天山雪莲标准

天山雪莲 天山雪莲花药材质量标准及起草说明 《中国药典版》2005年版新增品种 起草单位新疆维吾尔自治区药品检验所 2003年11月 2005年版《中国药典》新增品种 天山雪莲花质量标准及起草说明 新疆维吾尔自治区药品检验所起草 1 天山雪莲花 Tianshan Xuelianhua HERBA SAUSSUREAE INVOLUCRATAE 本品系维吾尔族习用药材。为菊科植物天山雪莲花Saussurea involucrata Kar.et Kir.Sch.Bip.Linnaea的干燥地上部分。6-8月花开时采集阴干。 【性状】 本品为带茎和叶的花头部呈圆球状或断碎。茎长2-48cm直径0.5-3cm 表面具纵棱中空。茎生叶互生无柄排列密集或叶脱落残基呈卵状长圆形或广披针形长5-22 cm宽1-5 cm 黄绿色或黄棕色主脉明显两面被柔毛或稀疏边缘有锯齿和缘毛。苞叶长卵形或卵形无柄中部凹陷呈舟状黄白色两面被稀柔毛或无边缘有锯齿和缘毛膜质半透明。头状花序1 0-42个密集成球状生于茎顶无梗由苞叶包围。总苞片3-4层等长披针形长0.5-1.5cm宽0.1-0.2cm表面及顶端被绒毛外层多呈紫褐色内层棕黄色或黄白色边缘暴露处紫褐色。花管状紫红色柱头2裂。瘦果圆柱形或稍弯曲具明显纵棱长约5mm 直径1mm灰褐色顶部有2层羽毛状冠毛灰白色长约1.0-1.5cm。气微香味微苦。 【鉴别】 1本品粉末黄灰色至黄绿色。腺毛多为类棒槌形头部和柄多为2列细胞长50-220μm宽50-60μm。非腺毛为多细胞或单细胞基部细胞类长方形先端细胞较细或纽曲长40μm-300μm。花粉粒球形直径45-68μm外壁有刺状突起具3孔沟。气孔不定式轴长40-50μm短轴20-30μm。冠毛为多列性分枝状毛各分枝单细胞先端渐尖。花柱碎片具刺状或绒毛状突起。导管呈环纹、网纹和梯纹直径15-40μm。纤维多呈束。韧皮纤维类长方形或梭形壁稍厚胞腔大具纹孔。 2 取本品粉末0.5g 加甲醇20ml 超声处理10分钟滤过滤液蒸干残渣加甲醇1ml使溶解作为供试品溶液。另分别取芦丁和绿原酸对照品加甲醇制成每1ml各含5mg和2mg的溶液作为对照品溶液。再取天山雪莲花对照药材0.5g按供试品溶液制备同法制备作为对照药材溶液。照薄层色谱法附录VI B试验吸取上述四种溶液各3-5μl分别点于同一硅胶G薄层板上以醋酸乙酯-丁酮-甲酸- 2005年版《中国药典》新增品种 天山雪莲花质量标准及起草说明 新疆维吾尔自治区药品检验所起草 2 水10:6:1:2的上层溶液为展开剂 展开取出晾干置紫外光灯254nm下检视。供试品色谱中在与绿原酸对照品和对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点再喷以1亚硝酸钠的1甲醇溶液加热至斑点显色清晰供试品色谱中在与对照品和对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的斑点。 【检查】 水分 不得过12.0附录 ? H 第一法。 总灰分 不得过12.0附录 ? K。 酸不溶性灰分 不得过3.0附录 ? K 。 【浸出物】 照醇溶性浸出物测定法项下的热浸法 附录? A测定用70乙醇作溶剂 不得少于15.0。 【含量测定】 照高效液相色谱法附录? D测定。 色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂以甲醇0.4磷酸38:62为流动相检测波长为340nm 理论板数按芦丁峰计算应不低于8000。 对照品溶液的制备分别精密称取120?减压干燥至恒重的芦丁和绿原酸对照品各适量加50甲醇制成每1m含芦丁80ug、绿原酸60 ug的混合溶液即得。 供试品溶液的制备取本品粉末过3号筛约1g 精密称定置具塞锥型瓶中 精密加入50甲醇50ml称定重量超声处理10分钟放冷再称定重量用50甲醇补足减失重量摇匀滤过取续滤液即得。 