【doc】不同产地红花的矿质元素及羟基红花黄色素A含量分析

【doc】不同产地红花的矿质元素及羟基红花黄色素A含量 不同产地红花的矿质元素及羟基红花黄色 素A含量分析 安徽农业科学.Journal0fAnhuiAgri.Sci.2OO9.37(12):5488—5489.5491责任编辑金琼琼责任校对况玲玲 不同产地红花的矿质元素及羟基红花黄色素A含量分析 谭勇,李国玉,成玉怀,刘中垒,卢杨波(新疆特种植物药资源重点实验室,石河子大学药学院,新疆石河子832oo2) 摘要[目的]提高中药材红花的质量,为红花的质量控制和品质评价提供基础资料和理论依据.[方法]利用原子吸收分光光度法测 定新疆红花中6种重金属和5种微量元素的含量,运用高效液相色谱法测定其羟基红花黄色素A的含量.[结果]l6l团的红花绒的Mg 含量达5080.O0rw./kg,红旗农场的红花绒的Mg含量为5.62nag/kg,相差902.9倍.16l团的红花绒的Fe含量比红旗农场的高3.6倍. 两个产地的红花绒的含量很接近,仅相差0.30me-/k.红旗农场的红花绒的Pb和As含量仅是16l团的17.9%和61.4%.两个产地 的红花绒的?含量仅相差0.0(303l【g.161团的红花绒样品的羟基红花黄色素A的含量为1.95%,红旗农场红花绒样品的羟基红花 黄色素A的含量为2.C【2%.[结论]红旗农场和161团生产的红花的重金属含量和羟基红花黄色素A的含量均符合国家. 关键词红花;微量元素;重金属;羟基红花黄色素A;原子吸收分光光度法 中图分类号$567.239文献标识码A文章编号0517—66l1(2009)12—05488—02 AnalysisOntheCont~atsof1Wlcroelm~tsandHeavyMetalElementsandrlyaroxySllmowe rYellowAinCart/ramst/nctor/usfromDitt'erent Pr0dIlcAreas TANYongetal(1<eyLaboratoryforSpecialPlantDrug删地 esofXinjiang,PhamaaeeuticalCollege,ShiheziUniversity,Shihezi,Xinjiang832002) AbstractIObjectiveJ1heaimwastoenhancethequalityofChirlesedrugCarthamust/nctor/u sandsupplybasicdataandtheoreticalfoundationforits qualitycontrolandevaluation. 【MethodJThecontentsof6heavymetalsand5microelementsinXinjiangC.t/nctor/usweredeterminedbyatomicabsorp? tiolispeetrophotometryanditscontentofhyaroxy8amOWC~yellowAwasdeterminedbyhighperfom~celiquidchromatography.[Result]1hecontentof ?inC.t咄 cashmerefromGroup161,vasupto5080.O0mr/kg,thatinC.tinctoriusccashmerefromHong~farmwas5.62me/kgandt}lef_0r— lnerwas9.9timesoftheLatter.I1lecontentofFeinC.t/nctor/uscashmerefromGroup161was3.6timeshigherthanthatinC.t/nctor/uscashmere fromnongqifarm.nlecontentsofZninC.t/nctor/uscashmeresfromthe2producingareaswereverycolseandtheirdifferencewasonly0.3he,/kg.1he contentsofPbandasinC.t/nctor/usccashmerefromHongqifarmW'dt8only17.9%and61.4%ofthatinC.t/nctor/uscashmerefromGroup161.nle contentdifferenceofriginC.t/nctor/uscashmeresfromthe2producingareasWasonly0.00o3he,/kg.econtentofhydroxy8amowcryellowAinC. t/nctor/uscasl1meIesamplenGroup161was1.95%andthatinC.tz)Tctor/uscashmeresamplefromHongqifarmwas2.02%.