乙肝e抗体(anti-HBe)

雅培操作检测程序 ARCHITECT i 2000SR                     项目：乙肝e抗体（anti-HBe）                     方法：化学发光微粒子免疫分析 试剂目录号：6C34                     试剂包装量：100X4 本标准操作检测程序为用户实验室的认可、评审、以及其他行政管理要求，提供所有产品使用的性能标准资料。 本性能特性可以复制。 1．实验原理和检验目的      Architect i2000SR Anti-HBe是采用化学发光微粒子免疫分析（Chemiluminesent Microparticle ImmunoAssay, CMIA）技术，竞争两步法对待测样品中的乙肝e抗体进行定性检测 Anti-HBe检测主要用来帮助诊断和监测HBV感染。    2．样品准备 血清和血浆：血清（包括SST管），血浆（EDTA-K2、肝素锂、肝素钠、枸橼酸钠、ACD、APCD-1、CP2D、CPD、草酸钾），使用玻璃管或塑料管分离样本，无黄疸、无溶血、无脂血，已分离出的样本应立即分析。 稳定性： 2－8℃可稳定7天，如需存放大于7天时，请于－20℃或更低的温度下保存。   3．试剂及标准品    3.1.1  ARCHITECT Anti-HBe试剂盒（6C34） MICROPARTICLES磁性微粒    鼠单克隆anti-HBe包被的磁性微粒子 CONJUQATE结合物    吖啶酯标记的鼠单克隆anti-HBe    NEUTRALIZING REAGENT中和试剂        重组的HBeAg    3.1 .3其他试剂：激发液  、 预激发液    、  清洗缓冲液（需另行配置）      3.2校准品： 名称:美国雅培i2000SR Anti-HBe校准品 LIST NO.: 6C34-01       规格：CAL 1：  0.0  PEI U/mL                 1LX4ml 3.3质控品 名称：美国雅培i2000SR Anti-HBe 质控品 LIST NO：6C34-10 水平     颜色               大约浓度                范围                       体积                        PEI U/mL          S/CO       % Inhibition 阴性－    无色         0.00              1.30 - 2.70       -35.0 - 35.0         8ml 阳性＋    蓝色         0.38              0.21 - 0.80        60.0 - 89.5         8ml          4． 校准      校准后的稳定期30天，每次更换批次时都应进行校准。按照您的实验室所建立的质控要求，使用至少三个水平的质控品进行校准曲线验证。如果质控结果不在可接受范围值内，则需要进行重新校准。 有关如何对检测进行校准的说明，见仪器特定操作手册第4单元。 5．操作步骤 按照要求准备标本，离心分离血清后，放入i2000sr标本位进行检测（具体操作详见相关仪器操作手册）   6． 质量控制 1. 每隔24小时运行三个质控水平（正常值和异常值）。 2. 如果质控结果不在实验室所规定的可接受范围值内，则患者值可疑。需使用新鲜质控品重复质控。 3. 如果质控结果仍不在可接受标准范围内，则需重新校准。每次更换试剂批次后，都要检查质控结果和可接受标准。   7． 参考值范围 ≤1.00  S/CO 阳性   8． 技术性能 8.1  精密度             ARCHITECT Anti-HBe在质控范围（0.21 - 2.70 S/CO）内的精密度 ≤10% 。由1个阴性样本、4个稀释的阳性样本、质控、校准品组成测试组。2个外部测试点使用2个不同批号的质控和校准品于2个批号的试剂上，1个内部测定点使用3个不同批号的质控、校准品于3个批号的试剂上。所有测试组的成员在每批测试中重复测定3次。见表（一） 表（一）Architect Anti-HBe精密度 检测           重复测       平均值                 批内运行                  批间运行                样本           定总数       (S/CO)       标准差     %变异系数     标准差    %变异系数        校准品1       516        2.00        0.096        4.79       0.097      4.83     阴性质控      516        1.97        0.086        4.38       0.095      4.80     阳性质控      516        0.51        0.027        5.29       0.029      5.68     1             204        0.11        0.006        5.64       0.007      6.55     2             