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul注入液相色谱仪测定即得。 本品按干燥品计算含芦丁C27H30O16不得少于0.15绿原酸C16H18O9不得少于0.2。 【性味】维吾尔医性质二级湿热。中医微苦温。 【功能与主治】维吾尔医补肾活血强筋骨营养神经调节异常 体液。用于风湿性关节炎关节疼痛肺寒咳嗽肾与小腹冷痛白带过多等。 中医温肾助阳祛风胜湿通经活血。用于风湿性、类风湿性关节炎小腹冷痛月经不调等。 【用法与用量】 3-6g水煎或酒浸服。外用适量。 2005年版《中国药典》新增品种 天山雪莲花质量标准及起草说明 新疆维吾尔自治区药品检验所起草 3 【禁忌】 孕妇忌用。 【贮藏】 置阴凉干燥处。 天山雪莲花质量标准起草说明 【来源】 天山雪莲花为新疆维吾尔自治区特有的传统维吾尔药材有着悠久的民间用药经验。最早收载于阿布?艾里?伊本斯纳《大医典》中1称“夏卡伊克”shakaik“性质二级湿热具养颜排毒与核桃一起研磨涂抹头发可乌发。粉末外敷可愈合伤口和疮痈等”。 清代赵学敏编《本草纲目拾遗》记载“雪荷花形似莲花产伊犁西北及金川亦产巴里坤等处”“其地有天山冬夏积雪雪中有莲以产天山峰顶者为第一”“性大热能补阴益阳” 2等。作为药材标准最早收载与《新疆维吾尔自治区药品标准》1980年版第一册3名称为“雪莲花”功能与主治为通经活血强筋骨促进子宫收缩。用于风湿性关节炎肺寒咳嗽妇女小腹冷痛闭经胎衣不下麻疹不透阳痿。用法与用量为0.6-1.5g水煎或酒浸服。外用适量。《新疆中草药》、《新疆药用植物志》第一册、刘发 刘国钧编《新疆雪莲》、《中国民族药志》第一卷、刘勇民 沙吾提?艾克木编著《维吾尔药志》上册、《新疆维吾尔自治区药品标准》1987年版、茹克娅?沙迪克编《维吾尔医常用药材学》上册、《卫生部药品标准中药材》第一册、《新疆植物志》第五卷均有详细记载。由于雪莲采挖严重数量日渐稀少已列入国家三级保护植物名录。维吾尔医、中医均用雪莲地上部分全株带茎叶苞叶和头状花。综合维吾尔医、中医雪莲性热能祛风胜湿通经活络血暖宫散淤营养神经调节异常体液。用于风湿性关节炎月经不调肾虚腰痛肺寒咳嗽阳痿宫寒腹痛麻疹不透等症。 【名称】新疆产雪莲汉语名称有“雪莲”、“雪莲花”、“雪荷花”、“天山雪莲花”、“大苞雪莲”及“石莲”等之多 但常用“雪莲”和“雪莲花”。维吾尔语称为“塔格来力斯”Tagh leilisi “卡日格里塔格”Karghiltagh阿拉伯语称“夏卡伊克”shakaek柯尔克孜语称为“考克巴西”Kok bash哈萨克语称为“霍加雀普”hoja chop等。虽然新疆产雪莲称“雪莲”文献记载最早 但西藏、青海产水母雪莲、绵头雪莲及雪兔子等多个品种系同科同属不同种也称为“雪莲”。《卫生部药品标准-藏药第一册》1995雪莲花项下列有水母雪莲花Saussurea medusa Maxim 或绵头雪莲花Saussurea laniceps。目前新疆产雪莲现行标准为《卫生部药品标准中药材》1991第一册名称为“天山雪莲花”故暂沿用“天山雪莲花”为标准正名。 【原植物】天山雪莲花为菊科风毛菊属雪莲Saussurea involucrata Kar. et Kir. Sch._Bip.Linnaea。为多年生草本高5-50厘米。根粗壮深褐色根茎密被棕褐 2005年版《中国药典》新增品种 天山雪莲花质量标准及起草说明 新疆维吾尔自治区药品检验所起草 4 色死叶分解的纤维。茎直立粗壮直径2-4厘米中空无毛。叶密集基生叶和茎生叶叶质厚绿色长圆形或卵状长圆形长达14厘米宽2-3厘米先端钝或稍微渐尖基部向下延长半抱茎无柄两面无毛或粗糙被有多数有光泽的腺体沿缘较密下面中脉禾秆黄色明显沿缘有锯齿状的小齿齿端具软骨质的尖最上部叶苞片增宽或膨大通常长超出花序的1倍宽3-7厘米椭圆形或宽椭圆形或近圆形常呈舟状膜质淡黄绿色具多数脉无毛沿缘具较稀疏的齿齿端长渐尖头状花序10-30个生于茎端无梗密集成球状常为增宽的苞叶包被总苞宽种状或半球形。