麻痹性贝类毒素 ELISA法与小白鼠生物法检测麻痹性贝类毒素的研究

麻痹性贝类毒素 ELISA法与小白鼠生物法检测麻痹性贝类毒素的研究 ,,第 期,年 , , , 萱 量 姨 舛 农,, , ，,法与 小 白鼠 生 物法 测 检,, 麻 痹性 贝 类 毒 的素研 究 黄奕 雯( 建福海洋省境 环渔与业 资源监 测中心, , , , ),, 摘 要 :麻痹 性贝 类毒 素(, ) 当前 世界 是 范 围内 分 布最广 、危 害 最大 的 一种 海 洋生 物 1 毒。 ,,素 该 研 究以福建地贻贝为区料原，用采联酶免 疫吸附 法 ,, )( 传与的统小 鼠白生测定物法 对, , ，, ,份 贝样品中贻麻的痹贝类性素进毒检测行结，明果两种:法方检麻测痹贝 性毒类素的结果 合 吻程 度 好 较但 ,， ， ,法适更 于检 , ,含测量较 小 贝类 的通 过 。比研 较 ，究 小鼠白生 物 操 法 作简 单 ,, , 但无法准确 量 ;定而 ，,,法 速简快 便灵、度 高且 敏检 测成 低 本对 于，麻 痹 贝性类 毒 素 的快速 筛, , 检 选具有 重测要的现 实 意义。这 种 方两结 法运合用 以确保可麻痹 性 贝 类毒素检 测 的结 更 加果 准确。 关 键 词麻: 性 痹类毒贝 素;联酶 免疫吸 法 ;小附白鼠生物 法 ,,, ,, , ,, , , , , , , , , , , ,, , , , , , ,, , ,, , , ,,, ,, , , , ,, ,, , ,, ,, ,, , ,,, ; , ,,, , , ,, , , ,, ,,,,, , , ( , ,, ( , , , , ,, ,, , ,,, ,, ,, , 2 ,,,, ,, , ,, ,, , , ,, ,,,, , , , ，,, , , ; , , ,, , , ,,, ,, ,,, ,; ,,,,, ,,,,,,, , ,, ),, , , ,, ,,, , , , , ,,,, , ,,, , ,, ( , ),, , ,, ,,,, , ,, , , ,—, , ,, ,, ,, ,,,, ?, , , ;:,, , ,,,, , ,, , , ,,, , , ,, ,, — ,,,,,, , ,,,, , , ,,, , ,;, ,, , ,, ,,, ,,,, ,, ? ,(, ,, ，,， ,,, , ,, ,, , , , ,, ,, ,, , , ,,,，, ,, ,,,,,,, , , , ,, , ,, , , , , ,, , ,,,,, ,,, , , ,, ,, , , ,,,,, , , , ,, ,,(,, ,— , , , ,,, , , , ,,, ,,, , ,, , ,;,, , , , ，,,, , ,, , ,, , ,,,, ,,,, , ,,, , , ,,, ;, , , ,, , , , , , ,,, , ,, ,, ,，,, , , ,, ,, , ,, ,; , ,, , 3 ,,, , ,, , , , , , 。, ,, , ,, , , , , , , ,, ,, , ,, ,,, , ,,,,,, ， ,,;, ,,, , , , ,, , , ,，, ,, , ,，,, ，, , , ,,, , ,,,, , , ,,, , ,， , , , , , , , ,, ,, , , , , ,, ,？