少、弱精子症患者精浆、精子和血清中锌及性激素水平的相关分析

少、弱精子症患者精浆、精子和血清中锌及性激素水平的相关 少、弱精子症患者精浆、精子和血清中锌及 性激素水平的相关分析 本课题为国家"十五"攻 关课题 (2004BA720A33一1)资 助项目 收稿日期:2007—03—27 作者:曾春花华中科技 大学同济医学院 计划生育研究所 (武汉,43O030) 熊承良华中科技 大学同济医学院 计划生育研究所 官黄涛华中科技 大学同济医学院 计划生育研究所 陈莉华中科技 大学同济医学院 计划生育研究所 ? 352? 中国计划生育学杂志2007年第6期总第140期 少,弱精子症患者精浆,精子和血清中锌及性激素 水平的相关分析 曾春花熊承良官黄涛陈莉 摘要目的:检测弱精子症和少弱精子症患者精浆,精子,血清中锌含量和血清性激 素水平,分析锌 含量和血清性激素水平的变化与精子密度和精子运动能力的关系.方法:随机筛选190例弱精子症 患者,85例少弱精子症患者以及32例精液质量正常的已生育男性作为研究对象,利用原子吸收光谱 法检测其精浆,精子和血清锌含量,放射免疫分析法检测血清生殖激素(FSH,LH,T),并进行统计学 分析.结果:3组间精浆锌和血清锌含量没有显着差异(P>0.05);少弱精子症患者精子锌含量显着 高于弱精子症患者和正常生育男性(P<0.01);弱精子症患者T含量显着低于正常生育组而LH含量 显着高于正常生育组(P<0.05);少弱精子症患者T含量显着低于正常生育组而FSH含量显着高于 正常生育组(P<0.05),并且其LH含量与正常生育组间具有统计学意义(P<0.01);弱精子症,少弱 精子症患者精浆锌与血清T之间无明显的相关性(P>0.05).结论:少弱精子症患者过高的精子锌 含量可能与精子运动能力下降和精子膜功能障碍相关.但其具体机制还有待进一步研究.血清生殖 激素(FSH,LH,T)的测定对于弱精子症,少弱精子症病因的诊断和治疗具有一定的临床意义. 关键词弱精子症少弱精子症锌性激素 AnalysisofZincContentinSeminalPlasma,SpermatozoaandSerumandSerumGenitalHor mone levelsofAsthenozoospermicandOligoasthenozoospermicPatientsze昭Chunhua,XiongChengliang, GuanHuangtao,eta1.FamilyPlanningResearchInstitute,Ton~iMedicalCollege,Huazhon gUniversityof ScienceandTechnology,Wuhan430030 AbstractObjective:Todetectthezinccontentinseminalplasma,spermatozoaandserumands erumgen— italhormonelevelsofasthenozoospermicandoligoasthenozoospermicpatients,andanalyzetherelationship betweenzinc,hormonechangesandspermdensityaswellasspermmotility.Methods:190asthenozoosper- micpatients,85oligoasthenozoospermicpatientsand32fertilemenwithnormalspermqualitywererandomly screenedoutastheobjects.Thezinccontentintheirseminalplasma,spermatozoaandserumwasdetected byflameatomicabsorptionspectroscopy,andserumgenitalhormone(FSH,LH,T)levelsweremeasuredby Radioimmunoassay(RIA),andastatisticalanalysisWasmadeonthetestresults.Results:Thezinccontents inseminalplasmaandserumamong3groupshadnosignificantdifferences(P<0.05).Thespermatozoa