长1-1.2厘米直径约10毫米被稀疏的白色长柔毛总苞片3-4层近等长披针形或长椭圆形长达10毫米宽1.5-3毫米先端急尖常沿上部边缘有稀疏的小齿同时具黑边或整个黑色被白色长毛主要在上半部特别是在顶端较密小花暗紫色长达1.5 厘米细管部长8毫米稍长于增宽的檐部檐部先端5裂至中部裂片线形长3.5毫米。瘦果圆柱形长达6毫米淡褐色具纵棱冠毛2层白色或黄棕色外层刚毛少数短长达5毫米短羽状或糙毛状内层刚毛长羽状长1-1.2厘米。花果期6-8月。 生境 野生于高山冰碛石和流石滩石隙高山草甸悬岩峭壁石缝海拔2400-4100米。 主产地 新疆天山一带的和静巩留特克斯尼勒克库车阜康乌鲁木齐奇台青河可可托海巴里坤塔什库尔干乌恰等县市。国外俄罗斯西伯利亚蒙古哈萨克斯坦吉尔吉斯斯坦天山也有分布。 【采收加工】 开花初期摘取地上部分阴干置纸箱中于干燥处保存。随气候和海拔高度不同采收期略有不同。本品质脆易破碎不宜用麻袋或编织袋包装。 【性状】 按实际收集14批不同产地样品外观性状描述。 本品多为带茎和叶的花头部呈圆球状少部分叶脱落或苞片脱落或球状花苞断碎或管状花败落、羽毛状冠毛飘散。商品药材叶和花的碎片较多。当年货茎淡黄绿色至黄白色叶互生绿色排列密集苞叶淡白绿色至黄白色陈货整个植株呈淡黄棕色至黄棕色叶脱落较多有时可见破碎的花、叶和羽毛状冠毛。茎一般长5-40cm直径0.5-2cm 表面具纵筋棱无毛中空有的可见叶已脱落的残基。 叶质厚无柄完整叶呈卵状长圆形或广披针形长7-22 cm宽1-5 cm主脉明显并具纵棱线主脉两侧各有三条清晰的侧脉主脉基部宽0.4-1.5cm叶两面被柔毛或稀疏边缘有锯齿和缘毛。叶片与苞叶之间有2-3层过渡的半革质半膜质叶片黄白色至淡绿色。苞叶长卵形或卵形中部凹陷呈舟状两面被稀柔毛或无边缘也有锯齿和缘毛膜质半透明。头状花序10-42个密集成球状生于茎顶无梗由数层大形叶状苞叶 2005年版《中国药典》新增品种 天山雪莲花质量标准及起草说明 新疆维吾尔自治区药品检验所起草 5 包围。总苞片3-4层长椭圆形或披针形长0.5-1.5cm宽1-2mm外层多呈紫褐色外表面及顶端被绒毛内层黄绿至棕黄色边缘暴露处紫褐色。花呈管状花冠紫红色花药紫色雌蕊柱头2裂。瘦果圆柱形灰褐色长约5mm 直径1mm具明显纵棱稍弯曲顶部有2层灰白色羽毛状冠毛长0.5-1.5cm。因采集期多为开花初期成熟瘦果少见未成熟瘦果微小或已脱落飘散。鲜货气微香陈货气微味微苦。形状特征测量值见表1。 表 1 样品主要形状特征测定值单位cmn8 编号 产地 茎 叶 苞叶 球状花苞 头状花 长 直径 长 宽 长 宽 直径 朵 1. FK-99 阜康 5-14 0.7-1.0 5-11 1-2.5 4-101.5-4.5 2-6 16-30 2. GL-02 巩留 5-15 1.0-2.0 10-17 1-3 8-184-7 5-9 23-40 3. HJ-02 和静 6-14 0.7-1.2 7.5-171.5-4.5 5-172-6 4-7 14-36 4. KC-02 库车 25-38 1-2 10-17 3-5 9-143.5-7 5-7 12-25 5. HJ-02 和静 2-16 0.6-1.5 11-16 2-3.5 10-183.5-7 4-7 22-38 6. GNS-02 巩乃斯 8-24 0.5-1 10-13 2-3.5 10-144-8 2.5-7 18-34 7.BLK-02 巴里坤 1-8 0.5-1 9-141-2.5 8-173-5 2.5-6 25-34 8. QH-02 青河 18-391-2.5 8-14 2.5-3.5 8-142.5-5 4-9 24-36 9. KKTH-02 可可托海 25-40 2-3 8-14 2-3 10-173-5 5-10 28-40 10. TKS-03 特克斯 11-480.8-2 10-212.5-4.8 8-113.5-6.5 3-5 20-42 11. NLK-03 尼勒克 9-26 