【医学论文】食管癌术前胃复春片对幽门螺杆菌抑制作用的实验研究

【医学论文】食管癌术前胃复春片对幽门螺杆菌抑制作用的实验研究 【关键词】 幽门螺杆菌 近年来，临床治疗幽门螺杆菌(helicobacter pylori，hp) 遇到了很大困难，hp耐药的问题日益严重，如何选择更有效的西药和研究中药对 hp的治疗，是摆在消化科医生面前的重要任务之一。本实验选用中药胃复春片对 hp的体外试验，旨在探讨中药胃复春片对幽门螺杆菌可能的抑制作用和临床意义。 1 材料与方法 1.1 实验材料 (1)菌种: hp菌株nctc11637由浙江大学医学院病原生物学系医学细菌研究室提供。近期从临床胃炎或消化性溃疡患者胃黏膜活检标本中分离了60株 hp，经系统细菌学鉴定证实为 hp后保存于-70?。(2)药物:受试药物胃复春片由杭州市胡庆余堂药业有限公司生产，每片重0.359g; 批号060618;国药准字 z20040003。对照药丽珠得乐(枸橼酸铋钾颗粒)，由丽珠集团丽珠制药厂生产，国药准字h10900086。将胃复春片碾成粉末，加灭菌蒸馏水4?浸泡24h，滤除残渣，100?水温15min灭菌。枸橼酸铋钾颗粒先用灭菌蒸馏水溶解，然后0.22μm滤膜过滤除菌。 上述试验药和对照药再用灭菌蒸馏水配制成所需浓度的溶液。 1.2 实验方法 (1)细菌培养基:采用含5%脱纤维羊血的哥伦比亚琼脂(法国梅丽埃公司)，作为分离和培养 hp的培养基，同时该培养基也作为药敏试验的基础培养基。脱纤维羊血购自杭州康裕贸易有限公司， hp培养时环境气体条件是5%o2、10% co2及85% n2(杭州特种气体厂提供)。(2)药敏试验培养基:将上述哥伦比亚培养基加热充分溶解，冷却至60?左右时加入终浓度为5%脱纤维羊血，再分别加入不同稀释度的上述药物溶液，使培养基所含药物的浓度分别为0.005、0.01、0.02、0.04、0.08、0.16、0.32、0.64、1.28、2.56、5.12、10.24 mg/ml，倾注平板，37?孵育24 h检菌合格后置4?备用。(3)药物最低抑菌浓度(mic)测定:采用二倍平皿稀释法。刮取新鲜培养的 hp菌苔，用灭菌生理盐水充分混匀，用麦氏比浊法配制成1×107/ ml的菌液。取各菌液5μl点种于含药物的平板上，37?培养72h后观察结果。以50%和90% hp菌株的生长被抑制为该药 物的50%最低抑菌浓度(mic50)和90%最低抑菌浓度(mic90)。实验中同时设置不加任何药物、正常培养的对照。 2 结果 正常对照中60株 hp均生长良好。受试药胃复春片和对照药丽珠得乐对60株 hp临床分离菌株和标准菌株nctc11637的mic测定结果见表1。表1 胃复春片和丽珠得乐对60株hp及nctc11637的mic测定结果(略) 3 讨论 hp是一种微需氧的革兰阴性螺旋形细菌，主要栖居于人胃黏膜的黏液层，被认为是慢性胃炎、消化性溃疡的重要致病因素，并与胃癌的发生也有一定关系。新近研究发现hp感染与胃肠外疾病如心血管疾病等也有一定相关性。因此，hp感染及其相关疾病已成为一个严重的问题。hp在人群中感染率约为60%,70%，慢性胃炎或消化性溃疡患者中可高达70%,90%左右。人胃是hp感染的主要栖居场所。随着对抗hp感染治疗的深入，发现 hp耐药的问题日益严重。据国外资料报道，hp对克拉霉素的耐药率在3%,14%,,,,,，对甲硝唑的耐药率在20%, 40%,,,，某些发展中国家可高达50%,80%,,,。国内资料显示，克拉霉素的耐药率为6.1%,25%,,,,,，且有上升的趋势。 中成药胃复春片是纯中药制剂，临床广泛用于慢性浅表性胃炎、萎缩性胃炎、肠腺化生、肠上皮不典型增生、功能性消化不良等症。本实验结果表明，胃复春片具有一定的体外抑制 hp作用，虽然达到mic90所需的药物浓度是丽珠得乐的4倍。在先前作者的研究也表明，某些药物虽无具备直接抑制hp的成分，但确有抑制 hp的作用,,,,。国内应用中药对hp治疗进行了许多研究，结果发现确有30,40味中药或6个以上复方有不同程度的抗hp作用。某些中药及非抗生素类非铋剂类西药对 hp的抑菌作用，推测除了直接作用外可能与其改变了hp赖以生存的局部胃内环境有关。胃复春可能亦有此作用。椐此作者认为抗生素耐药现象日益严重的今天，不断开发治疗hp的新药，包括中西医结合治疗，是避免耐药菌株产生 的有效方法，中药及非抗生素类非铋剂类西 药作为抗hp的二线或后续治疗的作用，值 得临床进一步研究。 【参考文献】 1 franzin l, pennazio m, caboli d, et al. clarithromycin and amoxicillin susceptibility of helicobacter pylori strains isolated from adult patients with gastric or duodenal ulcer in italy. curr microbiol， 2000,40:96,100. 2 taylor de, jiang q, fedorak rn, et al. antibiotic susceptibilities of helicobacter pylori strains isolated in the province of alberta. can j gastroenterol， 1998,12:295,298. 3 savarino v, zentilin p, pivari m, et al. the impact of antibiotic resistance on the efficacy of the three 7-day regimens against helicobacter pylori. aliment pharmacol ther, 2002,14:893,900. 4 pillotto a, rassu m, leandro g, et al. prevalence of helicobacter pylori resistance to antibiotics in northeast italy: a multicentre study. gisu. interdisciplinary group for the study of ulcer. dig liver dis, 2000,32:763,768. 5 torres j, camorlinga-ponce m, perez-perez g, et al. increasing multidrug resistance in helicobacter pylori strains isolated from children and adults in mexico. j clin microbiol, 2001,39: 2677,2680. 6 张晓光，胡品津，陈为，等. 广东地 区幽门螺杆菌耐药的调查.胃肠病学，2001， 6(1):a66. 7 成虹，胡伏莲.北京地区幽门螺杆菌耐 药的临床研究. 胃肠病学，2001，6(1):a31. 8 史彤，刘文忠，萧树东，等. 上海地 区幽门螺杆菌对抗生素耐药率的变迁. 中华 内科杂志，2000，39(8):576. 9 邵军，扬昭徐，唐明忠，等. 幽门螺杆菌对4种抗菌药物的敏感性检测及意义. 临床检验杂志，2003，21(4):219,220. 10 王杭勇，黄怀德，严杰. 麦滋林-s对幽门螺旋菌的抑菌作用. 浙江医科大学学报，1994，23(1):22,23.