, , , , ,,, , , , ,,, ,, ,, ,,, ,, ,, , ,,, , ,,,, ; , ， ,,, ,, ,, ,,, , , ,, , ;, ,, ,; ,, , ,, ( ,,,, , ,, , , , , ,, ,, ， ,,, , , , ,, ; , , , , ,, , ,; , ,, , , ;, , ,, , , , ,,, , , ,,, , , , ; , ,,, , , ,; ,, , ,, ,, , , , ,, , , ,, ( ,,, , , ,, ,, , ,,,, , ; ,, , , ,, , , ,, ,; , ,, , , ,, , , ,, , ,, ,, , ,,,,; ,, , ,, : , ,,, ,,, ,,, , ,;, ， , ,, ;, , ,,, ,, , ,, , 近 4 来 ， 年着 工 业 生 农产 迅 的猛 发 展 及沿 海地 随 区 人 口逐的渐 多 增，量 未 经 处 的 理工农 业废 水 和大 生 活污 水排 人海 洋 ，致近 海 和港 湾 的富营 养 化程 度 日趋导严 重 ， 潮 现 在 我象国 沿海 地 区频 频 生发。 赤 赤潮对海洋 态生环 境 天、然 洋 海 生物 资 、源 海增 养 殖 业近等 产生 都了 直 接 间 或 接的危 害 ， 有 中 毒 赤潮 其 的藻影 尤响为 严重 研 究。 料资 表明 ， 形够 赤 成潮 的能微藻 为约 ,,,, , , , 种 ，有 毒中 有的 ,其 , ,, , 种 ， 健命危 康害大 的最一 贝种毒类 素 是麻痹 性类毒贝 素 , ， 在 球全 范 内 围经 已致导 众 多 的了 中 和毒 ,死其 , 亡故事。痹性麻贝毒类素具毒性有大、反应 快、 防治 困 等特难点 ,一 。 联合国卫 生 织 组 定 规，可 食 贝类 的 麻性贝痹类毒限量为 ,素 ,, ？, ,,,, ,， ,,,, ?亦 ,即 ,,,, ( , ,计 ) ,,, 以 , 。 着 5 人们随 对 赤潮 毒 素 问题 的 日益 注关， 痹 性 贝类毒麻的高素检效 测方法逐渐成为也内国研究外 的 热点 。我 国 目前 检测麻 性痹贝 类 毒 素 的 方法 很 多 ， 有 物 实生验法 小 如鼠生 物白测 定法 ，,, 免 化 疫 学分 , 法如 酶析 免联疫 吸附 (法 , ,。 ，, ，, )。化 仪 器 分 学 析 约 占 洋 中浮海游植 物 的, ,一, ,…。 这些有 毒 (, (, 潮赤是牡蛎藻 、 贝 贻、文 蛤 扇、贝等贝类的食 ，物 通过 食 物 链 在类贝 体 中蓄积 ，为 毒 贝常。见的 贝 类 毒 成 素主 要有痹麻贝性 ( 毒,) 腹 泻性贝 毒 (,) 神 , , ,、 、 经性贝毒 , ( ),, , 和忆记失缺 贝性 (毒 ,) ,, ,种 。 , 当前 界上世分布广最 、 事发故生频率高 最 对人类、 生 收稿日期 :, , , , , , ,— , 作者—介 简: 6 奕雯黄， 女,,，, ,年 生助理，工师程 。 法高效如液色谱法相(, ,等。 小鼠生物测 白 ,) ,定 是最法 常 的检用测 方法， 但 该方法 重 现 性较 差 、 可比性较 低、限 大性。近 来 年 局 随，着免 疫 析分技 术的 不断进步 ， 酶免联疫 附法 吸其以异性强特、 灵敏 度 高 操作、简迅速等便 优点快速发展来起 。文本 以 建福地贻贝为样本区， 采用 酶免疫联附吸与传法 的 统 舛农 , 妓小白鼠 物生测定法 贻对贝 中的麻痹 性 类贝毒 进 素 行检， 测旨通在 两过 种检测 法 的研方究 比较 ， 为 涉 该 及 领 域 的 研 人 究提员 一 些 供参考 依 ， 同据时也 为建 立 快速准 确 麻 痹 的 性类 贝毒 素 测 检 方 法 定奠 好良 基 础。 , 7 年, , 期第, , , ,;育 完， 心 揭开盖 板 膜，洗 板 机 洗微 孔, ,孵 , 用小 板，洗液 为 纯超 ，水洗 板, 次; 完 后将微 孔 板倒 洗共 置 于吸水 纸上 拍 数 打 次 ，尽 能可 将孔微中 的 液 体应 拍 ; 干 即向各微 中加孔入 , , , 物 液 溶， 上 盖 ,立 底 板粘膜 轻 混匀 ，，, 轻 于—,,, 避 光 育孵 , , 最,, 下 ,,,;后 加 人 ,,， 停 止 液至微各 孔 中， 轻振荡 混 匀， , , , 轻于 , , ,, 内,测 定 微 各孔溶液 , ,在,波 长 下 吸 的光 , , 材,与方法 料,, 材料 与 试剂 度(。 ,,,值计算 方 法计 算 麻痹性 贝类 毒 素 标准 液 和 ((样 液 的 平均吸 度光值 ，公式 ( )别 得求 各标准 液 按 ,分 样 和液的 百 8 分吸比度 光 值: ,, ,, , …… ,……… ……… ……… () ,,×, ,, 试 供 贻贝 样 品采 集福 建 于地 区 ; 性痹贝 类 毒 麻 酶联素免疫检 测 剂 试盒购 美自国 ,,,,;,公 司 验; 实 用 水 均为 电阻 率 ,, (, ,,? , 的超 纯 水; 用 试 验; 实 剂 为分均析 试纯 剂 。 , ,仪 器与设 备 ( 式中: , 百为 分比吸 光 度值 ; 标 准液 或样液 , 为全 自动 标酶 仪,孔，洗板 机 ， 质 ，器 旋振 荡 , 均涡器 ， 心离机 ， 度 为 ,,的天平 ， 精 (, 内 式热 玻纤 璃 维 热 套 电，试纸,， ，, , 、,, 微, 量移液 器 及 枪, , , ,, 、 , 头,， , , 杯， ,,离心 管 ，,, ,,,, 量 筒 ,，,, , 烧 ,, ,和 , 9 平 吸光均度值 , ; , 标准,液平均光度吸值。 ,为 ,, 以 麻痹 性 贝 毒类素 标准 液 浓度 对 数 值 为横 坐， 标以标准 液 百 分 的吸光比 值 为 纵 度坐 ，标制 校 正 绘 曲线 根。据样各液的百分 比光吸值度， 校正 在线 曲上取读其 所 对 应的 痹麻 性类 贝 毒素浓 度值 ，乘 以再 相应 的稀 释倍数 ，即 为 样 品麻中 痹 贝 性 毒类 素 的 实 含际 (量, ,校 。正曲线 的 绘制 利可 用,, , ， , ), ,，, 酶 联免疫数 据 处软理 进行 件 。 , 小 ,鼠白生物 定测 法 ( , ,, ,璃玻 试管小 ，时 器， ,注射 器 重 为， , , ,计 体,, , ,,的康 健,，雄 性小 鼠系 。, , 样 品, 理处与 备 制( 将 贝贻样品 的外 壳 清用水 彻 底洗 净 ， 开 壳闭 切 肌， 超用 纯水淋洗 内部 去以 泥除沙 和 其他杂质 ， 心小 取 贝出 肉， 割 勿破肉体 ， 不 得以加热或 药 物 方 的切 且 式 壳 。开收集 去 壳 贝 10 沥 水 肉,,( , 避 免 肉贝堆 ,应 积 捡 出)壳碎 杂 等 ，物贝 均质 肉备用 。， 将 , ,酶 联免 疫吸附 法( , , ,取 与净化 (提 称 取(, ,均质,后 的 贝肉样 品 ( , , 提 取,( ( 称 取,,,均 后质的 肉贝样品 于,, , , 烧 ,杯中 ， , , , , 酸 溶 液 盐, , 充 , 分搅 加 ,(, ,,, , , 拌 ，值, 为 ,,,( ， 要 时 逐 滴可 加 入 ,, , , ( ,,, 需 , , 盐 酸 溶液 , ,,或 ,氢, 氧化 溶钠液 调 节 ,值 ( 。, , 将混,合物 加 热，缓 慢煮 沸 ,,, 却 冷至室 温 将后 并 , ，混 物移 合至 ,, ,量 筒 中并 稀释至, ,, 节 ，, , , , 调, , , 离 心于管 ，中,, 加入 , ,, 的甲 醇 , 溶液, , 水 ,, ，, 涡 旋振 荡 混 匀 ， 于后 室温 以 ,,, ,, , 心 , 然 ,, , 11 ,离, 。取,上清液 , ,, 到, ,, 样品稀释 液 中， , ,, ( , 涡 振旋荡 混 匀，, , 取,进 酶 行免联疫测定 。