?? 111207656360 ?????? 211212 ?????? 99917184O249 ?????? 830332 1lZi