204        0.23        0.008        3.72       0.010      4.48     3             204       0.47        0.018        3.76       0.022      4.66     4             204        0.93        0.044        4.75       0.047      5.04     5             204        1.70        0.080        4.69       0.084      4.93 8.2   特异性和灵敏度 特异性     ARCHITECT anti-HBe 对随机献血员的样本的特异性≥ 99.5% 。共1310份随机献血者的样本（血清和血浆）在2个临床检测点测定。6份样本ARCHITECT anti-HBe 阳性，同时anti-HBc也为阳性，剩下的1304份样本ARCHITECT anti-HBe 阴性。见表（二）。     ARCHITECT anti-HBe 对医院病人样本的特异性> 99.0% 。共498份医院病人样本在1个临床检测点测定。63份为ARCHITECT anti-HBe 阳性，同时anti-HBc也为阳性，剩下的435份样本ARCHITECT anti-HBe 阴性。见表（二）。            表（二）Architect anti-HBe在随机献血者和医院病人中的特异性结果 分类        数量        初次测定阳性        重测定阳性        追加试验阳性 随机献血者        1310        6        6        6 医院病人        498        64        63        63 总计        1808        70        69        69    155份来自可能含有潜在干扰物，处于其他疾病状态者的样本，用ARCHITECT Anti-HBe进行测定。7份样本为阳性，同时anti-HBc也为阳性。共75份来自输血后感染高危人群的样本，用ARCHITECT Anti-HBe 测定，15份样本为Anti-HBe阳性，同时anti-HBc也为阳性。数据见表（三）。 表（三）Architect Anti-HBe在含潜在干扰物和高危人群中的特异性结果 分类        数量        初次测定阳性        重测定阳性        追加试验阳性 含潜在干扰物的样本        155        7        7        7 输血后感染高危人群        75        15        15        15 灵敏度    ARCHITECT Anti-HBe 灵敏度≥ 99.5%. 在一份研究中对已知Anti-HBe 和anti-HBc阳性的206份样本进行了测定，ARCHITECT Anti-HBe 都为阳性。见表（四）。 表（四）Architect Anti-HBe使用已知Anti-HBe阳性样本的灵敏度 分类        数量        测定阳性 在已知Anti-HBe阳性样本        206        206    ARCHITECT Anti-HBe 在cut-off值处的灵敏度 ≤ 0.45 PEI U/mL。    在一份研究中，对共93份来自于临床或血清学分类处于不同HBV感染阶段人群的样本进行了分析。36份急性HBV感染者样本中有17份为阳性，19份为阴性。57份慢性HBV感染者样本中有36份为阳性，21份为阴性。 8.3  与一种商业性Anti-HBe测定的对比     共2605份样本（随机献血者、医院病人、含潜在干扰物的样本、输血后感染高危人群、急性HBV感染、慢性HBV感染、其他HBV标志物阳性、血清转换组）分别用ARCHITECT Anti-HBe 和 AxSYM Anti-HBe 2.0进行检测，2中方法的符合率为 99.19% (2584/2605).   9．异常情况处理          异常报告     当出现异常报告时，请根据操作手册查询错误原因及解决。如无法解决问，可联络雅培公司工程技术人员。   10．方法局限性      1．如检测结果与临床症状不符，建议复查以确认结果。      2．上机检测前，请先离心分离红细胞和颗粒物质。 3.        本检测所示性能未用尸体或其他动物的血清和血浆样本建立和证实。 4.        曾接受过鼠单克隆抗体制剂治疗和诊断者，血清、血浆中可能含有人抗鼠单克隆抗体。这样的样本可对使用鼠单克隆抗体的检测项目引起假性升高或降低。需更多的其他诊断检查或临床症状对病人状况进行正确评价。 5.        本检测所示性能未用尸体或其他动物的血清和血浆样本建立和证实。 6.        不可使用大量溶血的样本。 7.        来自肝素化病人的样本可能会有部分凝结，由于纤维的存在可能会导致出现错误    结果。为了防止这种现象，请于肝素治疗前抽取样本。 8.        人血清/血浆样本中的异嗜性抗体可与试剂中的免疫球蛋白反应，干扰检测。对于常暴露于动物或动物血液制品中的病人，可能会现异常结果，此时需要额外的信息来帮助诊断。