diff-2血细胞分析仪作业指导书

diff-2血细胞分析仪作业指导书 标题:diff-2血细胞分析仪作业指导书 版本号:A 修订号:0 文件编号:WHSDJYY-SOP-LJ-010 发布日期:2007年11月30日 生效日期:2008年01月01日 发布部门:管理层 编制人:杨峻 审核人: 金锡 批准人,签字,: XXX 页码:第 1 页 ～ 共 11 页 BECKMAN diff-2血细胞分析仪作业指导书 一)贝克曼库尔特diff 2 分析仪 临床应用手册 目录 第一部分 Act diff2血细胞分析仪工作原理简介 一(库尔特原理 二(库尔特专利技术 第二部分 血细胞直方图介绍 一(直方图的导出 二(白细胞直方图 三(红细胞直方图 四(血小板直方图 第三部分 检测参数介绍 一(白细胞系列参数 二(红细胞系列参数 三(血小板系列参数 第四部分 常见的旗标及其临床意义 一(旗标类型 1 二(常见旗标的临床意义 第一部分 Act diff2血细胞分析仪工作原理简介 Act.diff2是贝克曼库尔特公司推出的最新款三分类血液分析仪，检测速度为60样本/小时，能报告18个临床参数及3个血细胞直方图。 该仪器的检测原理包括: (库尔特原理 — 用以检测细胞数量和体积，同时构筑细胞体积分布直方1 图; 2(单色光比色原理 — 用以检测血红蛋白。 Act.diff2血液分析仪吸入的样本将被分成两部分稀释，一部份送到红细胞计数池进行红细胞和血小板计数;另一部份在完成红细胞的溶解和血红蛋白的转化后在白细胞计数池进行白细胞计数和血红蛋白测定。红细胞、血小板和白细胞都是根据库尔特原理计数得来;血红蛋白是利用分光光度计比色得到;白细胞的三分类根据白细胞体积分布直方图得来。 一(库尔特原理 库尔特原理是利用电阻抗法测量细胞的数量和体积。其内容为:血细胞是电的不良导体，当一个细胞通过计数小孔时，会导致小孔两端电阻的瞬间变化，将其转化成脉冲，感应器通过检测脉冲的数量及大小，从而计算出通过小孔的细胞数量及体积。 细胞计数池中，小孔内外两个电极和稀释液构成一个电流回路，在负压的作用下，细胞依次通过小孔，电极能感应到一个瞬间的电阻变化，并将其转换成脉冲，脉冲的数量代表细胞的数量，脉冲的大小反映细胞的体积大小。 利用库尔特原理，能够对白细胞进行计数并根据体积分布进行三个亚群的分类;对红细胞和血小板根据体积进行区分并分别计数。 2 图1 库尔特原理示意图 负压 ( 小孔电流 内电极 外电极 小孔近观 样品杯 血细胞 悬液 小孔 小孔管 二(库尔特专利技术 1(脉冲编辑 当细胞从小孔中央通过时，将得到一个规则的脉冲，反之将得到不规则 的脉冲，不规则脉冲的机率可以根据细胞浓度和小孔的面积进行推算，在这 种情况下仪器将删除不规则脉冲，并进行校正。 2(重叠校正 当两个或两个以上的细胞重叠在一起，同时通过计数孔时，将只有1个脉冲被检测到，这样会导致细胞数假性下降，体积数假性上升，这种重叠的机率可以根据细胞浓度、小孔的面积及流速进行推算，仪器本身能将这种重叠进行校正。 3(三次计数和延长计数: 在库尔特血液分析仪上，每一个样本都要进行三次计数，结果取三次计数的平均值。如果三次结果统一，结果将取平均值;如果有一次结果不好，结果将取另外两次计数的平均值并标以旗标;如果三次结果均不统一，仪器将不给出数值，结果以“------”代码替代。 在计数的同时，感应器将检测通过的细胞数量是否足够进行直方图分析，并将自动延长少于界定数量标本的计数时间，以保证达到一定的统计数量，减少统计学误差。 4(扫流技术 3 由于红细胞和血小板在同一个计数池，红细胞在经过小孔后，可能发生回流，触及小孔感应区，电极就会感应到一个微弱的脉冲，而将其计成血小板，导致血小板数量假性上升。为了防止这种干扰，库尔特运用扫流技术，在小孔后侧安装一个液流装置，及时将通过小孔的红细胞冲走，消除回流对血小板的干扰。 