试纸法测定红细胞葡萄糖—6—磷酸脱氢酶活性
试纸法测定红细胞葡萄糖—6—磷酸脱氢酶
活性 弓.岳
J.I】frIalofClinicalLa~ratoryScience,20O0,.18,No.5
文章编号:1001.764X(20?)05.03061 .//3
试纸法测定红细胞葡萄糖一6.磷酸脱氢酶活性 林青,唐文吟,张桂芬(泉州市儿童医院,妇幼保健院检验科,福建泉州362f~0)
关键词:藿茧盏查堡璧照塾壁;高铁血虹蛋白还原试验 兰塑堕?或鸣
中围分类号:P,331.14l:Q55'文棘标识码:B
国内大多数基层医院常采用高铁血红蛋白还原试验, 作为红细胞葡萄糖磷酸脱氢酶(C,-6-PD)缺乏的过筛试 验.该法操作较复杂,时问长.用血量多,结果不稳定, 且假阳性率较高.而准确性较高的四氮唑蓝定量法_]和荧 光斑点法,操作复杂,技术要求高,多数医院难以推广. 我院采用G-6-PD试纸法0J,取得了满意结果.现报道如 下.
1材料和
1.1检测对象1995年3月一1999年7月在我院住院的疑 为溶血性贫血的患儿222例,其中新生儿黄疸148侧,重度' 贫血患儿25例,急性溶血性贫血49例.男性1.53例,女性 69例.年龄最小2天,最大12岁.其中2天一1岁33例, 占149%;1岁一6岁159例,占71.6%;6岁一11岁30 例,占13.5%.
1.2材料C,-6-PD试纸.由广西医科大学科技开发中心提 供.
1.3方法
1.3.1测定原理红细胞葡萄糖'磷酸脱氢酶(Cr'6-PD) 反应脱下的H能使四唑衍生物显色.显色的深度与酶活性 成正比,与
色板比较就能对酶活性半定量.其反应方 式如下:
G-6-P+NADP+C-6-PD
~6.p.G+NADPH+H+
NADPH+H+四唑盐衍生物——;;2性而定)
G-6-P为葡萄糖岳磷酸;G-6-PD为葡萄糖岳磷酸脱氢酶; 6-P-G为6磷酸葡萄糖酸
I.322操作步骤稀释液配制:将试剂倒人干净的小瓶 内.加蒸馏水20mI溶解.将干燥试管(每份试纸用一支) 插人"?的水箱中,另取干净试管1支,加100稀释液 于管底.同时取受检者指血l0加人试管内,制成1:10血 液,摇匀.静置2nfin.贫血者取指血量视贫血程度按比例 增加.取试纸1条,将其药膜面与溶血液接触2rain;用嗳 纸吸去多余的血液,立即投人已预热的试管内,置人36.5 ?0.5?恒温箱,10min取出,并立即浸人清水中,时间不 少于5min,洗去残余血红蛋白.与标准色板进行比较,可 读出受检者C-6-PD活性.同时每个受检者抽取静咏血做四 氨唑蓝定量法和高铁血红蛋白还原试验法做对照. 2结果
G-6-PD试纸法及Mct.Hb-RT法与四氮唑蓝定量法的比较 (见表i):
表1C-6-PD试纸法及高铁血红蛋白还原试验法与四 氮唑蓝定量法的比较
四氨唑蓝定量法!苎苎苎苎旦垩苎竺
(标准】正常中度蚨乏显着缺乏正常中度缺乏显着缺乏 l38120
0162
0054
根据表1数值计算出试纸法的总符合率为986%,比 高铁血红蛋白还原试验法的总符合率(93.7%)高约5个百 分点.试纸法的假阳性率(135%)亦较高铁血红蛋白还 原试验法(6.3%)低约5个百分点:
G..6-PD试纸法是一种简便,快速,可靠的检验方法, 并适合在广大基层医院推广应用.本组病儿出现3例假阳 性,可能原因是未按贫血的程度增加取血量,或用调整好 压积的抗凝血来做.我们认为,严格按受检者的血红蛋白 含量与取指血量比值来取血,并且在检滑I结果与临床表现 不相符时,在适当时问内重复实验,可以提高诊断的准确 性
(本文承南京军区福州总医院橙验科朱忠勇主任审阅,谨此 致谢I)
参考文献:
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(1999-11-收稿,2000-06-1I修回,
(陈军编发)
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