zinccontentsofoligoasthenozoospermicpatientsweresignificantlyhigherthanthatofasthenozoospermicpa- tientsandfertilemen(P<0.01).Comparedwitllfertilemen,thereweresignificantlylowerTlevelsbut higherLHlevelsinasthenozoospermicpatients(P<0.05)andlowerTlevelsbuthigherFSHlevelsinoli- goasthenozoospermicpatients(P<0.05),itshowedsignificantlyhigherLHlevelsinoligoasthenozoospermic patients(P<O.O1)especially.NosignificantlycorrelationexitedbetweenseminalplasmazincandserumT (P>0.05).Conclusion:Theremaybearelationshipbetweenthehigherspermatozoazinccontentandthe disfunctionofspermmembraneandspermmotility,butafurtherstudyshouldbemade.Measurementofser- umFSH,LHandTmayserveasanimportantevidenceoftheetiologicdiagnosisandtherapyof asthenozo— ospermiaandoligoasthenozoospermia. Keywords:Asthenozoospermia;Oligoasthenozoospermia;Zinc;Genitalhormone 据统计,全球不育夫妇中男性不育的 比例不低于,50%,且呈上升趋势.在 所有男性不育的病因中弱精子症,少弱精 子症是最常见的因素.本文对少,弱精子 症患者和正常生育者精浆,精子和血清中 锌含量及血清性激素水平进行了检测和 分析,旨在探讨其在男性少,弱精子症病 因诊断中的临床意义. 中国计划生育学杂志2007年第6期总第140期 资料与方法 一 ,研究对象 275例少,弱精子症患者均来自本生殖中心门 诊,年龄22—40岁,平均不育年限6.5年,3次精液 常规检查按世界卫生组织(WHO)标准进行,符合 少,弱精子症的诊断标准. 二,样本收集 1.精液样本患者禁欲3—7d,手淫法取精液于 干燥消毒的量杯中,置于37%恒温水浴箱内液化. 按WHO精液参数检测方法检测.精液分析完成后, 离心15min,转速4000r/min.取分离后的精浆和精 子样本置一20?冻存待测. 2.血清样本上午8—9时空腹抽取患者静脉血 5ml于肝素抗凝的试管中,离心10min,转速3O00r/ min.取分离后的血清置一20?冻存待测. 三,研究方法 1.分组275例样本分为3组,弱精子症组.190 例,精子密度?20X10./ml,a级精子<25%,并且a +b级精子<50%;少弱精子症组85例,精子密度< 20X10./ml,a级精子<25%,并且a+b级精子< 50%;32例已生育且精液参数正常的健康男性为正 常生育组. 2.锌含量测定取解冻后的精子样本和0.5ml 精浆样本,分别加入0.5ml混酸(高氯酸和浓硝酸1 蒸水定容至5ml震荡混匀后检测.血清样本迅速解 冻后直接用三蒸水定容至15ml震荡混匀后检测.样 品检测采用日本岛津公司AA一6300原子吸收分光 光度计空气一乙炔火焰法,分析条件:灯电流 10.0mA,波长213.8nm,狭缝1.3nm. 3.激素检测采用放射免疫分析法检测3种血 清生殖激素,即卵泡刺激素(FSH),黄体生成素(LH) 和睾酮(T),操作步骤均按试剂盒进行.批内 差异为10%. 四,统计学方法 采用SPSS12.0统计软件进行方差分析. 结果 一 ,精液参数分析 3组精液参数分析结果,见表1. 二,精浆,精子和血清的锌含量 3组间精浆锌,血清锌含量无显着性差异(P> 0.05);少弱精子症组精子锌含量显着高于其它两组 (P<0.01);弱精子症组精子锌含量与正常生育组相 比无显着性差异(P>0.05).见表2. 三,血清生殖激素水平 弱精子症组与正常生育组相比FSH含量无显着 性差异(P<0.05),T,LH含量及T/LH有显着性差 异(P<0.05);少弱精子症组与正常生育组相比 FSH,T含量及T/LH有显着性差异(P<0.05),LH :2混合)消化,IO0~C加热至有机物完全溶解后,三含量具有统计学意义(P<0.01). 