此 的时 释稀倍 数是, ,倍 ， ,于 对浓 度 高样的 品 ，超 校出正 曲 若 线范 围 可，用 样稀品 液进释一 步稀 释 ， 至 品样浓度 直在 正校 曲线范 围内以 。 值 ,至,, (。后然把混合倒 物回烧 杯，( , 搅, 至拌 均 状质， 其 自使然沉 至降上清 液呈 半透 状明 ， 堵会 不塞注 针头 射 可即 要 ，时可 将合混 物或 上 清 液于 室温 以必 , , , , ,, , 离 心, ,, 保留进 行小 鼠 射用注的足 , , ，, 液量 体 。 , ,,小 试鼠验( ( 将 鼠称小 并重记录重 量 ， 重 取 为体 , , ,, ,,的 康健 ,系， 雄 性 鼠小 ,只， 随机,分 为 试 验组 空和 白 对组 ， 组照,只 小鼠对。每 试只 验每 小 鼠 腹腔 注射,, , 提取 液 或 空 白 对 照 液 ((, , , 12 , , 测,步定 骤(( 测之前定 先将应所试 有及样 剂 品置 于温下平衡 室 , ,,,以,上可方用使 将。足数够 ,量 的 微 孔插条 入微孔 板架 ( 痹 性 类贝毒 素标 准 液 麻 和待测样 液均分 别 做 平 试行 )记 验 标准 录 液和样 液 的位 置 ，。 , , 盐酸溶液) 射注时若 , 以上提有液溢取， ,,出, ， 滴 则需新 注 重射,只 小 。鼠 录记 射 注完毕 时 间 ，细 仔 观 察用并 时计 器 录记 鼠小停止 呼 吸 时 的 死亡 时间 ( 到 鼠小 呼最后一 口出气 止) 。 若 注射 品样 液原 后 ，,只或,只小 的鼠死 时 间亡 , ，, ,, 则,需要 再注 至 少 ,只小射鼠 以确定 样 品 的 先取 吸, , , 标酶记 物 到各微 孔 中， 然 分后 别 向 13 应 相的 孔 中微加 , 入 , , 系列 浓度 的 标准液 和 待 测 样液， 后 之 再向各微 中孔加 , 人, 体 溶 ，液 上 ,抗 粘盖 膜 ，板 振荡 充分轻 匀 ，混, ,, 光 避孵育 轻 于 , ,,下 , , ,第期 ,年 , , ( , 耋妓 , 求 舛 , , 毒 力 ; 小 鼠死 的亡时 间, , ，需稀 释 品样提 取若 ,,, 则后液 ，注再 另一 组射 鼠小 ，得 至到 —, , 死的亡 直, , ,由 正曲线校得出各贝样 贻品中麻性贝痹毒类素 实际含的 ( 量 ,，中低 方于检出限的法结果 表 表其 )示 为 未 检出从 。检 结测 果 可见 14 ，, 贻份 贝样 中品 除, 时 间稀。提取释液 时 要逐，滴加入 , , , ,盐酸 ,, (, , 液 ，溶调 ,节, 至值, , , ( (。 ,, , ,,毒力 算计 本试验依 据中华人民 和国国 ((共 家准 , , 标, ,,, ,— 贝类,中麻 性痹 贝类 , , , ,, (,, 《 毒 的素定 测》进行 ， 毒 力 需 时 据根试验 小 的死 鼠计算 时亡 间在该 标准 附 录, 中查出 相应 的鼠 位 单，据 根 小 鼠的 量在 该标准 重附 录 ,查中 对出 的重应量校 正 系数 。 每 ,,,贝肉 品 中麻 痹 样性贝类 毒 素的 含量 按 , , 号了 品样检出未 外， 其均检余出一定 浓度的 痹麻 性 贝类 素毒 ，, 且 ,号 品还 超样出 了 , ,的 全 安量限 , ,, ,, , ,, 。一 笔 15 魁 公式 () ,计算 : ,,,,， ,? ,×,, ×, ,,, … …… … ( )…,× , , 翟 奄 ， 缸 式 中 :每 ,,, 品 样中痹 性麻 贝 类毒素 的含 为 ,, 量 (,,, , 只;小 鼠 的 量重 正 系校数 ; 为 , ,为)每 ,, 每只鼠小的鼠 单 (位, ; ,为 素毒换系转 数 ,;, ) ,, 为 样品提取 液 的 稀倍 释数; ,, 表, 示样品提取 液 定 的体容 积() ,。