0.8-1 7-17 2-4.5 7-133-8 2.5-5 16-32 12. GL-03 巩留 10-22 1-2 8-14 2.5-4 6-12.52.5-8 5-8 16-30 13 .SXG-03 水西沟 14 1.2 ___ 3-7 6-8 4-5 8 18 14. SXG-03 水西沟 13 2 6-103-4 7-84-5 7 16 栽培 平均X 【化学成分】 1黄酮类成分 目前已从雪莲花中分离到芦丁Rutin槲皮素quercetin高车 2005年版《中国药典》新增品种 天山雪莲花质量标准及起草说明 新疆维吾尔自治区药品检验所起草 6 前素hispidulin457-三羟基-36二甲氧基黄酮jaceosidin槲皮素-α-L-鼠李 糖苷柯伊利素柯伊利素-7-葡萄糖苷洋芹素-7-葡萄糖苷木樨草素luteolin 木樨草素-7-葡萄糖苷等11种黄酮类化合物。 2倍半萜内酯类 李瑜等和贾忠建等报道了雪莲花含氢广木香内酯二氢去氢广木香内酯大苞雪 莲内酯involucratolactone 大苞雪莲内酯-8-β-葡萄糖苷 11α13-dihydrodesacylcynaropicrin3α-氢基11β13-二氢去氢广木香内酯3α-OH11β13-dihydrodehydrocostus lactone及它的8位β葡萄糖苷等7个倍半萜类化合物均属愈创内酯型。 3其它 天山雪莲花含倍半萜内酯类生物碱既大苞雪莲碱involucratine还有正丁基-β-D-吡喃果糖苷n-Butly-D-fruetopyranoside紫丁香苷syringin多糖及挥发油等-。 【鉴别及化学成分测定】 陈玉婷等作了天山雪莲花绵头雪莲 S.lanicepa 水母雪莲 S.meduz 和西藏雪莲 S.tridactyla 等4个种粉末显微及薄层色谱天山雪莲花与其它三种区别点是全株不被长绵毛。李伟等用薄层扫描法测定了雪莲中芦丁含量为0.171。1987年版《新疆维吾尔自治区药品标准》采纳了磷钼酸钨—硫酸锂比色法测定雪莲注射液总黄酮的含量其限量为5mg/ml?10并对所含生物碱黄酮类成分进行了试管理化鉴别。苏来曼?哈力克等对雪莲注射液和雪莲口服液采用硝酸铝—亚硝酸钠比色法进行了测定结果总黄酮平均含量分别为3.0mg/ml和1.7mg/ml并增加了芦丁和雪莲药材作对照的薄层色谱鉴别其部颁标准采纳了该方法。朱晨等用比色法测定了野生和种植雪莲总黄酮平均含量分别为3.0和4.4。俞敏倩等用HPLC法测定了雪莲中芦丁和紫丁香苷平均含量分别为0.0704和0.0232. 综上所述从过去二十多年的研究文献资料看目前已从天山雪莲花中提取分离鉴定11种黄酮化合物6种愈创内酯型倍半萜化合物一种倍半萜类生物碱正丁基—β—D—吡喃果糖甙紫丁香甙多糖挥发油等化学成分-。 【鉴别】 1该项为天山雪莲药材粉末显微鉴别。分别取不同产地大小不一而完整雪莲花各8朵研成细粉取少量置载玻片上加透化剂水合氯醛试液或醋酸甘油试液适量加盖玻片置显微镜下观察记录、绘图及拍照即得。 本品粉末黄绿色至黄灰色。气孔为不定式轴长40-50μm短轴20-30μm。非腺毛为多细胞基部细胞类长方形先端细胞较细或扭曲较长40μm-300μm腺毛类棒槌形头部和柄多为2列细胞长50-220μm宽50-60μm。冠毛碎片较多马尾状单细胞分枝众多形状类似单细胞非腺毛长短不一。花粉粒多见球形直径45-68μm外壁有刺状突起具3孔沟。柱头和花柱碎片具绒毛状或刺状突起。导管环纹网纹和梯纹直 2005年版《中国药典》新增品种 天山雪莲花质量标准及起草说明 新疆维吾尔自治区药品检验所起草 7 径15-40μm。纤维呈束类长方形壁稍厚。韧皮纤维类长方形或梭形壁稍厚胞腔大具纹孔。见图1 另偶见分泌细胞腔内充满黄棕色分泌物、石细胞、种皮表皮细胞及淀粉粒等因不易见未列入正文。 叶横切面上表皮细胞椭圆形或类长方形排列整齐外壁稍厚可见腺毛和非腺毛残基叶肉细胞不规则2-6层主脉明显向下凸出上表面梢凹维管双韧型通常为3-7个。