[doc] 金黄乳膏抗炎镇痛作用的实验研究

[doc] 金黄乳膏抗炎镇痛作用的实验研究 金黄乳膏抗炎镇痛作用的实验研究 ? 14?(总654)中医正骨2011年9月第23卷第9期 ? 基础研究? 金黄乳膏抗炎镇痛作用的实验研究 徐华明.江国荣,张露蓉,梁国强 (江苏省苏州市中医医院,江苏苏州215003) 摘要目的:金黄乳膏的抗炎镇痛作用,探讨其作为金黄油膏取代产品的可行性.方法:?直接给药的抗炎作用.取小鼠 28只,随机分为模型组,扶他林乳膏组,金黄油膏组,金黄乳膏组,每组7只.先用二甲苯致小鼠耳廓肿胀,再将相应药物敷于各 组小鼠致炎侧耳部,随后处死小鼠计算耳肿胀度.?间接给药的抗炎作用.取小鼠24只,随机分成模型组,扶他林乳膏组,金黄 乳膏组,每组8只.先将相应药物敷于各组小鼠腹部并固定,1.5h后用二甲苯致小鼠耳廓肿胀,随后处死小鼠,测量并计算耳肿 胀度.?不同载药量金黄乳膏的抗炎作用.取小鼠37只,随机分成模型组(n=7),扶他林乳膏组(n:7),金黄乳膏组(n=7),金 黄乳膏2.5倍量组(n=8),金黄乳膏5倍量组(n=8).先用二甲苯致小鼠耳廓肿胀,再将相应药物敷于各组小鼠致炎侧耳部,随 后处死小鼠,测量并计算耳肿胀度.?镇痛作用.取小鼠37只,随机分为模型组(n=10),扶他林乳膏组(n=9),金黄油膏组(n = 9),金黄乳膏组(n=9).先将相应药物敷于各组小鼠腹部并固定,连续给药3d.第3天给药后2.5h取下药膏,按0.01mL? g体质量腹腔注射0.9%冰醋酸.注射后15ufin内小鼠的扭体次数.结果:?直接给药后,扶他林乳膏组,金黄油膏组和金 黄乳膏纽的耳肿胀度均小于模型组(P=0.000,P=0.002,P:0.000),其余各组间比较,差异均无统计学意义;?间接给药后,金 黄乳膏组和扶他林乳膏组耳肿胀度均小于模型组(P=0.004,P=0.003), 金黄乳膏组与扶他林乳膏组比较,差异无统计学意义(P = 0.057);?测定不同载药量金黄乳膏的抗炎作用时,扶他林乳膏组,金黄乳膏组,金黄乳膏2.5倍量组和金黄乳膏5倍量组的肿 胀度均小于模型组(P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000),其余各组间比较,差异均无统计学意义;?测定金黄乳膏的镇痛 作用时,扶他林乳膏组,金黄油膏组和金黄乳膏组的扭体次数均少于模型组(P=0.002,P=0.O00,P=0.000),其余各组间比较, 差异均无统计学意义.结论:金黄乳膏保留了金黄油膏的基本疗效,对局部和全身都有良好的抗炎镇痛效果.从药效学角度来 看,金黄乳膏作为金黄油膏的取代产品是可行的. 关键词剂型改进金黄乳膏抗炎药(中药)镇痛动物实验 Experimentalstudyontheanti, inflammationandanalgesiaeffec~ofJINHUANGcreamXUHua—ming, rong,ZHANGLu—rong,eta1.TraditionalChineseMedical JIANGGuo— HospitalofSuzhouCity,Suzhou215003, Jiangsu,China ABSTRACTObjective:Toevaluatetheanti—inflammationandanalgesiaef fectsofJINHUANGcream,andtoexplorethefeasibilityof JINHUANGcreamasthereplacementproductofJINHUANGointment.Methods:?Anti—inflammationeffectsunderdirectadministra— tion:twentyeightmicewererandonflydividedintomodelgroup,voharencreamgroup,JINHUANGointmentgroupandJINHUANGcream group,7casesineachgroup.Earswellingofmicewereinducedbyxyleneatfirst,andtheinflammationpartsoftheearswereadministrated withtherelevantdrugs,thenthemiceweresacrificedforthemeasurementoftheearswellingdegrees.