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【精品文档】C-ERBB-2基因在乳腺浸润性导管癌及腋窝转移淋巴结中的达相关性分析临床医学_医药学论文_10471 论文范文 题目:c-erbB-2基因在乳腺浸润性导管癌及腋窝转移淋巴结中的表达相关性分析临 床医学论文_医药学论文 编辑:小小 作者:王晔 宋科瑛 王建丰 仇生龙 项富海 李克 【摘要】 目的:探讨乳腺浸润性导管癌中c-erbB-2的表达及其与腋窝淋巴结等临床病理因素的相关性。方法:采用免疫组织化学方法检测149例乳腺浸润性导管癌患者乳腺原发灶及47例腋淋巴结转移灶中c-erbB-2的表达～结合临床病理因素～分析其相关性。结果:19.46%(29/149)原发灶c-erbB-2高表达～其表达水平与肿瘤大小、腋窝淋巴结转移情况呈正相关～与ER、PR表达呈负相关。47例腋窝淋巴结转移乳腺浸润性导管癌患者中～原发灶c-erbB-2高表达18例(38.30%)～腋窝淋巴结转移灶c-erbB-2高表达16例(34.04%)～两者差异无统计学意义(P>0.05)。5例原发灶c-erbB-2阴性或低表达患者腋窝淋巴结转移呈高表达～7例原发灶c-erbB-2高表达患者淋巴结转移呈阴性或低表达～变化率为 25.53%(12/47)。结论: c-erbB-2可以作为预测乳腺癌预后的指标～指导术后治疗～但应当考虑c-erbB-2在原发灶和复发转移灶之间的差异～有必要对复发转移灶进行c-erbB-2检测。 【关键词】 乳腺肿瘤?癌基因～c-erbB-2?肿瘤转移 【ABSTRACT】 Objective:To observe the expression of c- erbB-2 and its relationship with clinical and pathological characteristics in infiltrating ductal breast cancer. Methods: Immunohistochemical technique was performed to detect the expression of oncogene c-erbB-2 in 149 cases of primary carcinoma and 47 cases of synchronous metastatic lymph node. Their clinical and pathological indices and follow up data were analyzed. Results: The overexpression rate of c-erbB-2 was 19.46%(29/149). The expression of c-erbB-2 was significantly correlated with the tumor size, the expression of ER and PR and lymph node metastasis (P<0.05), but not with the age (P>0.05). 12 of 47 cases (25.53%) showed a discordance of c-erbB-2 status between primary carcinoma and synchronous lymph node metastases. Conclusion:The expression of c-erbB-2 gene is positively correlated with tumor invasion ,axillary lymphatic metastasis and negatively correlated with the expression of ER and PR in breast cancer. c-erbB-2 can be used as an independent molecular marker for determining the prognosis and planning the postoperative treatment. For the treatment of metastatic patients, the evaluation of c-erbB-2 status should be performed in neoplastic tissue from metastatic site, whenever possible. 【KEY WORDS】 Breast Neoplasms?Oncogene,c-erbB- 2?Neoplasm metastasis 乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一～近年来其发病率不断上 升～其死亡原因大都是远处转移。c-erbB-2基因是人类表皮生长因 子受体(epidermal growth factor receptor～EGFR)家族的第2个 成员～在20%，30%的乳腺癌中高表达～与乳腺癌的侵袭转移及预后 密切相关。