【ConclusionjBoththe contentsofhea~ymetalsandhy~xys8珏 kyellowAinC.t/nctor/usproducedfromHongqifarmandGroup161accoidedwithnationalsk?KlaId. KeywordsCart/um~t/nctor/usL.;Microelernents;Heavymetals;nydroxysl~oweryellowA;Atomicabsorptionspectrophotometry 红花为菊科植物红花(Carthan~tinctor/usL.)的干燥管 状花.红花花绒主要活性成分为羟基红花黄色素A和山萘 素等,红花性辛,温,活血通经,散瘀止痛,用于治疗经闭,痛 经,跌打损伤等病症_lJ.中药材中所含的微量元素对人体所 缺乏的各种微量元素起到重要的补充与调节作用_2-3j.而 重金属对人体的新陈代谢及正常的生理作用具有明显的伤 害作用,并抑制人正常生理作用的发挥;同时,人体内重金属 含量过量会导致各种疾病的发生_4J.羟基红花黄色素A(hv. droxysaffloryellowA)是具有单查尔酮苷类结构的化合物,是红 花药理功效的最有效水溶性部位,可抑制血小板激活因子诱 发的血小板聚集与释放,是红花黄色素活血化瘀的主要有效 成分[一. 为了提高红花中药材的质量,笔者利用原子吸收分光光 谱法测定了新疆红花中6种重金属和5种微量元素的含量, 并运用高效液相色谱法测定了羟基红花黄色素A的含量,为 红花的质量控制和品质评价提供基础资料和理论依据. 1材料与方法 1.1材料红花绒样品于2OO7年分别采自新疆生产建设兵 团农九师161团和农六师红旗农场,红花品种为裕民无刺. 铅,镉,砷,汞,铜各元素标准溶液,由国家标准物质研究中心 提供;硝酸,高氯酸均为高纯试剂,甲醇,乙腈均为色谱纯,盐 酸,硫酸,磷酸二氢铵,硝酸镁为优级纯,碘化钾,抗坏血酸, 磷酸,盐酸羟胺为分析纯,水为超纯水.羟基红花黄色素A 对照品由国家药品生物制品检定所购人,其他试剂均为分析 基金项目国家"十一五"科技支撑计划(2006BAIO6A15.14). 作者简介谭勇(1976一),男,重庆人,博士,硕士生导师,副教授,从 事药用植物资源及天然产物化学研究.*通讯作者,高级 实验师,E-mail:chengyuhuai-1952@163.conl. 收稿日期2009-02-03 纯.主要仪器有原子吸收分光光度计(Et立180-80偏振塞 曼);消解仪(CEM公司的l~Iars5);超声提取仪(上海);电热板 (上海威龙);高效液相色谱仪(日本岛津LC.20AT);CBM.20A 型色谱工作站.. 1.2方法 1.2.1红花供试溶液的制备.称取红花绒样品0.5g,采用 微波消解法,加硝酸5rnl,在功率600w下,等温度升至100 ?,保持5rain;然后功率1200w,温度升至180oC,保持l4 min.消解完毕后,置电热板上于130?以下缓缓加热,至红 棕色蒸气挥尽,并继续浓缩至约2rnl,放冷,转移至25Tnl量 瓶中,用水稀释至刻度,即得供试品溶液. 1.2.2红花矿质量元素含量测定.按照原子吸收分光光度 计仪器工作条件测定空白,标准系列工作溶液和样品溶液. 用火焰原子吸收法测定样品中的ca,Mg,Mn,sn,Cu,Zn.Fe和 对应的空白浓度,用石墨炉原子吸收法测定Cr,Pb和对应的 空白浓度,用氢化物原子吸收法测定As和对应的空白浓度, 用冷原子吸收法测定Hg和对应的空白浓度.以吸光度A对 浓度c(rn1)作一元线性回归,扣除空白值后,求出样品中 各重金属及微量元素的含量. 1.2.3羟基红花黄色素A试验溶液的制备.羟基红花黄色 素A供试品溶液的制备:精密称取红花绒样品0.4g,置具塞 锥形瓶中,精密加25%甲醇5ornl,称定重量,超声处理40 min,放冷,再称定重量,用25%甲醇补足重量,摇匀过滤,取 续滤液,即得测试样品.羟基红花黄色素A对照品溶液的制 备:取红花羟基黄色素A对照品适量,精密称量,加25%甲醇 溶解,并定量稀释制成含量为0.13me=/~的溶液.吸取羟基 红花黄色素A对照品储备液适量,置l0Tnl量瓶中,加水稀释 至刻度,配制成质量浓度分别为0.04,0.08,016,0.24,0.32, 37卷12期谭勇等不同产地红花的矿质元素及羟基红花黄色素A含量分析5489 0.40L的对照品溶液.以样品质量浓度(L)为横坐标 ,回归方程为Y=2E+0.6X一37288.0,R=1. 