蚕蛹虫草对巨噬细胞吞噬功能的作用

蚕蛹虫草对巨噬细胞吞噬功能的作用 山西职Z压学院学搪2008年l1月第18卷第4期 [参考文献] [1]LeeS,ChartersAC,ChandlerJG,eta1.Atechniquefororthotopic livertransplantationintherat[J].Transplantation,1973,16(6): 664-667. [2]KamadaN,CalneRY.ASurgicalexperiencewithfivehundredand thirtylivertransplantsintherat[J].Surgery,1983,93:64-69. 3]孙君泓,吴孟超,曾琪华.300次大鼠原位肝移植[J].中华器官移 [ 植杂志,1990,11(1):19-21. [4]栗彦琪,张或.大鼠原位肝移植横型制作的体会[J].山西职工 医学院,2008,18(1):20-21. [5]谢学羿,陈规划,黄洁夫.二袖套法建立大鼠原位肝移植模型的初 [6] [7] 步体会[J].肝胆外科杂志,1999,7(6):468-469. 马毅,何晓顺,陈规划,等.大鼠原位肝移植模型的手术技巧及 并发症的预防[J].中华显微外科杂志,2003,26(1):4548. MeyerK,BrownMF,ZobafiG,eta1.ICAM一1upregulationindistant tissueafterhepaticisehemia/reperfusion:acluetothemechanismof muhipleorganfailure[J].JPediatrSurg,1998,33:350. [作者简介]辛海荣(1972?),男,山西石楼人,主治医师,1997 年毕业于长治医学院. 本文编辑:李夏 蚕蛹虫草对巨噬细胞吞噬功能的作用 张海娟,王文洁,张兵 (山西省人民医院,山西太原030012) [摘要]目的:研究蚕蛹虫草对巨噬细胞吞噬功能的作用.方法:用 62.5nlg/kg,125mkg,250mg/kg, 500ing/kg蚕蛹虫草提取液喂养小鼠,10d后处死动物,腹腔注入Hank工作液,收集 巨噬细胞,统计巨噬细胞数, 计算巨噬细胞吞噬率和巨噬细胞吞噬指数.结果:各实验组巨噬细胞吞噬率和吞噬 指数均较对照组高(P< 0.05);各实验组之间无明显差异(P>0.05).结论:蚕蛹虫草对巨噬细胞免疫功能 可能具有增强作用. [关键词]蚕蛹虫草;巨噬细胞;免疫;作用 [中图分类号]R967[文献标识码]A[文章编号]1671-0126(2008)04-0016-02 PotentiationofCordycepsMilitarisLinkontheImmuneFunctionofMacrophage ZHANGHaijuan,WANGWenjie,ZHANGBing (ShanxiProvincialPeople'SHospital,Taiyuan030012,Shanxi,China) [ABSTRACT]Objective:Tostudythepotentiationofcordycepsmilitarislinkonthephagocyticfunctionofmacro— phage.Methods:Themicewererespectivelyfedtheextractofcordycepsmilitarislinkof62.5mg/kg,125mg/kg, 250mg/kg,500mr=/kgandthentheanimalswerekilledafter10daystoinjecttheHank'Sworkingfluidintotheab— dominalcavity,collectthemacrophage,dothestatisticsofthemacrophagenumbers,countthephagocytosisrateand phagocytosisindexofthemacrophage.Results:Thephagocytosisrateandphagocytosisindexofmacrophageineachex. perimentgroupwerehigherthanthoseofthecontrolgroup(P<0.05).Therewerenosignificantdifferencesbetween eachexperimentgroup(P>0.05).Conclusion:Cordycepsmilitarislinkmayhavepotentiationfortheimmunefunction ofmacrophage. [KEYWORDS]cordycepsmilitarislink;macrophage;immunity;potentiation 蚕蛹虫草(CordycepsMilitarisLink,CML)是人工 培植虫草菌以柞蚕为宿主培植而得的植物,与冬虫夏 草同属….CML具有镇静,雄激素样作用,耐缺氧 和抗炎作用,增强戊巴比妥的睡眠作用,更重要的 是它对小鼠移植性肿瘤S180和Lewis肿瘤有明显的 抑制作用J,而且对人黑色瘤,B16细胞,人白血病 ? 