, , ,准 液浓 度 (, , 标 , ,,) 图,, ，, 法 校 曲 线 正 ,, , 16 , ,素转毒换系 数计 的 配制算列系 浓的度 麻 ((痹性 贝毒素类标稀释准液 ,,计算()分 取 别, 以, ， ,对 , ,,组 ,只 小 进行鼠 腹腔 注射， 选 中位数择 死亡 时间 在—, , , ,的受, 试 ， 组 该所 选组择 浓 度 的标 ,用, 小白生 鼠物 法测 检结果 分 析( 试本测验得的素毒转系换为数 , ,。若小的 鼠, ( 死 亡 间 ,,时 ,，将 检 测 果结 作记 未检 ，出 ,, , 则以 使,只 , 小的鼠在腹 腔注射 后, 死,亡 的麻痹 ,重,, , 性,贝类 毒素含 量作 该 方为法 的 检出限， 据公式 ( ) 根 ,计 结 算果为,, ,, ,。 , , , 对,份 同不的贻 样贝 进品行小 鼠 生物 检 测 法 准，来液算计单只小的毒素转换 系数鼠， 见式(公) , : , , …;………… ? …… …… …一…( ),,, , … , 式:中,为素毒转系数 ; 为换麻痹性贝类毒 17 素 ; ,标准液 浓度的( , , ; 鼠 小重 的量校 正 系 ; ,数 , ), 为 ,为小 鼠的 鼠单位 ( ,) ,。 在 空白 对照组 小鼠 正常 的情 况 ，下据 实 验组 小 鼠根 的死亡情 况计 算 所 得的各 贻 贝 品样 中麻痹 性 贝类 素含毒 量( , 。由 表 ,见 ，份,贻 样贝品 有 , 中表 ) 可 ,, 样份品检 出麻 痹性 类 毒 素贝， 中 ,其 号 ,和 ,号, 样 品 超出 了 ,的安,全 限量。 , 组每 鼠小的均平, 为组值毒内转换系数素， , 取 不 同受试组组内素转换毒系的数均平进值毒行计 力算 。由于 鼠生物小特 和性试 验境等环因素 生 变 化发， 素转换 系数 的 值会 有数 些一 波 动，毒 应 期 检 查定 加 校正以。 , , ,，法,与小 鼠 白物法生检 结测果 比较 的 (, , 将分用别酶联 免疫 吸法附与 小白鼠 生物 法 测 检 18 结, 与果分析 , ,酶联 疫 免附法吸 检 结测分果 (析 选共 取 ,份, 同贻 不贝样 品按 照各 自 适 当的稀 ,份贻,样品中麻贝性痹类贝毒素的果结行进比 较 ， 可看 以 ，出当贻贝 中 ,的,含 量 较 低 时，, 由于小 白 鼠 生 物法 检的出 较 限 ， 只有 , 高，法 能 ,够 检 出 痹麻 , , 贝类性 毒 素 ,,含 量 ; 于大 小白鼠生 物 法 的检 出 当 , 释倍 数 来进行酶 联免 疫 吸附 法 定 测试。 盒 所剂 用 痹 性 贝麻 类 素毒标 准 液 系的列 浓 度 别分 为 ,, , ,、, , , , ,, ,, , , , ,,, , , ( 和,, 、 (, ,、( ,, 、 , , (限时， 两种方 法均能出检贝中的麻痹性贻贝类素毒 。 于 对 ,,含 较 量 小(,,, , , ) ,, ,, 的样品 ， ,,，,, 19 法 小与白 生鼠物 法的 检 测结 具 果有 较好 的 一致 性 ; , , ,, 以标各准浓液度 对值数 横为坐标 (,，, ， 标以 准液的百分 比 吸度光为纵坐标值制绘校正曲 线( 图, 。当样 品 取提的稀释倍数为 ,液,时， ) ,倍 方法 检该出 限 , 为,, 。 ,, 但 ,当含量较,时高 ( , ,号 样) , 品如, ,,， 两方 法种的检 测果 结 存在一 定差 的 异,， ,法， 检的测 结 ,, 果是低总于 小白 生物鼠法 ，且 并,含, 越 高量 差 , ，, ,妓耋 , 琅舛 性越异大 (, 。