@Anti—inflammationeffectsunder indirectadministration:twentyfourmicewererandomlydividedintomodelgroup,voharencreamgroupandJINHUANGcreamgroup,8ca— sesineachgroup.Therelevantdrugswereappliedtoandfixedontheabdomensofmicefirstly,and1.5hourslater,earswellingofmice wereinducedbyxylene,thenthemiceweresacrificedforthemeasurementoftheearswellingdegrees.(Anti—inflammationeffectsofdif- ferentdosageofJINHUANGcream:thirtysevenmicewererandomlydivided intomodelgroup(n:7),voharencreamgroup(n=7),J1N— HUANGcreamgroup(=7),2.5timesdosageofJINHUANGcreamgroup(=8)and5timesdosageofJINHUANGcreamgroup(n=8). Earswellingofnlieewereinducedbyxyleneatfirst,andtheinflammationpartsoftheearswereadministratedwiththerelevantdmgs,then themiceweresacrificedforthemeasurementoftheearswellingdegrees.@Analgesiaeffects:thirtysevenmicewererandomlydividedinto modelgroup(=10),vohm’encreamgroup(n=9),JINHUANGointmentgroup(n=9)andJINHUANGcreamgroup(n=9).Atfirst,therel— evantdrugswereappliedtoandfixedontheabdomensofmicefor3dayscontinuously,andtheplasterweretakendownfromthemice2.5 heursaftertheadministrationinthe3rdday.thenthemicewereintraperitoneallyinjectedwith0.9%glacialaceticacid(0.01mL’g).The writhingtimesofthemiceinthefirst15minutesaftertheinjectionwererecorded.Results:?Afterdirectadnfinistration,earswellingde— 中医正骨2011年9月第23卷第9期(总655)?15? greesofmiceinvoharencreamgroup,JINHUANGointmentgroupandJINHUANGcreamgroupwerealllowerthanthoseofmiceinmodel group(P=0.000, 尸:0.002,P=0.000),andtherewasnostatisticaldifferencebetweenanyothercoupleofgroups.?Afterindirectad— ministration,earswellingdegreesofmiceinJINHUANGcreamgroupandvol tarencreamgroupwerelowerthanthoseofmiceinmodel