5(血小板拟合技术 血小板的体积范围在0fl,70fl，在实际计数中，为了排除2fl以下电子背景和杂质的干扰，以及20fl以上小红细胞和其他细胞的干扰，根据血小板的对数正态分布理论，在红细胞/血小板计数池中只计数2fl,20fl的血小板，用电子拟合曲线拟合出0fl,70fl范围的血小板数量。通过拟合可以有效排除干扰，使结果更准确。 第二部分 血细胞直方图介绍 一(直方图的导出 在细胞通过小孔计数时，感应器收集脉冲的大小及数量，转换为相应的 细胞体积和数量，将体积为横坐标，以细胞的相对数量为纵坐标，就得到某 一种细胞的体积分布直方图。血细胞直方图通常有三种:白细胞直方图、红 细胞直方图和血小板直方图。 二(白细胞直方图 进入白细胞计数池的样本要经过溶血剂处理，这时红细胞快速溶解，白细胞失水皱缩，皱缩后的白细胞形成体积差异明显的三个亚群，在直方图上表现为三个峰区，根据直方图在不同体积段三个峰区的比例，决定白细胞三个亚群的百分比。图2为典型的白细胞直方图。 4 数 量 35fL 图2 典型的白细胞直方图 450fL 体积(fL) 该直方图体积分布范围在30,450fL，大于35fL的颗粒被计数为白细胞，30,35fL用于观察异常细胞群和细胞碎片。从白细胞直方图上，可以明显地看到三个细胞分布区:最左边又高又陡的峰，跨度35,90fL，是淋巴细胞峰，以成熟淋巴细胞为主;最右边又低又宽的峰，跨度160,450fL，是粒细胞峰，以中性粒细胞为主;两峰之间的平台地带，从90,160fL，是单个核细胞细胞区，以单核细胞为主。 直方图上有四个区域，大约在35fL、90fL、160fL、450fL的位置，分别标记为1、2、3、4，如果这些区域的细胞分布出现异常，将引发报警。 三(红细胞直方图 图3 典型的红细胞直方图 5 图3是典型的红细胞直方图，体积分布从24,360fL，仪器将大于36 fL的颗粒计为红细胞，24,36 fL用以观察是否有36 fL以下的小红细胞被漏计。 从典型的红细胞直方图上，可以看到两个细胞群体: 1(细胞主群 从50 fL开始，两侧对称呈正态分布的曲线，又称“主峰”; 2(大细胞群 在主群右侧，又称“足趾部”，是一些红细胞二聚体、三聚体、多聚体的混合物。 四(血小板直方图 图4 典型的血小板直方图 图4是典型的血小板直方图，它通常包括两条曲线:一条是2,20 fL的原始数据曲线;另一条是0,70 fL的电子拟合曲线。仪器根据测量得到的2,20 fL范围内血小板分布情况，按照对数正态分布规律得到0,70 fL范围血小板分布情况。如果拟合成功，血小板数量由拟合曲线下的面积测得，即0,70 fL范围的血小板数量;如果拟合不成功，没有拟合曲线，血小板结果只报告2,20fL范围的血小板数量。 血小板曲线不拟合的原因有: 91(直接计数的血小板颗粒数< 20×10/L; 2(血小板不呈现对数正态分布; 3(血小板平均体积不在3,15fL之间; 4(血小板分布宽度> 20% 6 第三部分 检测参数介绍 一(白细胞系列参数 1(WBC 中文名称:白细胞 9正常参考范围:4.0,10.0 ×10/L 2(GR% 中文名称:粒细胞百分比，即白细胞通过三分类得到的粒细胞部分占所有白 细胞的百分比。 正常参考范围:50%,70% 3(GR# 中文名称:粒细胞绝对值 9正常参考范围:2.0,7.0 ×10/L 4(MO% 中文名称:单个核细胞百分比，即白细胞通过三分类得到的单个核细胞部分 占所有白细胞的百分比。 正常参考范围:3%,8% 5(MO# 中文名称:单个核细胞绝对值 9正常参考范围:0.12,0.8 ×10/L 6(LY% 中文名称:淋巴细胞百分比，即白细胞通过三分类得到的淋巴细胞部分占所 有白细胞的百分比。 正常参考范围:20%,40% 7(LY# 7 中文名称:淋巴细胞绝对值 9正常参考范围:0.8,4.0 ×10/L 二(红细胞系列参数 1(RBC 中文名称:红细胞 12正常参考范围:男性 — 4.0,5.5 ×10/L 12 女性 — 3.5,5.0 ×10/L 2(Hgb 中文名称:血红蛋白 正常参考范围:110,160g/L 3(Hct 中文名称:红细胞比积，即将EDTA抗凝血在一定条件下离心沉淀，测出 红细胞在全血中占体积的比例。 