见表3. 表13组精液参数分析结果(?s) 组别例数FSH(U/L)LH(U/L)T(nmol/L)T/LH 与正常生育组相比P<O.05一P<O.O1 四,精浆锌与血清睾酮的相关性分析值为0.01738,显示为微弱的正相关性;少弱精子症 弱精子症患者精浆锌与血清睾酮的相关系数r患者精浆锌与血清T的相关系数r值为-0.0529,显 ? 353? 示为微弱的负相关性;正常生育组精浆锌与血清T的 相关系数r值为0.02348,显示为微弱的正相关陛.以 上结果显示精浆锌与血清T之间无明显的相关性. 讨论 锌和生殖激素在男性生殖系统中发挥着重要的 作用,与男性不育有着密切的关系.在男性泌尿生殖 系统中锌的含量很高,精液中的锌主要来自前列腺, 部分来自精囊及精子本身.前列腺分泌游离锌和枸 橼酸锌,射精时枸橼酸锌中的锌离子游离出来与不同 分子量蛋白结合,使游离锌下降J.精浆高分子量 蛋白结合锌的数量,是精浆螯合能力及锌生物利用度 的指标J.现已表明,锌对男性生殖系统具有以下 重要作用:维持性功能和性器官发育必不可少的物 质,通过影响下丘脑一垂体一睾丸性腺轴的功能,进 而影响性腺的发育及睾丸的生精功能;作为体内 200多种酶的辅助因子,与生殖系统的代谢密切相 关,尤其与生殖系统的多种脱氢酶活性密切相关,参 与精子的生成,成熟,获能及顶体反应过程;SOD 成分之一,具有抗氧化能力,可延缓细胞膜的脂质氧 化,以维持细胞的结构稳定性和生理通透性,从而使 精子具有较好的活动力;保持精子头尾连接,使精 子细胞核染色质免于过早解聚,从而有利于受精; 降低环境中铅,铬等金属可能引起的睾丸病理损害和 精子功能的损害_8J.锌还具有免疫抗炎作用,是前 列腺中重要的抗感染因子J.缺锌时,睾丸细胞的 DNA含量显着降低,性腺功能减退,血清睾酮水平和 精液量减少?..;精液中游离锌增加时,对精子运动有 明显毒性作用,可使精子尾部弯曲,锌及其氧化物可 抑制精子的糖酵解及氧化过程,致使精子活力下降. 基于锌与生殖系统的密切关系,近年来国内外许 多研究者对男性不育患者体内锌的状况做了广泛而 深人的研究,但结果存在一定的分歧.Chia等?2J 报道不育症患者精浆锌浓度显着低于生育组且精浆 锌浓度,与精子密度,运动性,活动力具有显着相关 性.Krupej等则报道少精子症患者和精子正常者 两组间精浆锌浓度无显着差异.Eggert—KI~Se等? 在对生育能力较低夫妇中挑选的无临床症状男性研 究后报道,精浆锌与精液质量参数如数量,运动性,形 态及每次射精后精子总数,成活率无显着联系.本研 究发现,190例弱精子症患者,85例少弱精子症患者 及32例正常生育者精浆锌含量无显着性差异,这可 能是本研究中测定的是精浆总锌,未将精浆游离锌分 离出来,总锌浓度可能并不能说明与精子相互作用的 锌.Carpino等?在对90例临床不育患者研究后发 ? 354? 中国计划生育学杂志2007年第6期总第140期 现,单纯性弱精子,少弱精子症患者及正常生育者的 总精浆锌浓度之间没有明显差别,但精浆高分子量蛋 白结合锌在单纯性弱精子症及少弱精子症中则显着 低于正常对照.未结合锌的增加,干扰了精子发生过 程中的能量代谢障碍?,或许这正是弱精子症和少 弱精子症患者精子活动度下降的原因.在本研究中, 3组精浆锌含量明显高于血清锌含量,且血清锌含量 在3组中无显着性差异,与文献报道一致?,该结果 可能提示血清锌含量与精液质量间无相关性.值得 注意的是,本研究中发现少弱精子症患者精子锌含量 显着高于弱精子症患者和正常生育者,而弱精子症患 者精子内锌与正常生育组无明显差异.Carpino 等纠对精子锌的研究报道支持了上述结果.在研究 精子锌的同时Carpino等还对精子膜功能的完整性 进行了低渗肿胀试验评分,结果显示少弱精子症患者 精子低渗肿胀试验评分显着低于正常对照,但低渗肿 胀试验评分高于50%的少弱精子症患者精子锌含量 与正常对照组并无明显差别.这一结果提示了少弱 精子症患者精子膜功能完整性的降低,过高的精子锌 含量反映了膜渗透性的受损.目前,有关精子锌的研 究尚少,有待深人. 睾丸精子的产生主要受生殖内分泌激素的调控, 垂体前叶分泌的FSH主要作用于睾丸曲细精管生精 上皮中的支持细胞,其与精子发生的启动及Sertoli细 胞的"紧密连接"密切相关.FSH虽对启动精子生成 过程是必不可少的,但血清FSH水平异常升高时, 常意味着生精上皮发生了不同程度的损伤;LH则主 要作用于睾丸间质细胞,与间质细胞膜受体结合后, 引起并维持间质细胞产生T,精子的发生需要高浓度 的雄激素环境?J.