16? HL-60细胞,人体红血病K662细胞具有较好的抗瘤作 用,而且毒性很低].本研究旨为探讨CML对巨噬细 胞吞噬功能的作用. l材料和方法 1.1材料 昆明小鼠,雄性,体重18g,22g,山西医科大学 张海娟等:蚕蛹虫草对巨噬细胞吞噬功能的作用2008年11月第18卷第4期 实验动物部提供;10%乙醇;蚕蛹虫草提取物:CML用 95%乙醇提取,共提取3次,每次6h,8h,合并提取 液回收乙醇后,置于60?烘箱烘干,用10%乙醇配成 500mg/kg,250mg/kg,125mg/kg,62.5mg/kg的悬 液,冰箱保存,备用.CML由吉林省蚕业科学研究所 提供;鸡红细胞(CRBC)悬液:抽取健康雄鸡翼静脉血 置于10mL离心管中,加Asever液抗凝,再加无菌生 理盐水反复离心洗涤3次,2000r/min,每次5min,洗 涤后配成10%(V:V)的CRBC一生理盐水溶液. 1.2方法 选择健康成年小鼠50只,随机分成5组,每组10 只,实验组按62.5mg/kg,125mg/kg,250mg/kg, 500mg/kg灌胃,对照组以10%乙醇灌胃,每天1次,连 续10d.第1O天灌胃后,消毒小鼠腹部皮肤,每只腹 腔注射CRBC悬液0.2mL进行免疫,4h后颈椎脱臼法 处死动物,腹腔注入Hank工作液2.5mL,轻揉小鼠 腹部,使HankS液充分刷洗腹腔内的巨噬细胞.自腹 部中央剪一小口,用无菌吸管吸取腹腔洗液滴于载玻 片上,呈2.0cm×1.5cm大小,搪瓷盘内铺上多层纱 布,以生理盐水润湿后压平,放入滴片,保持水平,于 37?恒温箱中温育(搪瓷盘加盖,保持平衡湿度,以防 滴液蒸干)30min,然后用生理盐水冲洗掉滴片上悬浮 的白膜(含未被吞噬的鸡红细胞及其他细胞),凉干或 冷风吹干.滴片干后置于盛有甲醇的染色缸内浸泡 5min~I以固定,取出冷风吹干后再用Giemsa—Wright— PB工作液染色10min,最后以蒸馏水冲洗掉染液,吹 干后镜检.在吹干的滴片上加一小滴液体石蜡,用油 镜观察,以手动计数器记录100个巨噬细胞中吞噬了 CRBC的巨噬细胞数目和100个巨噬细胞中吞有 CRBC的巨噬细胞数目.计算巨噬细胞吞噬率(%) [巨噬细胞吞噬率(%)=吞有CRBC的巨噬细胞数/ 100个巨噬细胞数×100%]和巨噬细胞吞噬指数(巨 噬细胞吞噬指数=吞噬的CRBC总数/100个巨噬细 胞数). 1.3统计学处理 所有数据以均数?差表示,应用SPSS11.5软 件包进行统计,P<0.05为有统计学意义. 2结果 各实验组巨噬细胞吞噬率和吞噬指数均较对照组 高(P<0.05);各实验组之间无明显差异(P>0.05). 见表1 表1蚕蛹虫草对巨噬细胞免疫功能的增强作用 3讨论 巨噬细胞是机体的免疫细胞,它的细胞膜上有 IgG的Fc片段和c及趋化因子的受体,胞内又有多 种酶类,因而能识别,吞人和消灭抗原,它吞噬能力很 强,主要参与非特异性免疫.此外,还摄取并处理抗 原,把抗原信息传递给免疫活性细胞,并参与特异性免 疫,因此它可以增强机体免疫力.蚕蛹虫草可显着地 促进小鼠脾脏和胸腺的生长,对动物的基础免疫水平 有明显的提高作用,活化和促进巨噬细胞的增殖,增强 机体的非特异性免疫功能的调节J.本实验以CML 乙醇提取物给小鼠灌胃10d,致炎后所得巨噬细胞吞 噬率和巨噬细胞吞噬指数,可以看出62.5mg/kg, 125mg/kg,250mg/kg,500mg/kg剂量组的巨噬细胞 吞噬率和巨噬细胞吞噬指数明显高于对照组的.且实 验组分别与对照组差别具有显着性.但各实验组间无 统计学差异,可能与剂量达到一定浓度不再刺激巨噬 细胞吞噬率和吞噬指数增加.因此,可以认为CML乙 醇提取物能增强巨噬细胞免疫功能,从而提高机体的 免疫力,具有开发利用前景. [参考文献] [1]刘凤安,郑效.蚕蛹虫草与冬虫夏草抗喉癌作用对比研究[J]. 白求恩医科大学,1995,21(1):3940. [2]刘洁,杨旭,梁曼义,等.蚕蛹虫草镇静及性激素样作用的 研究[J].白求恩医科大学,1994,20(1):14-16. [3]陈桂宝,罗梅初,刘实晶,等.蛹虫草的药理作用研究[J].中草 药,1997,28(7):415417. [4]刘洁,杨世杰,杨旭.蚕蛹虫草的抗肿瘤及激素样作用[J]. 中国中药杂志,1997,22(2):11l一113. [5]王洪欣.蚕蛹生物活性成分现代研究进展[J].齐鲁药事,2007, 26(6):355-358. [作者简介]张海娟(1973一),女,山西汾阳人,主治医师,1998 年毕业于白求恩医科大学. 本文编辑:李夏 ? 17?