本研究通过检测乳腺浸润性导管癌原发灶组织及腋窝转 移淋巴结中c-erbB-2的表达～结合临床和病理学资料～分析c- erbB-2基因与乳腺癌临床病理因素的关系～探讨c-erbB-2与乳腺 癌淋巴结转移的相关性～评价其对乳腺癌预后判断及临床治疗的指 导意义。 1 资料与方法 1.1 一般资料 收集我院2005年1月—2006年12月行手术 治疗的乳腺癌患者的病例资料～共149例～均为女性。年龄33，84 岁～中位年龄53岁。术前均未行任何新辅助治疗～术后病理组织学确诊为乳腺浸润性导管癌。其中伴有?1个腋窝淋巴结转移者66例～无腋窝淋巴结转移者83例。 1.2 方法 自乳腺癌原发灶(149例)和腋窝淋巴结转移灶(47例)取组织标本～石蜡包埋～制备4μm厚连续切片。采用免疫组织 -erbB-2化学EnVision二步法检测原发灶及腋窝淋巴结转移灶中c的表达,及原发灶中ER、PR的表达。试剂购自上海长岛公司及福州迈新公司。所有切片在光学显微镜下进行观察～由专业病理医师读片。 1.3 判定 c-erbB-2阳性表达为细胞膜呈清晰的棕色染色。参考FDA推荐的Hercep Test的标准:无肿瘤细胞染色,或有细胞膜染色的肿瘤细胞?10%为“-”;>10%的肿瘤细胞胞膜弱染色,但染色间断分布,未环绕胞膜为“+”;>10%的肿瘤细胞胞膜弱到中等程度染色,染色连续,环绕整个胞膜为“++”;>10%的肿瘤细胞胞膜强染色,染色连续,环绕整个胞膜为“+++”。根据FDA推荐的免疫组织化学判断标准～高表达者(“+++”)与荧光原位杂交检测所显示的基因扩增结果高度对应～对临床治疗有指导意义～故本研究主要关注c-erbB-2的高表达情况～结果统计时～将其分为c-erbB-2的高表达组(“+++”)和非高表达组(“-”和“+，++”)。ER、PR阳性表达为细胞核着色～按阳性肿瘤细胞的百分率判定, <10%为“-”, 10% ，25%为“+”, 25% ，75%为“++”, > 75%为“+++”,将“-”者记为阴性～“+”以上者记为阳性。 1.4 统计学处理 所获数据应用SPSS15.0统计学软件进行处理～采用四格表和行×列表卡方检验进行结果分析。P?0.05为差异有统计学意义。 2 结果 2.1 c-erbB-2在肿瘤原发灶中的表达 149例原发灶标本中c-erbB-2高表达29例(19.46%)。c-erbB-2表达水平与患者是否绝经无关～但与肿瘤大小有关(P<0.05～表1)。肿瘤直径?2 cm者c-erbB-2高表达率为6.67%(4/60)～肿瘤直径>2 cm者c-erbB-2高表达率为28.09%(25/89)。 2.2 c-erbB-2与ER、PR表达的关系 31.54%(47/149)的乳腺癌患者ER、PR均阳性～其中c-erbB-2高表达5例;43.62%(65/149) 的乳腺癌患者ER、PR均阴性～其中c-erbB-2高表达20例;24.83%(37/149)的乳腺癌患者ER或PR阳性～其中c-erbB-2高表达4例。ER、PR均阴性者中～c-erbB-2高表达率(43.62%)显著高于ER、PR均阳性者(10.64%)和ER或PR阳性者(24.83%～P<0.05～见表1)。 2.3 c-erbB-2的表达与淋巴结转移的关系 149例患者中腋窝淋巴结转移者66例,其中c-erbB-2高表达19例;腋窝淋巴结无转移者83例～其中c-erbB-2高表达10例。腋窝淋巴结转移者c-erbB-2高表达率(28.79%)明显高于腋窝淋巴结无转移者(12.05%～ 。随着淋巴结转移数量的增加～c-erbB-2高表达率P<0.05～见表1) 逐渐增高(χ2=13.176～P=0.003～表2)。 2.4 原发灶及腋窝淋巴结转移灶中c-erbB-2的表达 47例肿瘤原发灶及相应腋窝淋巴结转移灶中c-erbB-2表达差异有统计学意义(χ2=16.624～P=0.001,表3);其中～原发灶c-erbB-2高表达率为38.30%(18/47～图1)～腋窝淋巴结转移灶c-erbB-2高表达率为34.04%(16/47～图2)～两者高表达率差异无统计学意义(χ2=0.184～P=0.668)。28例原发灶及腋窝淋巴结转移灶中c-erbB-2表达没有变化。5例原发灶c-erbB-2为阴性或低表达而转移淋巴结为高表达～7例原发灶c-erbB-2高表达而腋窝淋巴结转移灶为阴性或低表达～其变化率为25.53%(12/47)。 3 讨论 c-erbB-2癌基因又称neu或HER-2, 是乳腺癌常用的基因标志物之一～在10%，34%的乳腺癌病例中高表达～中国女性乳腺癌患者c-erbB-2的平均阳性表达率为50%。 c-erbB-2基因编码一种具有酪氨酸激酶活性的跨膜糖蛋白～相对分子质量为185×103～通过与EGFR家族中其他3个成员构成异源二聚体～与配体结合后～使细胞内酪氨酸激酶的蛋白活化～发生酪氨酸自身的磷酸化～并磷酸化其他底物～引起下游的信号转导～导致细胞的增殖乃至癌变。c-erbB-2基因扩增使肿瘤细胞分化程度差～易扩散、转移～致使乳腺癌术后复发～总生存率低～与乳腺癌预后相关[4]。