土壤NH4测定!10

土壤NH4测定!10 土壤NH-N的测定 4 (参考文献:Kandeler E, Gerber H. 1988. Short-term assay of soil urease activity using colorimetric determination of ammonium. Biol. Fertil. Soils 6, 68-72.) 原理:在碱性条件下，用硝普钠催化，土壤中的NH-N可以与水杨酸钠、二氯异氰尿酸钠4 形成绿色复合物。 一、试剂 1、2M KCl溶液:称149gKCl，溶解在蒸馏水中，最后定容到1000ml。 2、0.0125M CaCl溶液:称1.837g CaCl，溶解在蒸馏水中，最后定容到1000ml。 22 3、0.3M NaOH溶液:称12gNaOH，溶解在蒸馏水中，最后定容到1000ml。 4、1.06M 水杨酸钠溶液:称17g水杨酸钠和120mg硝普钠，一起溶解在蒸馏水中，最后定容到100ml。该试剂用时配制。 5、试剂A:将100ml的0.3M NaOH溶液、100ml的1.06M 水杨酸钠溶液与100ml的蒸馏水混合，待用，不能保存。 6、39.1mM二氯异氰尿酸钠(dichloroisocyanurate，DCCA)溶液:称0.1g二氯异氰尿酸钠，溶解在蒸馏水中，最后定容到100ml，该试剂用时配制。 7、NHCl标准储存溶液(100µgNH-N/ml):称5mgNHCl，溶解在蒸馏水中，最后定容到444 50ml。 8、NHCl标准曲线:分别取上述NH4Cl标准储存溶液0、0.5、0.75、1、1.25、1.5ml于试4 管中，并定容到50ml，各稀释液NHCl的含量相当于0、1、1.5、2、2.5、3.0ug/ml。分别4 取5ml的标准稀释液、2.5ml的试剂A、1ml的39.1mM二氯异氰尿酸钠溶液于试管中，混合，静止30min。于660nm波长比色，OD，画制标准曲线。 二、步骤 1、称19g鲜土于250ml三角烧瓶中，加75ml 2M KCl溶液(或0.0125M CaCl溶液)，室温2下摇1h，过滤，待分析。如果用2M KCl溶液提取，提取后须用蒸馏水按1:5或1:10稀释;如果用0.0125M CaCl溶液提取，则不必稀释。 2 2、取5ml的土壤提取液、2.5ml的试剂A、1ml的39.1mM二氯异氰尿酸钠溶液于15ml的试管中，混合，静止30min。 3、OD值测定:于660nm波长比色，记录OD。 4、通过标准曲线计算NH-N的含量: 4 µg NH-N/gdw干土=(S×V×F×100)/(A×SW×干土%) 4 其中S:样品中NH-N的平均含量;V:土壤提取液的总体积;F:稀释因子(8.5/5);A:4 5ml的土壤提取液;SW:鲜土重 土壤NO-N的测定 3 参考文献: (Keency DR, Nelson DW. 1982. Nitrogen-inorganic forms. In: Page AL, Miller RH, Keency DR (Eds), Methods of Soil analysis, part 2. Am. Soc. Agron., Soil Sci. SOC. AM., Madison, Wisconsin, pp. 643-698. Scharpf H.C., Wehrmann J. 1976. Die bedeutung des mineralstickstoffvorrates des hodens zu vegetationsbeginn für die bemessung der N-düngung zu winterweizen. Landw Forsch 32, 100-114.) 原理:土壤提取液中的NO-N可以在210nm波长下进行比色，然后用总的NO-N减去锌还33原的NO-N，即为土壤中植物可利用的NO-N。 33 一、试剂 1、2M KCl溶液:称149gKCl，溶解在蒸馏水中，最后定容到1000ml。 2、0.0125M CaCl溶液:称1.837g 2水的CaCl，溶解在蒸馏水中，最后定容到1000ml。 22 3、稀硫酸溶液:按1:10(浓硫酸:蒸馏水)稀释。 4、2.5%硫酸铜溶液(w/v):称2.5g硫酸铜，溶解在100ml蒸馏水中。 5、挂有铜皮的锌粒制备:将100ml的蒸馏水、15ml的稀硫酸溶液分别加到盛有250g锌粒的500ml烧杯中，混合，直到锌粒表面有光亮为止。弃去溶液，用150ml蒸馏水洗四次。再加150ml的蒸馏水，然后再逐滴加入25ml的2.5%硫酸铜溶液，边加边搅拌，直到整个锌粒均被包上一层黑色的铜外壳为止，再用蒸馏水洗四次，室温下干燥，储存在密闭的玻璃瓶中。 7、硝酸盐标准储存溶液(100µgNO-N/ml):称5mgKNO，溶解在蒸馏水中，最后定容到33 50ml。 8、KNO标准曲线:分别取上述KNO标准储存溶液0、0.25、0.5、0.75ml于试管中，并定33 容到50ml。各稀释液NO-N的含量相当于0、0.5、1、1.5µg/ml。分别取25ml的标准稀释3 液，分装于两个50ml试管中，分别加1ml的稀硫酸溶液，混合。加3-4粒处理的挂有铜皮的锌粒到每支试管中，静止过夜。 9、于210nm波长下紫外分光光度计比色，记录OD，画制标准曲线。 二、步骤 1、称19g鲜土于250ml三角烧瓶中，加75ml 2M KCl溶液(或0.0125M CaCl2溶液)，室温下摇1h，过滤，待分析。如果用2M KCl溶液提取，提取后须用蒸馏水按1:5或1:10稀释;如果用0.0125M CaCl溶液提取，则不必稀释。 2 2、取两个20ml清亮的土壤提取液分装于两个50ml试管中，用蒸馏水补充到25ml，分别加1ml的稀硫酸溶液，混合。加3-4粒挂有铜皮的锌粒到其中一支试管中(对照)，另一支不加锌粒(样品)，静止过液。 下紫外分光光度计比色，记录OD。 3、OD值测定:以试剂空白为参照，于210nm波长 4、通过标准曲线计算NO-N的含量: 3 µgNO-N/gdw土=[(S-C)×V×100]/(A×SW×干土%) 3 其中S:不加锌粒的样品中NO-N的平均含量;C:加锌粒的样品中NO-N的平均含量;V:33 土壤提取液的总体积;A:20ml的土壤提取液;SW:鲜土重