表) 表 ,,， ,与法小 鼠白生法物检测贝贻中 ,结 果 , , ,, , 年 , ,第 , , 20 贝期毒类 素 检 方测法 具 有 重 大的 现实 意 义 和 应 用 价。值 麻 痹性 贝 毒 类素 小 白的 生 物鼠 测 定 是法 ,, ,, 年 由 , ,,, ,, 建 立 的， 方 该 操 法作简 、便 ,,,, ,,,, 不 要需用使专 门 仪器，是 目前 唯一 得 到际国公认 的 ,, ,, 准生 物标检 测麻痹 性贝 类 毒素 的 方法 也， 是 目前 被 大数 多家国 接所 的受 准标方法 。 但 不 因同 小对鼠毒贝 敏 的性 感不同 ，人且 操 为作导致 的差误较 大 ， 一 方这法 在存 重 现性差 、可 比性 低 灵 敏、度 小 缺等 。点另 外，由于采 用 活 体动 物实 验并 ， 需要 且大 使 量小 鼠 用，在 伦理道德 上 又 制限 该了方 法在 某 些 家 国应的用 。 此 ，因人 们希 建望立 一 种 更合理 的 替代方 法 。 近 来 ，年高效 液 相 色 谱法 (, ) 技, ,,术发 迅速展 其 原理 是将，麻痹 性 贝 类毒 素 分 子 的环 状 结构碱 性在 件下 条化氧再酸 化 生 成 光荧 生 21 色 团后 进 行荧 检光测， 是唯 能定性一 定量 检 出测各 种素 毒组 的技 术 分。该方法 灵 敏度高、特 异 性 强，具有 明 显优的 性越，但必 须配备 昂贵 的 仪设器备 和专 业 知 识， 且耗 较时 ，长此很 难 因 规大 模普及 。,，, ,法 ,是 在 免疫技酶术 的 础 上基 发展 来起 一的种 新 型 的 免疫 定 技术 测已，逐渐 为成分 析化 学 域 中领 前 的沿课 题 ，得 到 广了泛 应 。用本 研 究 结 果 表明 利 ，用 , ,，检法 测痹 麻性贝 类 素 毒 有具快 速 简 、 且便 灵,, 度敏高 、检 出限等低 优 点普 通，基 层实 验 室 均 能 开 ，展可广 应泛 用于麻痹 性 类贝 毒 素的 初筛 控监 普 和查工 作 。但由 , 于，法,的敏感 性 高 较，易 其他受 , 贝, 类毒素 影 响 ，的要 进一 若步 确 阳证性 样品 准并确 由此可 见 ，在一 定浓 度范 围 内 ， , ，,法 与小 ,,白 生物鼠 检测 法类 贝中麻痹性 贝 类毒 素的 结 吻合果 程度 较好; 但当贝类 所中含 ,浓 度,较大 时 ， 22 种 , 两 分其 所 析 含 毒素 组的 分 及 各 分 组的 含 ，可量 选用 方 法 检的 测果 具结有 定 的差 一异性 ， 浓 且 度 大越， 差 异性 越显明，这 说 ,明，, 法比 较适 合 于检测 ,,, 含 ,量 较 小的样品 。, ,, ,,等他化其仪器学析技术。 分免 化 疫学分 析 检测麻 痹法 性贝 毒类 的素技术 虽 已然经得到 了 初步 应 ，用但由于抗 体 交 叉反应 产 的 生 以及, ,列系 准毒标 素 缺的 乏 因等 ，素 计 在较 预 ,长 间 内 时该技 术， 深入 的 用应仍然 受 限 ，而 小 白鼠 小,结与讨论 麻 性 贝痹类素毒布广全于球各 大海 域。前 当 麻痹性贝类，素毒仅仅不是产品安全水 题 问，更及 涉到水 产经发济问题 展是一类，人类生对命健危害康 大较海 23 洋生物毒的素。其危害性 已起引 我海洋环国 境、 水 养 产和殖 食品 安 全工作 者 的关 注 。作 为业渔 和海 产品养殖 业大 国 我，国 将已 麻痹 性 类贝毒 素列 贝类 产为品 的常 规检 测指 之标 一。面对 目前 严峻 的 势形 加 ，我 国强贝 类理管 ，研 究快 速 确准的 麻 性痹 生物 法,、 ，法 ,与仪器 法,种 检 技测 的有 机结术 , 合,运用 将 是麻 痹性贝 类毒 素 检测 手 段 的发展 趋势。 