在Act diff2仪器上为计算参数，为: Hct = (RBC×MCV)/1L 正常参考范围:0.35,0.50 4(MCV 中文名称:平均红细胞体积 正常参考范围:80,100 fL 5(MCH 中文名称:平均红细胞血红蛋白含量 在Act diff2仪器上为计算参数，计算公式为: MCH = Hgb / RBC 正常参考范围:27,34 pg 8 6(MCHC 中文名称:平均红细胞血红蛋白浓度 在Act diff2仪器上为计算参数，计算公式为: MCHC = Hgb / Hct 正常参考范围:320,360 g/L 7(RDW 中文名称:红细胞分布宽度，是反应红细胞体积大小一致性的参数，其值越 大，反应红细胞大小越不一致。 正常参考范围:11.5%,15% 三(血小板系列参数 1(PLT 中文名称:血小板 9正常参考范围:100,300 ×10/L 2(MPV 中文名称:平均血小板体积 正常参考范围:6.5,12 fL 3(Pct 中文名称:血小板比积, 即血小板在全血中占体积的比例。 正常参考范围:0.108%,0.272% 4(PDW 中文名称:血小板分布宽度，是反应血小板体积大小一致性的参数，其值越 大，反应红细胞大小越不一致。 正常参考范围:11.5%,18% 9 第四部分 常见的旗标及其临床意义 一(旗标类型,有两种类型的旗标: 1.替代性旗标(代码) 结果不显示，而以代码替代，主要有 “-----”、“+++++”、“XXXXX”、“„„”等。 2.非替代性旗标 出现在参数后面，主要有“×”、“+”、“*”、“1”、“2”、“3”、“4”、“M”(代表多个区域)、“H”、“L”等。 (二)旗标及代码的临床意义 1.“-----”(虚线) 表示三次计数结果不统一。 如果WBC参数后出现该旗标，则参数LY#、MO#、GR#后也将出现“-----”旗标，而参数LY%、MO%、GR%后将出现“*”旗标; 如果RBC参数后出现该旗标，则参数Hct、MCH、MCHC后将出现“……”旗标，而参数MCV、RDW、PLT、MPV(PCT和PDW)后将出现“*”旗标; 如果参数MCV后出现该旗标，则参数Hct和MCHC后将出现“……”旗标，而参数RDW后将出现“*”旗标; 如果参数PLT后出现该旗标，则参数MPV(PCT和PDW)后将出现“……”旗标; 如果参数MPV后出现该旗标，则参数PLT(PCT和PDW)后将出现“*”旗标; 如果参数PDW后出现该旗标，则参数PLT、MPV(及PCT)后将出现“*”旗标。 2.“+++++” 表示结果超出仪器的操作范围。 如果参数WBC后出现该旗标，则参数LY#、MO#、GR#、LY%、MO%、GR%后将出现“……”旗标，而参数RBC、HGB、Hct、MCV、MCH、MCHC、RDW、PLT、MPV(PCT和PDW)后将出现“*”旗标; 10 如果参数RBC后出现该旗标，则参数MCV、RDW、PLT、MPV(PCT和PDW)后将出现“*”旗标，而参数MCH和MCHC后将出现“……”旗标; 如果参数HGB后出现该旗标，则参数MCV和MCHC后将出现“……”旗标; 如果参数PLT后出现该旗标，则参数MPV(PCT和PDW)后将出现“……”旗标，而参数WBC、LY#、MO#、GR#、HGB、MCH和MCHC后将出现“*”旗标。 另外，当参数MCV<50fL或>130fL时，该参数后也会出现该旗标。这时参数RBC、MCH、RDW、PLT、MPV(PCT和PDW)后将出现“*”旗标，而参数Hct和MCHC后将出现“……”旗标。 3.“XXXXX” 表示计数小孔阻塞报警。 如果阻塞发生在白细胞计数小孔，WBC参数及其分类参数的百分比和绝对值将出现“XXXXX”旗标; 如果发生在红细胞/血小板计数小孔，参数RBC、Hct、MCV、MCH、MCHC、RDW、PLT、MPV(PCT和PDW)后将出现“XXXXX”旗标。 