Jukkola等[5]研究650例乳腺癌患者c-erbB-2的表达与预后的关系发现～c-erbB-2的高表达与腋窝淋巴结阳性、肿瘤直径>3 cm、组织学低分化、ER和PR阴性以及总体生存率低等因素密切相关。本研究中149例患者c-erbB-2蛋白的高表达率为 19.46%～肿瘤直径>2 cm者、有淋巴结转移者、ER和PR均阴性者的c-erbB-2高表达率高于肿瘤直径?2 cm者、无淋巴结转移者、ER和/或PR阳性者～与文献报道一致。 淋巴结有无肿瘤转移是判断乳腺癌预后的重要指标之一。c-erbB-2癌基因阳性表达与乳腺癌淋巴结转移相关[6]。Mittra等[7] -erbB-2表达不仅与淋巴结转移显著相关～而且与淋巴结转移认为c 数目相关。本研究149例患者中腋窝淋巴结转移者66例,其中c-erbB-2高表达19例～其高表达率明显高于腋窝淋巴结无转移者;根 -据腋窝淋巴结转移数量分组～发现随着淋巴结转移数量的增加～cerbB-2高表达率逐渐增高。因此推测对于乳腺癌腋窝淋巴结转移患者～c-erbB-2高表达是预后不良的指标。在原发灶c-erbB-2阳性而淋巴结无转移者中的预后价值还存在争议[8]～有学者认为应该将其作为危险因素指标～给予标准的辅助化疗[9]。 目前针对c-erbB-2蛋白的靶向性治疗的最主要方法为单克隆抗体～Herceptin是一种新型高效的分子靶向治疗药物[10]～其主要机制可能包括:与c-erbB-2蛋白受体结合,抑制细胞生长信号转导通路;加速c-erbB-2蛋白受体降解,使其表达下调,抑制乳腺癌细胞的生长;通过对人肿瘤细胞株介导抗体依赖细胞毒作用(antibody dependent cellular cytotoxicity～ADCC)～增强免疫细胞攻击和杀伤肿瘤靶细胞;抑制血管内皮生长因子的生成, 阻断肿瘤内血管组织的生长;诱导肿瘤细胞的凋亡等。Herceptin用于转移性乳腺癌c-erbB-2高表达者～可提高肿瘤缓解率,延长疾病进展时间(time to progression～TTP)～与多西紫杉醇联合作为一线用药～更可延长总体生存时间和提高总有效率～对于晚期复发的c-erbB-2高表达患者疗效得到肯定。多项临床试验将Herceptin与不同剂量的各种化疗药物联合治疗c-erbB-2阳性乳腺癌患者～结果获得较高的总反应率(ORR)、临床完全缓解率(cCR)和病理完全缓解率(pCR)～其中pCR达到12%，42%[11-12]。因此检测乳腺癌中有无c-erbB-2的扩增和高表达意义重大。 临床上～一般通过检测肿瘤原发灶的c-erbB-2的表达～决定是否使用Herceptin～很少考虑复发转移灶中c-erbB-2的表达可能发生的变化。由于转移灶与原发肿瘤在不同的免疫及营养环境下生长～其在基因含量、形式、功能以及成分上存在异质性～不能认为所有原发肿瘤细胞与其转移瘤内的肿瘤细胞在生物学结构及功能上是一致的～原发灶和其转移灶肿瘤可能并非源于同一克隆。手术已经清除原发灶肿瘤细胞～之后的临床发展过程则主要取决于有无转 移灶和转移肿瘤细胞的生物学特性。因此～有必要对肿瘤原发灶及 其转移灶的生物学情况进行详细的比较研究。本研究发现47例发生 腋窝淋巴结转移的患者中原发灶c-erbB-2高表达18例～腋淋巴结 转移灶c-erbB-2高表达16例～两者差异无统计学意义(P>0.05)～ 其中5例患者的原发灶c-erbB-2阴性或低表达而转移淋巴结为高表 达～有7例患者的原发灶c-erbB-2高表达而转移淋巴结为阴性或低 表达～变化率为25.53%(12/47)。Gancberg等[13]分别采用免疫组 织化学和荧光原位杂交检测乳腺癌原发灶及远处转移灶的c-erbB-2 一致性为94%和93%, 不一致性为6%和7%;Santinelli等[14]采用 同样方法检测119例浸润性乳腺癌原发灶和相应转移灶的c-erbB-2 表达～包括45例同时的淋巴结转移、9例异时的淋巴结转移、30例 局部复发和35例异时的远处转移灶～其中淋巴结转移灶的不一致性 为6.7%～局部复发灶和异时远处转移灶的不一致性为13.3%和 28.6%～65例局部复发和远处转移灶中有14例与原发灶c-erbB-2 的表达不一致(P<0.001)～15.4%的病例原发灶阴性而肿瘤复发灶为 高表达。国内多个对乳腺癌原发灶和转移灶的c-erbB-2表达差异的 研究结果显示c-erbB-2表达的变化率为8.6%，16.9%[15-17]。本 研究的检测结果一致性为59.6%(28/47)～与国外文献有差别～可能 与检测方法不同有关。但是c-erbB-2在原发灶和复发转移灶之间的 差异确实存在。这提示～临床应用Herceptin和选择化疗方案时应 当考虑c-erbB-2表达的差异性。对原发灶阴性或低表达而转移淋巴 结高表达的患者是否可以应用Herceptin治疗～目前尚缺少靶向性 疗效的评价。但可以肯定的是～检测复发肿瘤和转移灶组织中c- erbB-2的表达是有必要的。 【参考文献】 Jacobs TW, Gown AM, Yaziji H, et al. 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