叶主脉横切面简图见图2。 2该项为天山雪莲药材的薄层色谱鉴别。采用薄层色谱法以芦丁和绿原酸对照品及天山雪莲花对照药材同时作对照对雪莲花进行了薄层色谱鉴别试验结果色谱斑点清晰稳定专属性强便于识别。置紫外光灯254nm下检视供试品色谱中在与绿原酸对照品和对照药材色谱相应的位置上显淡蓝色的荧光斑点而芦丁荧光不明显如将该色谱板置自然光下放置一段时间芦丁和绿原酸对照品斑点也可显现但喷以1亚硝酸钠的1甲醇溶液后电吹风加热片刻色谱斑点更加清晰。薄层色谱图见图3。 曾取供试品4g用65乙醇40ml加热回流30分钟滤过滤液挥去乙醇残渣用20ml水溶解加水饱和正丁醇提取两次每次40ml正丁醇提取液用水洗涤2次每次50ml弃去水洗液正丁醇液蒸干残渣加甲醇2ml使溶解作为供试品溶液另取芦丁和绿原酸对照品加甲醇制成每1ml各含2mg 和5mg的溶液作为对照品溶液。再取天山雪莲花对照药材4g按供试品溶液制备方法制备作为对照药材 溶液。照薄层色谱法附录VI B试验吸取上述三种溶液各2μl分别点于同一硅胶G薄层板上以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水25402210在5100C放置的下层液为展开剂展开取出晾干喷以10硫酸-乙醇溶液在1050C加热至斑点显色清晰结果芦丁Rf值偏低而绿原酸Rf值更低且斑点不清晰。薄层色谱图见图4。 曾试过的展开剂有醋酸乙酯-甲酸-36醋酸-水5:3:1:1上层醋酸丁酯-甲酸-水7:2.5:2.5上层 醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水5:3:1:1等结果均不十分理想。 在以上试验当中我们新发现天山雪莲花有绿原酸成分且用多种展开剂和不同薄层板均可见绿原酸斑点说明天山雪莲花含绿原酸成分。薄层色谱图见图5至图8。进一步提取、分离和鉴定工作随后进行。 【检查】 杂质 按附录? A规定测定因药用地上部分除有两批带有少量根外其余均未见非药用部位、泥沙及其它异物故未列入正文。 水分 分别取14批供试品适量按附录? H第一法规定测定水分含量结果为7.71-10.36平均值为8.50 n12。暂定水分应不得过12。测定结果见表2。 2005年版《中国药典》新增品种 天山雪莲花质量标准及起草说明 新疆维吾尔自治区药品检验所起草 8 总灰分 分别取12批供试品适量按附录? K规定测定结果总灰分量为8.13-11.92平均值为8.69 n12暂定总灰分应不得过12。测定结果见表2。 酸不溶性灰分 分别取12批供试品适量按附录? K规定测定结果酸不溶性灰分为0.22-2.42平均值为1.19 n12 暂定酸不溶性灰分应不得过3.0。 测定结果见表2。 浸出物测定 天山雪莲花传统服用方法多为水煎或泡酒且雪莲制剂如雪莲注射液、雪莲口服液、复方雪莲蝮蛇酒、雪莲药酒和雪莲灵芝补酒均以稀醇或白酒提取。故选用热浸法分别用70乙醇、甲醇和95乙醇作溶剂取编号FK-99样品适量按附录? A 规定测定浸出率结果分别为20.8815.3212.68故选用热浸法以70乙醇作提取溶剂。分别取12批供试品适量按上述规定测定浸出物结果为17.44-31.38平均值为23.87 n14暂定浸出物应不得少于15.0。测定结果见表2。 表2 样品水分、总灰分、酸不溶性灰分及浸出物测定结果n2 编号 水分 总灰分 酸不溶性灰分 70乙醇浸出物 1. FK-99 7.97 11.92 2.42 20.88 2. GL-02 8.44 8.67 0.66 26.17 3. HJ-02 9.29 9.89 1.01 26.68 4. KC-02 7.71 10.03 1.24 17.44 5. HJ-02 10.36 9.57 0.22 21.70 6. GNS-02 8.24 8.79 0.79 28.51 7.BLK-02 8.20 8.13 0.68 31.38 8. QH-02 7.84 9.00 0.79 23.22 .