1.2.4羟基红花黄色素A含量测定.红花羟基黄色素A样 品测定:按23O5版《药典(一部)》的方法进行测定,以甲醇: 乙腈:0.7%的磷酸水溶液(26:2:72)的流动相,分别吸取上述对 照品溶液和样品溶液各1O,注入液相色谱仪,在403nlrl波长 处,测定羟基红花黄色素A的峰面积,按外标法计算其含量. 2结果与分析 2.1红花矿质元素含量测定结果由表1可见,所测定的 红花绒中均含有ca,?,Fe,Mn,Z力等微量元素,而且其含量 都很高,尤其是Ca,Mg和Fe的含量较高,不同产地的红花中 微量元素的含量有所不同.产于161团的红花绒中的微量 元素普遍要比红旗农场产的红花中微量元素含量高,其中 Mg,Fe和Mn的含量差别很大,161团的红花绒中的Mg含量 达到了5080.00mg/ks,而红旗农场的红花中?的含量才 .表1红花中微量元素的含量检测结果 嘞Ie1I)elediolirmml~0fn~erodementcontentinCarthanms flh船L.mg/kg 5.62mg/kg,前者是后者的903.9倍,16l团的Fe的含量也比 宅? 耍 三 恒 母 时间Time?min 红旗农场的高3.6倍;Zn和ca的差别较小,Zn的含量在两个 产地的红花绒中很接近,相差仅0.30mg/kg. 从表2可以看出,所测定两个产地的红花绒中都有少量 的重金属Pb,?,As,cr,sn,cu的存在,但其含量都很低,尤 其是Hg和的含量较低,都小于0.10mg/kg.两个产地的 红花绒中的重金属的含量有所差别,其中Pb,As和Cu的差 别最大,红旗农场的Pb含量仅是161团的17.9%,红旗农场 的As含量也仅是161团的61.4%;Hg,Cr,Sn的含量差别较 小,两个产地红花绒的}Ig含量差别仅0.0003me,/kg.参照 我国《药用植物及制剂进出口绿色行业标准》,产于161团和 红旗农场的红花绒中的重金属含量都低于限量指标. 表2红花中重金属的含量检测结果 1hbIe2I)etl~onresul~0fheavymetalIIk 3—12素检测依据标准要求篁lOl曩类素秋儿岬团狄,,帅乳蜞功n吼 ecti0nstal1daId ~ements ... Group1610fH删羽ifarm0f NiuAmlvN州iuAmly 2.2羟基红花黄色素A含量测定结果由图l经过峰面积 计算出,两处产地红花绒的羟基红花黄色素A的含量,其中161 团红花绒样品羟基红花黄色素A含量为1.95%,红旗农场红花绒 样品羟基红花黄色素A含量为2.%.由此看出,红旗农场的红 花绒中的羟基红花黄色素A含量和161团的含量差异不大. b.样品Testsadie . 誉 . 2.55.07.51nO12.515.017.520.0 时间Time?min 图1羟基红花黄色素A标准品与样品高效液相色谱图 ng.1ItPLCg憎pl10fhydroxylyellowAstandards哪eandtests明叩Ie 3讨论 中药中微量元素在防治疾病,保健养生等方面都起了重 要的作用J.红花中微量元素含量与红花的药用价值密切 相关.该试验中两处产地红花中的微量元素含量有差异,如 ?的含量农九师161团红花要比农六师红旗农场的高近900 倍,Fe的含量也相差近4倍.如ca,Mg,Mn<Zn等都是人体所 必需的微量元素,若单从微量元素含量方面来评价红花质 量,则161团的红花绒质量较高. 目前,人们对中药重金属残留问题越来越重视,并逐步 规定各种中药中重金属含量的限量标准.中药材中的有害 重金属含量主要决定于其生长环境和药材的种类.近年 来我国中药材受到有害重金属元素的严重污染,造成中药材 质量下降.现代科学已证明,重金属残留能够进入人体并与 酶蛋白牢固结合,导致组织细胞出现结构和功能上的损 害_】.如锰污染会引起肺炎和其他疾病;铅对成人神经系 统,消化系统及心血管系统都有损害;铜过剩可使血红蛋白 变性l12;铬对人体的毒害为全身性的lJ.我国《药用植物及 制剂进出口绿色行业标准》限量指标:重金属总量应?20.0 mg/kg,铅(Pb)?5.0mg/kg,镉(Cd)?0.3mg/,汞(ng)? 0.2mg/kg,铜(Cu)?20.0mg/~g,砷(As)?2.0mg/~g.该试 验所测定的两处红花中的重金属含量有所差别,但均符合我 国《药用植物及制剂进出口绿色行业标准》的规定. 羟基红花黄色素A是红花黄色素中含量较高的成分,具 (下转第5491页) 啪0 flvlUf『?日酱旧 37卷12期代春初等灯台树不同部位主要药用组分的研究5491 树果实6份,每份0.05g,分别加入熊果酸对照品溶液,按样 品测定方法测定.