4.“……” 表示计数不完全，系统缺乏足够的数据，结果无法计算。是从三次计数不统一的参数中衍生得到的。 如果分类参数LY#、MO#、GR#、LY%、MO%、GR%后出现该旗标，引起 99的原因有:WBC<1.0×10/L或>99.9×10/L;参数LY#、MO#、GR#三次计数不统一;结果无法计算。 如果参数HGB计算时发现错误，HGB后将出现该旗标，而参数MCH和MCHC后也将出现该旗标。 如果参数Hct、MCH和MCHC后出现该旗标，引起的原因有:RBC三次计数不统一;参数RBC、HGB、MCV的结果超过操作范围;HGB结果不完整(错误)。 如果参数MPV(PCT和PDW)后出现该旗标，引起的原因有:PLT三次计数不统一;PLT结果超过操作范围。 11 如果参数Hct和MCHC后出现该旗标，说明MCV三次计数不统一。 5.“+” 表示结果超出线性范围，但小于操作范围。 9999.9×10/L > WBC <150×10/L; 12127.00×10/L > RBC <8.00×10/L; 250g/L > HGB <300g/L; 99999×10/L > PLT <3000×10/L。 如果参数WBC后出现该旗标，则参数RBC、HGB、MCV、Hct、MCH、MCHC、RDW、PLT、MPV(PCT和PDW)后将出现“*”旗标，而参数LY#、MO#、GR#、LY%、MO%、GR%后将出现“……”旗标; 如果参数RBC后出现该旗标，则参数Hct、MCH、MCHC、MCV、RDW、PLT、MPV(PCT和PDW)后将出现“*”旗标; 如果参数HGB后出现该旗标，则参数MCH和MCHC后将出现“*”旗标。 如果参数PLT后出现该旗标，则参数MPV(PCT和PDW)、WBC、LY#、MO#、GR#、HGB、MCH、MCHC后将出现“*”旗标; 6.“1”、“2”、“3”、“4”、“M”(针对白细胞分类参数) 说明白细胞分类参数在一个特定区域(1、2、3、4)或多个区域(M)没有达到体积分布(分类比例异常或出现异常细胞)。 7.“H” 说明样本分析结果(或质控结果)超过参考范围上限。 8.“L” 说明样本分析结果(或质控结果)低于参考范围下限。 9.“X” 表示计数小孔部分报警，提示结果需复核。 10.“*” 表示检测或计算过程受到影响。通常出现在受“-----”、“+”、“+++++”等旗标影响的参数后。 12 如果(HGB×3×100)/Hct的结果小于0.8或大于1.2，说明样本处理有问题，这时参数RBC、HGB、Hct、MCV、MCH、MCHC、PLT、MPV(PCT和PDW)后将出现“*”旗标; 如果该旗标只出现在参数RDW后，说明RBC直方图不对称，可能存在双峰; 如果只出现在WBC参数后，说明白细胞计数在35fL处受干扰; 9如果只出现在参数PLT、MPV(PCT和PDW)后，可能是PLT<20×10/L、三次计数不统一、PLT分布异常(MPV<3fL或>15fL)、PDW>20或扫流错误; 如果参数MCHC<250.0g/L或>40.0g/L，说明有样本干扰或仪器问题，这时参数RBC、HGB、MCH、MCHC后将出现“*”旗标。 13 二、贝克曼库尔特Ac.T diff 2 分析仪 操作手册 14 目录 第一部分 触摸屏图标注释 3-9页 第二部分 每日开机和关机 10-11页 第三部分 每日质控 12-23页 第四部分 样本运行 24-35页 第五部分 校准 36-46页 :质量保证 :屏幕调暗 15 :屏幕调亮 :样本结果屏幕 第一部分 触摸屏图标注释 一(主菜单图标 具体图标含义如下: :质量保证 :设置 :屏幕调暗 :开机启动 :屏幕调亮 :稀释器功能 :样本结果屏幕 :关机 :闭盖全血模式 :诊断 :预稀释模式 16 :分析模式 :开盖全血模式 二(设置菜单图标 具体图标含义如下: :单位 :日期/时间 :传送 :打印机配置 :病人限值 :实验室编号 :校准系数 :退出 :打印设置报告 17 三(质量保证菜单图标 具体图标含义如下: :4C PLUS管理 :4C PLUS细胞质控物分析 :校准 :重复性 :4C PLUS限值 :退出 :携带污染 18 四(稀释器功能菜单图标 具体图标含义如下: :灼烧小孔 :灌注反应池 :灌注溶血素 :分配溶血素 :清洁反应池 :排空反应池 :灌注稀释液 :灌注扫流管 :退出 :清洗+混合 19 五(诊断功能菜单图标 具体图标含义如下: :电压/传感器 :乳胶校准 :样本详细说明 :电动机 :准备装运 :电磁阀 :脉冲测试 :循环计数器 :退出 :验证预稀释 20 六(样本结果屏幕图标 具体图标含义如下: :分配稀释液 :检索储存数据 :正在运行 :回到主屏幕 :打印样本结果 :重新传送主机 :病人限值 :输入病人编号 21 七(样本编号屏幕图标 具体图标含义如下: :下一自动编号 :删除 :保存和退出 :退出 22 第二部分 每日开机和关机 一(开机/启动程序 当您打开仪器后，仪器将自动执行开机程序;如果您在仪器运行中希望再次执行开机程序，也可执行此操作，开机程序应每日执行。 1(在主菜单选择启动菜单; 2(仪器在执行启动程序后， 将给出关于白细胞、红细胞、 血红蛋白、血小板的本底报 告，以PASS或FAIL表示; 本底限值为: 9 WBC 0.4×10/L 12RBC 0.04×10/L 9PLT 7.0×10/L HGB 0.2 g/L 二(关机程序 关机程序应每日执行，如果您实验室每日样本量少于5个，可隔一天执行一次关机程序。 1(在主菜单选择关机菜单; 23 2(当出现右侧屏幕时，您可以关闭 仪器。 24 第三部分 每日质控 一(建立质控文件 1(请确认您使用的是4C PLUS质控品; 2(在主菜单屏幕选择 菜单; 25 3(在QA菜单下，选择4C 管理菜单; 4(选择相应的质控水平; (L、N或H) A:所有水平 L:低水平质控 N:正常水质控 H:高水平质控 5(输入质控品批号; 26 6(按月-日-年的格式输 入质控品有效期; 7(按打印图标打印输入的信 息; 8(按保存退出图标保存信 息; 二(输入质控数值 重要:如果输入错误的数值，可能出现误导性结果。如果您使用的不是库尔 特4C PLUS质控品，不要执行以下步骤。 27 1(在主菜单屏幕选择菜单; 2(在QA菜单下选择菜单或菜单; 3(选择相应的质控品 水平 L:低水平质控 N:正常水平质控 H:高水平质控 28 4(参照质控品的预期值表; 5(输入每一个参数相应的预期值范围; 6(按屏幕右下方中间的保存图标以保存输入的数值，保存图标上方的L、N或H表示当前质控水平; 7(重复以上步骤，直到输入所有水平的质控参数。 7(当全部输入结束后，可按保存退出图标; 8(重复步骤1,7直至所有 水平的质控数值都已输入。 29 9(退回到QA菜单，选择 4C管理菜单，选择 A(所有水平)，按打印键 打印所有数值。 三(运行质控(仪器默认闭盖全血模式) 1(请先确认您将运行的4C质 控品批号和数值已按照预期 值表正确输入; 30 2(确认您运行的4C质控 品在有效期内，且储存在 OOC,8C); 正确温度下(2 3(将4C质控品取出，在室温下回温15分钟，回温后，按“8×8×8”方式混匀; a(将试管向上直立于两手掌之间， 缓慢滚动8次 b(将试管倒置，立于两手掌之间， 缓慢滚动8次 c( 将试管轻轻倒置8次 4(在主菜单屏幕选择菜单; 31 5(在QA菜单下，选择运行4C质控菜单; 6(选择相应的质控水 平，如果所选的质控品 已过期，在屏幕左下角 出现过期图标; 7(请确认您所运行的 质控品和所选择的水 平一致; 8(将质控品预先颠倒混匀1分钟; 32 9(将充分混匀的质控品插入闭 盖进样区，将闭盖进样门推上; 注意: (a) 充分混匀后5秒内进样; (b) 如果闭盖进样门在自动打开后被 不经意推上，或在未做样本的状态下 关闭，您可以通过返回到主菜单按样 本结果键来打开它，打开此门后，回 到主菜单屏幕，并回到步骤4。 