大豆异黄酮的提取

大豆异黄酮的提取 课题:大豆异黄酮的提取 一、实验目的: 通过单因素试验及正交试验, 就大豆异黄酮的提取工艺条件进行优化,找出最佳的工艺参数。 二、实验材料与: 1.1 实验材料:大豆、正己烷、乙醇、标准大豆异黄酮 1.2 实验方法: 1.2.1 材料预处理:取样, 蒸馏水净化、吸干, 105? 烘箱中杀青15~20min, 于80? 烘箱烘干至恒重。粉碎,备用。 1.2.2 大豆异黄酮的提取流程及方法: (1)准确称取大豆粉, 按W:V=1:1取正己烷脱脂，于65? 恒温水浴锅中水浴搅拌15min, 布氏漏斗过滤2次, 弃滤液, 滤渣105?烘烤2h, 室温称恒重。脱脂2次, 干燥备用。 (2)取豆粉, 按照一定的料液比加入一定浓度的乙醇醇提, 置一定温度恒温水浴摇床中振荡浸提一定时间。2000r/min离心10min, 上清液保留, 沉淀物置于60?烘箱干燥至恒重为止。沉淀物按上述方法浸提一定的次数，合并2次提取液。 (3)提取液置于60?恒温水浴锅中蒸发浓缩, 至50mL。 1.2.3 单因素试验设计 以大豆异黄酮的提取率为评价指标, 采用乙醇热浸提法提取大豆异黄酮。本研究以提取过程中的乙醇浓度、料液比(W:V)、提取温度、提取时间、提取次数5个可能影响提取效果的因素展开单因素试验(见1), 以确定相关影响因素及各因素的水平。在单因素试验结果的基础上, 确定正交试验的因素与水平, 优化出大豆异黄酮提取的最佳工艺条件。 表一 大豆异黄酮提取的单因素及水平 41.2.4 根据单因素试验结果采用L9( 3)进行正交试验,以优化提取工艺。 1.2.5 大豆异黄酮的测定 (1) 标准曲线的制作:准确称取标准大豆异黄酮1mg,用95%的乙醇定容至100ml,即标准液。分别准确移取标准液2,3,4,5,6,7ml 于10ml具塞比色管中, 加95%的乙醇至10ml 后在261nm处测定其吸光值，得到的大豆异黄酮标准曲线方程。 (2) 样品液中大豆异黄酮含量的测定:取一定量样品液直接在261nm处测定其吸光值, 计算异黄酮浓度，再计算异黄酮的提取率。 三、实验结果与