grouprespectively(P=0.004,P=0.003),andtherewasnostatisticaldifferencebetweenJINHUANGcreamgroupandvoharencream group(P=0.057).? Themeasurementresultoftheanti—inflammationeffectsofdifferentdosageofJINHUANGcreamshowedthattheear swellingdegreesofmiceinvoharencreamgroup,JINHUANGcreamgroup,2.5and5timesdosageofJINHUANGcreamgroupwereall lowerthanthoseofmiceinmodelgroup(P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000),andtherewasnostatisticaldifferencebetweenany othercoupleofgroups.? rhemeasurementresultoftheanalgesiaeffectsofJINHUANGcreamshowedthatthewrithingtimesofmicein voharencreamgroup,JINHUANGointmentgroupandJINHUANGcreamgroupwerealllessthanthoseofmiceinmodelgroup(P=0.002, P=0.000,P=0.000),andtherewasnostatisticaldifferencebetweenanyothercoupleofgroups.Conclusion:JINHUANGcreamretains thebasiccurativeeffectsofJINHUANGointment,andithasthesatisfactoryanti—inflammationandanalgesiaeffectsinthepartandallover thebody.Fromthepharmaeodynamicpointofview,itisfeasibleofJINHUANGcreamtoreplacetheJINHUANGointment. KeywordsDosageformimproving;JINHUANGcream;Anti—inflammato rydrugs(TCD);Analgesia;Animalexperimentation 金黄油膏是苏州市中医医院的传统自制制剂,具 有消肿止痛,清热解毒的功效,长期在临床应用,疗效 显着.但随着现代医院制剂的发展和化要求,以 及患者对外用药使用要求的不断提高…,我院对金黄 油膏进行了剂型改革,开发出黏性适当,药物分布均 匀,应用方便,易清洗,易存放的金黄乳膏.笔者通过 动物实验对金黄乳膏的主要药效进行了观察研究,现 总结报告如下. 1材料与仪器 1.1实验动物雄性昆明种小鼠若干,体质量18, 22g,购自苏州大学实验动物中心,实验动物合格证 号:2006112. 1.2实验药物金黄油膏(天花粉,生赤芍,生大黄, 白芷和黄柏5味药材磨粉后,制备成油膏,每克油膏 含生药0.05g),由苏州市中医医院药剂科制剂室提 供.金黄乳膏(每克含生药0.05g),2.5倍量金黄乳 膏(每克含生药0.125g),5倍量金黄乳膏(每克含生 药0.25g),由苏州市中医医院中医药研究所提供. 扶他林乳膏,每克含双氯酸二乙胺0.01g,由北京诺 华制药有限公司生产,批号:X0057.二甲苯,由苏州 金城试剂厂提供. 1.3实验器材眼科剪,眼科镊,凿空器,铁锤,50 L微量进样器,1/1000g天平. 2方法 2.1抗炎作用测定 2.1.1直接给药取小鼠28只,随机分为4 组:模型组,扶他林乳膏组,金黄油膏组,金黄乳膏组, 每组7只.在小鼠右耳前后两面涂上40IxL二甲苯 致炎,左耳作对照,15min后在小鼠右耳涂药.