重要:如果在样本分析结束前打开闭盖进样门，将导致错误结果的发生。请勿打开闭盖进样门，该门 将自动打开。 10(当闭盖进样门自动打开 后，将质控品取出，放回 OO2C,8C储存环境中; 33 11(分析结束后，结果将自动显示在屏幕上; 结果将自动保存(非数字结果除外); 如果自动打印关闭，您可以按打印图标手动打印结果; 如果手动删除结果，请按垃圾箱图标; 如果结果出控，请重新运行一次，如再出控，请采取相应或联系工程师; 11(重复6,10步骤，运行其他水平的4C质控品。 34 四(打印质控结果 1(在主菜单屏幕，选择 菜单; 2(在QA菜单下，选择4C管 理菜单; 3(选择您要打印的质控水 平; 35 4(选择不同的打印图标， 打印不同形式质控结果， 如当前结果、汇总结果、 直方图结果，见右图。 36 第四部分 样本运行 Act diff 2仪器共有3种分析模式:闭盖全血模式、开盖全血模式、预稀释模式，请选择适当的分析模式分析样本，并选择相应的参考值范围(0、1、2或3，其中0为线性范围)。 OO全血样本以EDTA抗凝后检测，普通样本的储存应置于2C,8C，对于需要做血小板和白细胞分类的样本不能冷藏储存，冷藏后的样本需要室温下回温后再检测。 重要:在不正确的分析模式下分析样本将导致错误的分析结果; 一(闭盖全血模式运行样本 1(在主菜单屏幕选择闭 盖全血模式，如右图; 2(从主菜单屏幕进入样本结果 屏幕; 注意:如果闭盖进样门在自动打开后被不经意推上，或在未做样本的状态下关闭，您可以通过返回到主菜单按样 本结果键来打开它， 37 3(选择合适的结果 参考值范围(1、2 或3); 注意:0是仪器的线性 范围。 4(确认当前样本号正确， 如果您希望手工输入样本 号，按样本号图标，手工 输入样本号; 5(将样本按照“8×8×8”方 式混匀; a(将试管向上直立于两手掌之 间，缓慢滚动8次 b(将试管倒置，立于两手掌之间， 缓慢滚动8次 c( 将试管轻轻倒置8次 38 6(请确认当前分析模式为闭 盖全血模式; 重要:如果在样本分析结束前打开闭盖进样门，将导致错误结果的发生。请勿打开闭盖进样门，该门 将自动打开。 7(将充分混匀的样本插入闭 盖进样区，将闭盖进样门推 上; 8(当进样结束，闭盖进样门自动打 开后，将样本取出; 39 9(分析结束后，结果将自动 出现在屏幕上并被保存; 10(按打印图标打印当前结果。 二(开盖全血模式运行样本 1(在主菜单屏幕选择开盖全血 模式; 40 2(从主菜单屏幕进入样本结果屏幕; 3(选择合适的结果参考值范围(1、2或3); 注意:0是仪器的线性范围。 4(确认当前样本号正确，如果您希望手工输入样本号，按样本号图标，手工输入样本号; 41 5(将样本按照“8×8×8”方式混匀; a(将试管向上直立于两手掌 之间，缓慢滚动8次 b(将试管倒置，立于两手掌 之间，缓慢滚动8次 c( 将试管轻轻倒置8次 6(请确认当前分析模式为开盖全血模式; 7(将充分混匀的样 本移去试管塞，将 试管递到吸样针 下，按吸样键; 8(当听到轰鸣声 后，移去试管，塞 上试管塞; 42 9(分析结束后，结果将自动 出现在屏幕上并被保存; 10(按打印图标打印当前结 果。 三(预稀释模式分析样本 预稀释模式将1580微升稀释液释放到一个空试管里，再加入用毛细管采集 的含有的20微升血样，进行稀释，得到足够的样本量，供仪器吸样分析。 1(在主菜单屏幕上，选择“预 稀释模式”; 2(从主菜单屏幕进入样 本结果屏幕 43 3(按“释放稀释液”图标，进样针会收缩到仪器里，然后再向下伸出; 4(把一个空试管放进样针下，然后按吸样开关， 把1580微升稀释液释放到试管里，所有的稀释液样本都制备好之后，按“退出”图标，返回样本结果屏幕; 5(制备分析用的样本:把20微升血样加到有稀释液试管里，按照实验室规程混匀样本等待至少5分钟，然 后才可分析样本; 6(每一个样本重复步骤3,5; 44 7(确认您处于预稀释分析模式下; 8(按“病人限值”图标直到出现所需范围 (1，2或3); 注:0不是病人限值， 它代表仪器线性范围 9(确认当前样本号正 确，如果您希望手工输 入样本号，按样本号图 标，手工输入样本号; 45 10(把均匀混合的预 稀释样本放到进样针 下，按吸样开关。 