维生素C含量的测定

维生素C含量的测定 (2,6-二氯靛酚滴定法) 一、实验目的 1(了解测定维生素C 的意义。 2(掌握测定维生素C的方法和原理。 二、实验原理 还原型V可以还原2,6-二氯靛酚染料。该染料在酸性介质中呈浅红色，被C 还原后红色消失。还原型V还原染料后，本身被氧化成脱氢抗坏血酸。在无杂C 质干扰时，一定量的样品提取液还原染料的量与样品中所含还原型抗坏血酸的量成正比，根据染料用量就可计算样品中还原型抗坏血酸含量。 三、仪器与试剂 1(仪器 高速组织捣碎机、分析天平 2(试剂 ?1%草酸溶液:称取10g草酸(CHO.2HO)溶解于水并稀释至1L; 2242 ?2%草酸溶液:称取20g草酸溶解于水并稀释至1L; ?1%淀粉溶液:称1g淀粉溶解于100 mL水中加热煮沸，边加热边搅拌; ?6%碘化钾溶液:称6g碘化钾溶解于100 mL水中; ?0.001 mol/L碘酸钾标准溶液:精确称取干燥的碘酸钾0.3567g，用水稀释至100 mL，取出1 mL，用水稀释至100 mL，此溶液1 mL相当于抗坏血酸0.088mg; ?抗坏血酸标准溶液:准确称取20mg抗坏血酸，溶于1%草酸中并定容至l00mL，置冰箱中保存。用时取出5mL，置于50 mL容量瓶中，用1%草酸溶液定容，配成0.02mg/ mL的标准使用液; 标定:吸取标准使用液5mL于三角瓶中，加入6%的碘化钾溶液0.5mL，1%淀粉溶液3滴，再以0.001 mol/L碘酸钾标准溶液滴定，终点为淡蓝色。 计算: V，0.0881C, V2 式中:C—抗坏血酸标准溶液的浓度，mg/mL; V—滴定时消耗0.001 mol/L碘酸钾标准溶液的体积，mL; l V—滴定时所取抗坏血酸标准溶液的体积，ml; 2 0.088—1 mL 0.001 mol/L碘酸钾标准溶液相当于抗坏血酸的量，mg/mL。 ?2,6-二氯靛酚钠溶液 配制:称取52mg碳酸氢钠(NaHC0)溶解在200mL沸水中，然后再称取3 50mg 2,6-二氯靛酚钠溶于上述碳酸氢钠溶液中。冷却，保存在冰箱中过夜。次日过滤于250mL棕色容量瓶中，定容。 标定:吸取5mL抗坏血酸标准溶液，加1%草酸溶液5mL，摇匀，用2,6-二氯靛酚钠溶液滴定至溶液呈粉红色15s不褪色为止。 C，V1 T,V2 式中 T——每毫升2,6-二氯靛酚钠溶液相当于抗坏血酸的毫克数，mg/mL; C——抗坏酸的浓度，mg/mL; V——抗坏血酸标准溶液的体积，mL; 1 V——消耗2,6-二氯靛酚钠的体积，mL。 2 四、实验步骤 1(样液制备 ?鲜样制备:称100g鲜样，放入组织捣碎机中，加2,草酸100mL迅速捣成匀浆。取10,40g匀浆，用2,草酸定容至100mL容量瓶中，(若有泡沫可加入2滴辛醇除去)，摇匀放置10min过滤。若滤液有色，可按每克样品加0.4g白陶土脱色后再过滤。 ?多汁果蔬样品制备:榨汁后，用棉花快速过滤，直接量取10,20mL汁 液(含抗坏血酸1,5mg)，立即用2,草酸浸提剂定容至100mL，待测。 2(测定 吸取5mL或10mL滤液于100mL三角瓶中，用已标定过的2,6-二氯靛酚钠溶液滴定，直到溶液呈粉红色15s不褪色为止。同时做空白试验。 五、结果计算 T(V-V)0 X,，100m 式中X——样品中V的含量，mg/100g; C V——滴定样液时消耗染料溶液的体积, mL; V。——滴定空白时消耗染料溶液的体积，mL; T——1 mL 染料溶液相当于抗坏血酸溶液的量，mg/mL; m——滴定时所取滤液中含有样品的质量g。 六、注意事项 1.本方法适用于水果、蔬菜及其加工制品中还原型抗坏血酸的测定(不含二价铁、二价锡、二价铜、亚硫酸盐或硫代硫酸盐)。 2.动物性样品，须用10%三氯醋酸代替草酸溶液提取。 3. 2,6-二氯靛酚钠溶液应贮于棕色瓶中冷藏，每星期应标定一次。