模型 组右耳涂0.2g乳膏基质,扶他林乳膏组涂0.1g扶 他林乳膏,金黄油膏组涂0.2g金黄油膏,金黄乳膏组 涂0.2g金黄乳膏.2.5h后将小鼠断颈处死,沿耳 廓基线将其双耳剪下来,用打孔器分别在同一部位打 下圆耳片称重,计算肿胀度.肿胀度(mg)=右耳片 质量一左耳片质量. 2.1.2问接给药取小鼠24只,随机分成3组: 模型组,扶他林乳膏组,金黄乳膏组,每组8只.先将 小鼠腹部的毛剪掉,24h后取0.2g受试药膏敷于小鼠 腹部,模型组给予等量乳膏基质,用纱布和橡皮胶带固 定.1.5h后在小鼠右耳前后两面涂上40二甲苯 致炎,左耳作对照.1h后将小鼠断颈处死,沿耳廓基 线将其双耳剪下来,用打孔器分别在同一部位打下圆 耳片称重,计算肿胀度.肿胀度(mg)=右耳片质量一 左耳片质量. 2.1.3不同载药量金黄乳膏抗炎作用测定取小鼠 37只,随机分成5组:模型组(n=7),扶他林乳膏组(n = 7),金黄乳膏组(凡=7),金黄乳膏2.5倍量组(= 8),金黄乳膏5倍量组(n=8).在小鼠右耳前后两面 涂40二甲苯致炎,左耳作对照.15min后在小鼠 右耳涂药,模型组右耳涂0.2g乳膏基质,扶他林乳膏 组涂0.1g扶他林乳膏,金黄乳膏组涂0.2g金黄乳膏, 金黄乳膏2.5倍量组涂2.5倍量金黄乳膏0.2g,金黄 乳膏5倍量组涂5倍量金黄乳膏0.2g.2.5h后将小 鼠断颈处死,沿耳廓基线将其双耳剪下来,用打孔器分 别在同一部位打下圆耳片称重,计算肿胀度.肿胀度 (mg)=右耳片质量一左耳片质量. ? 16?(总656)中医正骨2011年9月第23卷第9期 2.2镇痛作用测定’取小鼠37只,随机分为4 组:模型组(n=10),扶他林乳膏组(n:9),金黄油膏 组(n=9),金黄乳膏组(n=9).先将小鼠腹部的毛 剪掉,24h后模型组取3g乳膏基质,扶他林乳膏组 取1.5g扶他林乳膏,金黄油膏组和金黄乳膏组分别 取3g金黄油膏和金黄乳膏敷于小鼠腹部,然后用纱布 和橡皮胶带固定,连续给药3d.第3天给药后2.5h 取下药膏,按0.01mL?g体质量腹腔注射0.9%冰醋 酸.记录注射后15min内小鼠的扭体次数. 2.3统计学方法采用SAS8.0统计软件对所得数 据进行统计分析,各组大鼠耳肿胀度和扭体次数比较 采用方差分析,组间两两比较采用q检验,检验水准 Ot=0.05. 3结果 3.1抗炎作用 3.1.1直接给药经耳部给药后,各组大鼠耳肿胀 度比较,差异有统计学意义(F=24.583,P=0.000). 两两比较:扶他林乳膏组,金黄油膏组和金黄乳膏组 的耳肿胀度均小于模型组(P=0.000,P=0.002,P= 0.000);扶他林乳膏组与金黄油膏组,金黄乳膏组,金 黄油膏组与金黄乳膏组比较,差异均无统计学意义 (尸=0.023,P=0.072,P=0.510).见表1. 3.1.2间接给药经腹部给药后,各组大鼠耳肿胀 度比较,差异有统计学意义(F=7.573,P=0.006). 两两比较:金黄乳膏组和扶他林乳膏组耳肿胀度均小 于模型组(P=0.004,P=0.003);金黄乳膏组与扶他 林乳膏组比较,差异无统计学意义(P=0.057).见 表1. 3.1.3不同载药量金黄乳膏抗炎作用各组大鼠耳 肿胀度比较,差异有统计学意义(F=17.162,P=0.000). 两两比较:扶他林乳膏组,金黄乳膏组,金黄乳膏2.5 倍量组和金黄乳膏5倍量组的肿胀度均小于模型组(P = O.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000);扶他林乳膏 组与金黄乳膏组,金黄乳膏2.5倍量组及金黄乳膏5倍 量组比较,差异无统计学意义(P=0.072,P=0.186,P = 0.800);金黄乳膏组与金黄乳膏2.5倍量组及金黄 乳膏5倍量组,金黄乳膏2.5倍量组与金黄乳膏5倍量 组比较,差异均无统计学意义(P=0.399,P=0.080,P = 0.150).见表1. 3.2镇痛作用各组大鼠扭体次数比较,差异有统 计学意义(F=7.121,P=0.001).