听到蜂鸣声以后，把 试管移开; 11(分析结束后，结果将 自动显示在屏幕上并被 保存; 12(按打印图标将结果打印 出来; 四(打印已储存的样本结果 本仪器自动储存250个样本结果(含直方图)，样本分析结束后结果将自动 储存，对于以往分析的样本结果您可以按照以下步骤查找打印。 1(从主菜单屏幕进入样本 结果屏幕; 46 2(在样本结果屏幕上按查 找储存样本结果图标; 3(出现查找屏幕，可按照样 本分析日期查找结果; 4(按月-日-年输入查找起始和终 止的日期; 47 5(按打印图标，仪器 将按照您的查找要求 打印出相应的结果，格 式大体如右图所示。 48 第五部分 校准 一(校准前检查 1(确定仪器处于正确的日常保养程序下; 2(做计数池的清洗程序; O O3(仪器处于合适的的操作温度范围(20C,35C); 4(试剂量充足; 5(执行开机程序; 二(重复性测定 AcT diff2具备重复性测定功能，能对检测的样本结果自动进行计算，重复性是用来确保仪器对血细胞参数测定的一致性，在您将一个样本连续测定若干次后，仪器将:计算出样本各参数若干次测定结果的标准差(SD)和变异系数(CV%);对重复性结果显示“通过(PASS)”或“失败(FAIL)”。 在做重复性测定时，公司推荐使用全血模式并用全血或已知结果范围的细胞质控品如4C PLUS细胞质控品。 为了保证计算，本测定中仪器必须获得至少3个以上可接受的样本结果，如果某一个结果不可接受，仪器将自动删除，您也可通过垃圾箱来删除。 具体步骤为: 1(选择做重复性的样本数值必 须在仪器可接受范围内，如: 9WBC 6.0,15.0×10/L 12RBC 3.00,6.00×10/L HGB 120,180g/L MCV 80,100fL 9PLT 200,500×10/L 49 3(在主菜单屏幕，选择 菜单; 4(在QA菜单下，选择 重复性测试菜单; 50 5(将样本按照“8×8×8”方式混匀; a(将试管向上直立于两手掌之 间，缓慢滚动8次 b(将试管倒置，立于两手掌之 间，缓慢滚动8次 c( 将试管轻轻倒置8次 6(在您选定的分析模式下运行样本; 如果出现非数字结果或手动删除结果，选择屏幕左下角出现的垃圾箱图标; 7(当第一个样本结果显示后， 使用垃圾箱图标将其删除; 8(重复步骤5直至完成10次以上测试，当仪器接收数据后将自动储存; 注意:在每次分析之后都应将样本取 出颠倒混匀，等待下一次进样; 最多勿超过31次测试。 51 9(按打印图标即可打印出重复 性的结果报告。 三(携带污染测定 1(确定已完成重复性测定; 52 2(在主菜单屏幕，选择携带污染菜单; 3(将一样本按“8×8×8”方式充分混匀，插入闭盖进样区，推上闭盖进样门; 4(重复步骤3运行下一个样本; 5(不插入样本，推上闭盖进样门，做一 个空白样本; 6(再重复做2次空白样本; 53 四(自动校准(推荐使用贝克曼库尔特S-Cal校准品) 54 1(确认重复性测定和携带污染 测定已完成; 2(S-Cal校准品小瓶放置室温下 回温15分钟; 3(在主菜单屏幕，选择菜单; 4(在QA屏幕，选择校 准菜单，进入校准分析 屏幕; 55 5(依照S-CAL校准品的说明书，输入校准品的批号和靶值; 6(按继续键保存输入的数值， 并进入校准分析屏幕， 屏幕左上方ID表示根据校准 程序需要测试的次数，N表示 实际测试的次数; 56 7(将校准品小瓶按“8×8×8” 方式混匀: a(将小瓶向上直立于两手掌之间， 缓慢滚动8次 b(将小瓶倒置，立于两手掌之间， 缓慢滚动8次 c( 将小瓶轻轻倒置8次 用配套的吸管吸入干净的带橡皮 塞的试管中; 9(将装有S-Cal校准品的试 管颠倒混匀1分钟，插入闭 盖进样区，将闭盖进样门推 上; 重要:如果在样本分析结束前打开闭盖进样门，将导致错误结果的发生。