当FSH值明显升高,且伴有LH 值升高或正常,精液质量一般,判断生精功能有损害. 若同时伴有T/LH比值明显降低,可判断睾丸曲细 精管和间质细胞的同时损害?.本研究中少弱精子 症组FSH明显升高,且伴有LH值升高,T/LH比值 明显降低,这可能是由于睾丸曲细精管和间质细胞的 同时受损,导致生精障碍.而弱精子症组FSH无明 显变化,LH值升高及T/LH比值明显降低,这一结 果可能提示睾丸间质细胞某种程度的受损,雄激素水 平的降低导致精子运动能力的下降.有资料表明,临 床上采用小剂量雄激素治疗少弱精子症具有一定的 疗效?.因此,对弱精子,少弱精子症患者进行血清 生殖激素的检测具有一定的临床意义. Hunt等报道:锌可影响人垂体及血清中FSH, LH和T水平,低锌时出现性功能低下.本研究中也 p国计划生育学杂志2007年第6期总第140期 进行了精浆锌与血清T的相关性分析,结果显示精 浆锌与血清T之间无明显的相关性.精子发生是一 个复杂的过程,锌和血清激素对精子发生,成熟的作 用是多途径,多层次,多功能的.锌和血清激素间是 如何相互作用的,其机制尚不清楚,有待进一步深入 研究. 参考文献 1MainKM,SchmidtIM,ToppariJ,eta1.Earlypestnataltreatmentof hypogonadotropichypogonadismwitIIrecombinanthumanFSHandLH. 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[责任编辑:郭述金] 全自动琼脂糖凝胶电泳检测地中海贫血7500例结果分析 周艳洁阮丽明何桂琼何家全梁箫 摘要目的:探讨全自动琼脂糖凝胶电泳仪在地中海贫血(简称地贫)筛查中的应用. 方法:采用全自动琼脂糖凝 胶电泳仪对7500例标本进行Hb电泳,测定异常llb,}丑)及HbF含量,其中439例 同步做地贫基因检测.结果:7500 例中检出B地贫615例,异常Hb245例;439例电泳对比基因检测结果显示p地 贫,HbH病的电泳检测结果与基因检 测结果完全吻合,HbCS的检测结果吻合率达99.77%.以HbA?2.55%诊断dl地贫,敏感度和特异度分别为 88.9%和73.3%,以HbA42.65%诊断ot地贫敏感度和特异度分别为81.3%和66.3%.结论:全自动琼脂糖凝胶 电泳分辨率高,能准确分析出HbA,HbH,HbCS,HbF异常增高及其它异常Hb,能很 好诊断p地贫,HbH病和HbCS. 关键词血红蛋白琼脂糖凝胶电泳地中海贫血 ApplicationofFullAutomaticHemoglobinAgaroseElectrophoresisAnalysisoil7,500Cas esofThala.~semlaZhou YanJie,HeG~qiong,HeJiaquan,eta1.NanningPopulationandFamilyPlanningServiceCen ter,Guangxi530022 AbstractObjective:Toevaluatetheapplicationoffullautomatichemo~obinagaroseelectrop horesisinthediagnosisof 广西 收稿 修回 作者 阮丽明 何桂琼 何家全 梁箫 民办实事基金资助项目 口和计划生育服务中心 thalassemia.Methods:Fullautomatichemoglobinagarosee— lectrophoresiswasusedtoperformhemoglobin(I-Ib)electro- phoresisfor7,500cases,andtodeterminethecontentsof abnormalHb,HbA2andHbF.439Sampleswerefurtherex— stainedbyDNAanalysis.Results:Among7,500cases, 615casesweredetectedB—thalassemia(HbHA2morethan 4.O%).245caseswerefoundabnormalHb.In439cases, ? 355? 中中中中 务务务务服服服服育育育育生生生生制制喇喇 和栅栅和 人人人人 怛怛市市 .f卜'{丁宁宁 南南南南 区区区区 治治治治一一一一一 卜卜