按公式:回收率=(测出总量一熊果酸含 量)/熊果酸加入量×100%计算回收率. (9)样品含量测定.精密吸取对照品溶液与供试品溶液 各1O,分别注入液相色谱仪中,依上述色谱条件测定峰面 积,按外标法计算含量. 2结果与分析 2.1TLC定性鉴别结果灯台树果实4个斑点,叶10个斑 点,茎皮l1个斑点,在与熊果酸对照品相同的位置处,三者 均显示与熊果酸颜色一致的不同大小斑点,说明均不同程度 含有熊果酸. 2.2线性关系考察结果峰面积测定结果依次为:255645, 523790,808307,105446,1366734,1616744,1894117.以对 照品进样量为横坐标,峰面积为纵坐标,得熊果酸的标准曲 线方程:Y=651597X一20852,r=0.9998.表明熊果酸在 0.42—2.94rng范围内线性关系良好. 2.3精密度实验结果峰面积测定结果依次为:654416, 655281,673760,686172,676323,668l18,平均值为66901. RSD为1.80%.精密度良好. 2.4稳定性实验结果峰面积测定结果依次为:1212195, 2236492,1257436,1260083,1263649,平均值为1245971, RSD为1.74%.样品在8h内稳定. 2.5重现性实验结果峰面积测定依次为:l094814, 1118145,l120351,1139066,1140984,1137361,平均值为 1125120.RSD为1.58%.重现性良好. 2.6加样回收率实验结果测定结果见表1,回收率符合要求. 表1熊果酸加样回收率实验结果 ble1'hierecoveryr'esullsoflilacadd 2.7样品含量测定结果灯台树茎皮,叶和果实的熊果酸 含量分别为1.768%,1.710%和0.227%. 3结论与讨论 (1)灯台树不同部位经化学定性实验分析均含有三萜类 皂苷,鞣质等.TIE定性分析表明,在同一条件下,叶,茎皮 所含化学组分比果实更丰富,且与熊果酸相关的组分多而明 显,有进一步研究的价值. (2)佤族人用灯台树做止血,消肿药物与其含有丰富的 熊果酸有直接关系;止血功效与含有鞣质相关. (3)灯台树不同部位含熊果酸为:茎皮(1.768%)>叶 (上接第5489页) 有重要的药用价值】引.笔者通过HPLC检测不同产地红花 中羟基红花黄色素A的含量,161团和红旗农场生产的红花 中羟基红花黄色素A含量都高出我国2005年版《药典》所规 定的标准(1%),研究表明,两地红花药材质量均符合《药典》 标准.总之,要实现我国中药材红花的国际化,必须要严格 控制红花中的重金属含量,不断提高药材微量元素含量以及 羟基红花黄色素A含量,这样才会有利于新疆红花的GAP 基地建设和产业化发展,才能不断提高我国中药材的质量和 在国际市场的竞争力. 参考文献 [1]国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].北京:化学工业出版社, 2OO5:l0B一104. [2]曹继华.中药微量元素与健康[J].广东微量元素科学,1999(10):10. [3]丛涛,赵霖.微量元素锌铜铁硒锰的检测及临床营养学意义[J].微量 元素与健康研究,2O136,23(6):59—61. [4]张俊清.中药材微量元素及重金属研究的意义与方法[J].中国野生植 (1.710%)>果实(0.227%);茎皮与叶均可作为熊果酸提取 物的资源加以利用,尤其是大面积栽培和作为园林植物修剪 枝(茎皮),叶时应考虑综合利用. (4)灯台树果实富含油脂I4J,经实验测定,其挥发油含量 少,其他脂类组分有待于进一步研究. 参考文献. [1]中国药材公司.中国中药资源志要[M].北京:科学出版社,1994:827. [2]张嘉伦.灯台树栽培技术[J].甘肃农业,2O08(8):80—81. [3]李眉慧,朱先成.勐腊县一万亩灯台树示范林建设[J].林业建设, 2007,15(2):65—68. [4]中国科学院植物研究所.中国高等植物图鉴:第2册[M].北京:科学出 版社,1991:1100. 物资源,2OO2,21(3):铝,49. [5]李中原,涂秀华.红花黄色素的药理研究进展[J].中药新药与临床药 理,20O5,16(2):153—156. [6]杨志福,梅其柄,蒋永培.红花有效成分及药理作用[J].西北药学杂 志,2001,16(3):131—133. [7]金红宇,田金改,林瑞超,等.原子吸收分光光度法测定中药中部分重 金属及有害元素的含量[J].中国药品标准,2005,6(4):14—17. 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