请勿打开闭盖进样门，该门 将自动打开。 57 10(当闭盖进样门自动打开 后，将试管取出，再次颠倒 混匀，等待下一次进样， 如此循环10次，直至完成 11次测定，仪器自动删除第 1次测试结果，自动保存校 准数据，并得出新校准系 数; 注意:如果测试中出现了非数字 结果，仪器将自动删除此次测试。 11(按打印键打印校准报告; 12(查看每一个参数的结果，如果: 出现“PASSED”，说明该参数测定均数和校准品设定值之间的绝对差值小于校准标准表中的低值，无须校正，按返回键，校正系数不被更新; 58 出现NEEDED，说明该“” 参数测定均数和校准品设定 值之间的绝对差值处于校准 标准表值中，需要校正，按 保存退出键，新校正系数自 动出现，并自动更新; “FAILED”，说出现 明测定均数和校准品设 定值之间的绝对差值超 出校准标准表中的高 值，这时校正结果不能 被保存，需联系公司技 术人员; 校准标准表 参数 绝对差值 单位 13(通过运行4C质低值 高值 9控品或新鲜全血来WBC 0.21 0.60 ×10/L 12验证校准。 RBC 0.081 0.170 ×10/L HGB 0.21 0.50 g/dL MCV 1.01 2.00 fL 9PLT 9.1 23.0 ×10/L 59 三、贝克曼库尔特Ac.T diff 2 分析仪 日常维护和保养手册 目录 60 日常维护和保养 一(每日保养 二(每周保养 三(每2周保养 四(每月保养 (每2月保养 五 六(灼烧小孔 61 日常维护和保养 一(每日保养 (一)执行启动程序 说明:(1)在结束关机状态下按“继续”键可自动执行启动程序; (2)在操作过程中关闭电源或断电后，再次接通电源将自动执行此程序; (3)在上一个样本分析完成2小时后，再运行仪器时，仪器将自动执行启动 程序。 (二)执行关机程序 说明:此程序为人为关机，以便清洗仪器。如果每天所做样本不到5个，可隔一 天执行一次关闭程序。 二(每周保养—仪器除尘 三(每2周保养—清洁闭盖进样区 62 如果在闭盖进样区有样本溅出，也必须马上执行如下清洗程序。 所用材料: 卷桶纸; 棉签; 清洁剂(5%次氯酸 钠按1:10稀释) 1(关闭仪器电源键，将电源插 头拔去; 63 2(推上闭盖进样 门，打开仪器左 侧门; 3(用螺丝刀将仪器前 门紧固的螺丝松开; 64 4(打开仪器前门; 5(打开闭盖进样门， 暴露试管支架; 65 6(在闭盖进样门下垫一些吸水纸; 8(用清洁剂擦 拭闭盖进样门 外侧; 9(用清洁剂冲 洗闭盖进样区 的试管感应 区; 66 10(用棉签擦拭 闭盖进样区的 试管感应区内 侧; 妥善处理废弃 物; 11(小心将试管支架装回原处; 12(插上仪器电源; 67 13(打开仪器电源开关。 四(每月保养—清洁空气过滤网 如图:位于仪器背后的风扇室内 1(关闭仪器电源; 68 2(拔去仪器电源插头; 3(将风扇室金属外盖 移去，取出空气过滤 网; 将空气过滤网用清水 洗净，晾干; 4(将洗净晾干的空 气过滤网放回原 处，装好金属外盖; 5(插上电源插头; 69 6(打开仪器电源，继续常规操作。 五( 每2月保养—清洁反应池 1(一个(Ac.t diff 2可以吸取的)试管，灌注1毫升以上的优质无芳香漂洗剂(5% 次氯酸钠-有效氯) 2(主菜单上选择稀释器功能图 标; 3(在稀释器功能屏幕下，选 3( 择清洗反应池图标; 4(将装有漂洗剂的试管递到 吸样针下，按吸样键，仪器自4 动吸取漂洗剂，进入清洗程(将 序，整个清洗过程大约需要15 分钟; 70 六(灼烧小孔 当出现下列情况时，可以考虑执行灼烧小孔程序: , 小孔报警增多; , 三次计数不统一增多; , 细胞计数值减少; , MCV值增加; , 质控物结果出控; , MCV、RBC、WBC计数值不稳定 71