本研究 采用 联 酶疫 免附吸法与 小 鼠生 物测白定 法 对 贻贝中 的麻性痹贝类素进行毒检 测，果表明结两 种方 法检麻痹性测贝毒素的结果吻合程类较度。好其 中 小白生物法操作简便但检鼠出 高限无法准确且定 量 ;而 , ，,具 法适用有 范围 广、 检测 速 度 、快特 , 异,和灵性性敏高等优 ，比较点适合检测 , 含,量较 小的贝类 ,，不且需使用 要贵的仪器设备 昂、检测成 低 ，本 非常适用 麻 痹于 性类 毒贝素的 快速 选筛 和定 , 24 第 期 , , , 年, ,, ,耋 琅妓舛 福建 省 规 模化 养 殖场 粪 污处理 与利 用现 及 状对其 策 叶美 锋林代， 炎林鸿，雁，吴 龙 飞 ( 福 省建 业科农学 院农 工业技程 术研 所 究,, , ),, , 摘 :要针 目前对 建 省福规 模化养 场殖 便 污水粪 理 与 处生物 质能 源 产 业化利用 情况 进 行调研 ， 分 析 便 污粪水处 理与生 物质 源 产 业化利 用过程 能存中 在的 题 ，问提并出对 策与建 。议 关 键词 :规模 化养 场 ;粪殖处 污理;现状 , ,,,, , , ,, ,,,, ,,,, ,, , ,, , , , ,,, ,,,,,, , , , ;, ,, ,, ,; ,, ,, ,, , , ,, ,,,,,, , ,, ;, ,,,, ,, ,, , , ,,,, , ,, , ,, ,,— , , ,,， ,,, ,, , ， 25 ?,, ， , ,, , ，,, , ,,, ,， ,, ,, ,, , — , , ,(,, ,, , , , , ,, ,, , ,, , ,,,,,;, ,, ,, ,, ,, , ,, , ,,, ; ,, ,,,,) ; ,, ,,, ，,,, ， , ,; ,, , , ,,,, ; , ,, , ？ ,, , ,; , ,, , ,, ,;,: ,, ,, ,, ,, , ,,,,,, ,,, ,,,,,,,,, ,, ,, ,,, ,,; ,,, , , , , ,,, ,, ,,,,, , , , , , , ,,, , , ,, ,,,, , , ,,,, , ,,, , ,, ,,, , , ,,, , ,,, ,, , ,,,, ,,,, , ,(,, ,， , , , ,,,,, ,, ,, ,, ,, , , , ,, ,,, ,, , , , , ,, ,,,,, ,, , ,, ,, , , ,,,, ,, ,,, , ,, , , , , ,, , ,, , , ,, ,,,, , , ,,, , , , , , , , , , ,, ,,, , ,,， , ,, , 26 ,, , , , ,, , , ,,, , , , , , ,, ,,, , , , ,, , , ,, ,, ,,,, ,, ,, ,, ,, ,, , ,: ,, , ,, , ,, ,; , , ,, , , ,,,, ;, , , , ,, ,,, ; ,, ,, , , , ,, ,, , , ; ,, ,, ,, , , 着随建 省农 业福产业 构结调 整 规模 化， 畜禽养 殖 场 得到速快 展 。发 据, ,,年 ,福建 统 计年 数 据 鉴 ， ,,, , 福建年 省生 猪的 出栏存头 数 分 别 为 , ,(, , , 万 ,和头 ,,( , 万 头 , ,,, 据。国 家环保 局总编制 的规模 化禽 畜殖养业污 染 放排标 准 , (,, ,, ,)提 ,, , ,,, 供基的 础数 测据算，, , , , 全年省生猪 粪 便产生 量 ,为 ,, ,,( 万,, 污水 产 生量 ,, , ， 27 年 , , (, ,万 规。模 收稿 化日期 :, ,, ,— ,, — , 作,简介者 :叶美锋， 女，,, , ,年 ，生理研究助员。 