两两比较:扶他林 乳膏组,金黄油膏组和金黄乳膏组的扭体次数均少于 模型组(P=0.002,P=0.000,P=0.000);扶他林乳 膏组与金黄油膏组,金黄乳膏组,金黄油膏组与金黄乳 膏组比较,差异均无统计学意义(P=0.928,P=0.821, P=0.876).见表1. 表1各组大鼠耳肿胀度及扭体次数测定结果 4讨论 金黄油膏是苏州市中医医院老中医的方,具 有消肿止痛,清热解毒功效,外敷经皮吸收给药.金 黄油膏长期在临床应用,用于骨关节病,软组织损伤 和骨折早期患者,临床疗效确切.但也存在使用不 便,不易清洗等缺点.因此,我们将金黄油膏剂型改 为乳膏剂型. 分析本实验的结果:?直接给药后,扶他林乳膏 组,金黄油膏组和金黄乳膏组的耳肿胀度均小于模型 组,其余各组间比较,差异均无统计学意义;?间接给 药后,金黄乳膏组和扶他林乳膏组的耳肿胀度均小于 模型组,金黄乳膏组与扶他林乳膏组比较差异无统计 学意义;?测定不同载药量金黄乳膏的抗炎作用时, 扶他林乳膏组,金黄乳膏组,金黄乳膏2.5倍量组和 金黄乳膏5倍量组的耳肿胀度均小于模型组,其余各 组问比较差异均无统计学意义;?测定金黄乳膏的镇 痛作用时,扶他林乳膏组,金黄油膏组和金黄乳膏组 的扭体次数均小于模型组,其余各组间(下转第19页) 中医正骨2011年9月第23卷第9期(总659)?19? 随着病程进展,局部骨痂堆积增多,骨膜反应更明显, 长骨骨膜增生围绕骨干生长形成新的不完整骨皮质 轮廓,cT横断面呈现”双皮质征”,本组13例可见 此种征象.本组11例有”脐凹征”的患者中,7例可 见2种形态的”脐凹征”:一种表现为骨膜反应缺损口 边缘光整,规则,呈楔形,走行与滋养血管一致[图4 (2)],这可能为滋养血管通过使该处骨膜反应生长 受阻所致;另一种表现为骨膜反应缺损口边缘不光 整,形态不规则,呈垛形[图4(1)],可能是应力性骨 折后患者没有及时制动,骨折端周缘骨质及骨膜反应 局部吸收所致,对应骨皮质常呈”灰色骨皮质征”.中 后期可见由于骨质增生而形成的骨髓腔变窄征象及 骨髓充血水肿或纤维组织增生而形成的髓腔内条片 状高密度影. MRI诊断应力性骨折敏感性高,在T1WI自旋回 波MRI中,应力性骨折常表现为典型的低信号强度 线状区,周围包绕着大面积的边界不清的低信号强度 区域;而在T2WI自旋回波MRI中,应力性骨折常表 现为典型的低信号强度的线状区,周围包绕着大面积 的高信号强度区.在STIR序列影像中,应力性骨折 表现为高信号强度区域.在有些情况下,应力性骨折 的MRI图像会与骨挫伤时的MRI图像完全一样. MRI是诊断应力性骨折的金J,根据骨骼系统应 力损伤的程度和发展阶段,应力性骨折在MRI上的 表现可以分为5级:0级为正常;1级为STIR序列 T2WI仅能观察到轻微的骨膜水肿;2级表现为在 STIR序列T2WI上骨膜水肿增加和骨髓信号增高,在 T1WI上改变轻微;3级表现为更广泛的骨膜和骨髓 水肿,在T1WI和T2WI上都可以观察到;4级表现为 在MRI或者x线平片上均可观察到骨折线的真正应 力性骨折,伴或不伴肌肉水肿. ECT敏感性较高,但特异性较x线平片差.因为 骨肿瘤,炎症,骨折等病变都能产生阳性结果,所以必 须结合x线平片及病史才能作出诊断.一般情况下 在损伤后6,72h便可见到放射性核素浓聚区J,但 由于放射性核素浓聚区可持续数周至数月,因此不适 用于随访检查. 运动相关应力性骨折的诊断主要依靠典型的发 病部位,特定人群,运动史,疼痛特点及影像学表现. 影像上的骨折线及横形致密线是诊断应力性骨折的 重要依据,也是与感染及肿瘤鉴别的要点.临床中不 典型的应力性骨折影像学表现应与感染,骨样骨瘤, 骨肉瘤,骨尤文氏瘤及骨梗死进行鉴别. 5参考文献 [1]刘涛,邵增务,李健,等.应力性骨折发病机制研究进展 [J].国际骨科学杂志,2007,28(1):43—45. [2]李德权,于晓华.人体应力骨折发生部位研究进展[J]. 东南国防医药,2009,11(5):425—428. [3]王林森,王植,王淑丽,等.应力性骨折影像诊断[J].中 华创伤骨科杂志,2002,4(4):297—300. 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