基金项 目福建省:农科学业科院创技新团建队设金基。 猪养 场 快的 发速展 一方， 面 决解 了猪 副肉食品 城对 居乡 的民 障保应供 题 ，但 另 一 问面方粪 便水污排 放也给 环境带 来了巨大 压 力。 几 近年在 农业部 实 施大 量检 测。这两 方种 法的结合 运用 可以确 检保 测结 果 更加 准 。 参确 文 考献 :, ,,, ,,, ,, , ,, ,,, , , ,, ,,, ,, ,,, , ,, ,， ( , ,, , ,, ,, ,, ,, ,,, ,;, , ,, , ,, ,, ,？,,,, ,,, ,, ,;, ,: ,,,, , ,,, ,,,,, ,, ,,, ,, ,,,, ,, , , , ,,, ,,, ,, ( ,,, , ,, , , :,,, ,, , ,,,, , ,,, , —, , , ,,, ; , 28 , ;？, , ; ,, , ,, , ,, ，, ，,, , ,,, , , ,,,;, ,, ,,,,,, , ,( , , ,,,; , , ,,,, ,, ,, ,, ,,,, , , , ,,, , , , ,,, ， ,, ,,,，, , ,, ,, , , ,,,，, ,: ,,— (, , , ,周,名 江李钧， 赤( 藻潮素研毒 究进 展 ,(中,海洋国 物药 ， , , ,，,( ),— , ,, , ,, :,( ,, ,智 刘，计融勇( 各贝类水国产 品中麻性痹贝 类毒素 量限 标准 比对 的 ,(中国,带热 医学 ,， ,, ,, ， ,() , ,:,,—,, (, ,,, 华中人 民 和国共 卫生部中 国国标家 准管 化委理员会 (, , ,, ,, (, ,,,,, , ,, 贝类 中麻痹性,贝类 毒 素的测 定 ,,( 京 : 北, 中国准标 出社版 , ， ( ,,, ,, 中 人 民华共 和国国 质 量家监督检 检 疫总 验 局 , (,,, — ,,, , , , ,,,, 出进 口贝 中麻痹类贝性 29 毒类素验方 法检 一联免疫 酶附 试吸验 , ,(法京北: 国中准标版出社，,, ( ,, ,, ,， ,, , , :,, —,, , ,,( ,,,君 丁赤( 潮 毒 素腹泻中性 毒 和贝麻痹 性 贝 的毒 研究 进展及 ,,大连水(产院学学报 ， ,,，, () , ,,, , :,, ,— ,, ,( , ,,张君 ，少丁永 ，生李大 志等 ，贝毒 及检(测法 的研究方进展 , , (大连 海 事 大学 学 :报 然科自 学版 ，,, , (，) , , ,,, : —,, ,( , ,,江,久 天江，涛 (中沿国部海分海麻域痹 贝性研毒究, (, , 海洋 湖与 ，沼 , ,，, )( ,— ,, ,, ,, ,: ( , , 中华人 共民国和家国质监督检 验检量总局疫中 国 国标家准 化 ,,管理委 会员 (, , , , ,, , ,, , ,, ,贝类 30 ,中种 多麻痹 贝性类毒素 , ,, ,,, , ,, ,, , , , , , , , ,,,:,, , ,,，, ( , ,; ,, ,, , , , ,,,, , , , , , , , ,, , , , , ; ,, , ,,,,, ,, , ,,,，, ,,,,, ,, , (, ,， ,,, ,,—,:, , ( ,,,， ,, ,, , , (, ,,,,,, ,, ,,, ;,, , ,,, , ,,, ， ,,， ,,, ,, ,, ,, ,, ,, ,, , ,,, ,, 含量测定一液的色谱相荧一光测法检 ,, (,北京 : 中标 国准 出版 ，社, (, ,, (责任编 :林玲辑) 娜 31 百度搜索“就爱阅读”,专业资料,生活学习,尽在就爱阅读网 92to.com,您的在线图馆 32