葛花解酲汤药酒剂对酒精性肝损伤的保护作用

葛花解酲汤药酒剂对酒精性肝损伤的保护作用 探索性医学综合实验—教学改革与实践(第五期) 葛花解酲汤药酒剂对酒精性肝损伤的保护作用 周欣 华玲 陈琼 卓丽 孙晏舲 林娟 导师: 刘成海 [摘要]目的:探讨葛花解酲汤药酒剂对酒精性肝损伤的保护作用，并比较其与葛花解酲汤传统水煎剂的作用。:制备葛花解酲汤药酒剂与水煎剂。以药酒剂等浓度的白酒灌胃，诱导酒精性肝损伤大鼠模型，并于造模之日起以葛花解酲汤药酒剂及水煎剂分别预防给药，同时设立正常对照组。观察大鼠体重、肝重、脾重变化，试剂盒检测血清肝功能(ALT、AST与GGT水平，总蛋白、白蛋白与胆红素含量)，HE染色观察肝组织病理变化。结果:与模型对照组相比，葛花解酲汤药酒组大鼠体重明显增加，其差异具有统计学意义，血清ALT、AST水平显著降低(P<0.05);葛花解酲汤水煎剂预防组大鼠血清ALT亦有明显降低(P<0.05)。各组大鼠的肝体比、脾体比、GGT、总蛋白、白蛋白、胆红素无明显差异。模型组大鼠肝索紊乱，大量肝细胞肿胀水肿，轻微脂肪变性，大量酒精透明小体形成，汇管区炎细胞浸润明显。药酒预防组大鼠肝索排列正常，肝小叶轮廓清晰，细胞核圆而清晰，位于细胞中央。水煎剂预防组大鼠肝索轻度紊乱，轻微脂肪变性，较多酒精透明小体形成，汇管区轻微炎细胞浸润。结论:葛花解酲汤药酒剂可拮 更好。 抗酒精引起的肝损伤，且较葛花解酲汤水煎剂预防酒精性肝损伤的作用[关键词]葛花解酲汤;剂型;酒精性肝损伤;中草药;病理。 目前我国病毒性肝炎病源得到了较好的控制，发病率明显下降。但同时，脂肪肝、酒精肝、药肝等其他肝脏疾病的发病率却在逐渐上升，成为严重威胁我国人民生命健康的疾病。引起这一结果的原因很多，但是长期饮酒是其中最为主要的因素。临床研究与流行病学调查明，男性每天摄入酒精80g，女性20g以上[1]时，肝病发生率明显增多。目前认为，究竟性肝硬变为不可逆变，而酒精性脂肪肝在保证完全戒酒的情况下可以痊愈，即肝组织形态学改变和临床症状、体征[2]均可好转、恢复正常，但重新饮酒后会迅速发展成酒精性肝炎。 酒精可引起肝脏损害已经是全球医学界公认的事实。乙醇(酒精)进入肝细胞后，经肝细胞乙醇脱氢酶、过氧化氢分解酶和微粒体乙醇氧化酶氧化，形成乙醛。乙醛对肝细胞有明显的毒性作用，使其代谢发生障碍，导致肝细胞的变性和坏死。 目前社会上出现了所谓的解酒药，但专家认为，没有一种解酒药被证明为绝对安全有效，即使有些药物能使饮酒者从症状上有所缓解，但不能改变饮酒对肝脏造成损害这一事实，相当于先损害，再调养。究竟饮酒和保肝能否兼得,为了解答这个问题，我们根据中医“治未病”的思想，选取了中医药经典解酒方“葛花解酲汤”，一组制成水煎剂，另一组泡制成药酒，以此来比较此方不同剂型对酒精性肝损伤的保护作用。此次实验，目的在于给“饮酒与保肝同步”的想法提供实验依据。 1 实验材料 1.1实验动物来源 SD雄性大鼠40只，体重140g~160g，清洁级。上海中医药大学动物实验中心提供。动物一般状态良好，皮毛光泽，饮食与活动正常。2007年4月28日购入，于实验室正常喂养三天后，于5月1日开始实验性喂养。饲养方法:分笼喂养，每笼5只。每天早8:00和下午16:00进行两次灌胃，其余时间自由进食 157 探索性医学综合实验—教学改革与实践(第五期) 进水。 1.2药物 北京二锅头，酒精度为56? 葛花解酲汤，饮片购于上海中医药大学附属曙光东院中药房，按中医传统方法煎煮，滤液浓缩，含生药994g/L，放于冰箱保存。 葛花解酲汤药酒，饮片购于上海中医药大学附属曙光东院中药房，按中医传统方法置于北京二锅头中泡制，药(g):酒(L)=511:1 1.3检测试剂 ALT试剂盒 AST试剂盒、白蛋白试剂盒、总蛋白试剂盒 、总胆红素试剂盒、GGT试剂盒，均购自南京建成生物研究所 1.4主要仪器设备 M5多功能酶标仪、超速离心机、自动脱水剂(德国LEICA) 包埋机(德国LEICA)、轮转切片机(德国LEICA)、OLYMPUS IX70 倒置显微镜、OLYMPUS PM-30 全自动显微照相装置。 2 实验方法 2.1葛花解酲汤水煎剂的制备 人参、猪苓、白茯苓、橘皮各4.5g 木香1.5g 白术、干生姜、神曲(炒黄)、泽泻各6g 、青皮1g、缩砂仁、白豆蔻仁、葛花各15g，上述药物共20副， ，放于冰箱保存。 按中医传统方法煎煮，滤液浓缩，含生药994g/L 2.2葛花解酲药酒剂的制备 人参、猪苓、白茯苓、橘皮各4.5g 木香1.5g 白术、干生姜、神曲(炒黄)、 、青皮1g、缩砂仁、白豆蔻仁、葛花各15g，上述药物共20副，将泽泻各6g 药物切成3—5毫米的片剂或者段剂，放入竹篮后，快速过凉水后，直接将药物置于容器内。加入3.5L北京二锅头中密封浸泡，当药酒的颜色不再加深，表明药物的有效成分已经停止渗出，药酒浓度已达到最大。密封后的酒器应放置在阴冷避光处，适当搅动或晃动，使酒与药物能充分接触。每天搅动或摇晃1次，一星期后取上清酒液，药渣压榨后弃去，酒液静置过滤澄清，贮存在酒瓶中，取滤液，药(g):酒(L)=511:1，用酒精浓度测试仪将葛花解酲酒浓度调至56?(与北京二锅头一致)，放于冰箱保存。 2.3分组给药方法 将40只雄性大鼠随机分为四组每组十只。每天早晚各两次按0.75ml/100g的剂量灌服生理盐水。白酒对照组，每天早晚两次按0.75ml/100g的剂量灌服北京二锅头，复制酒精性肝损伤。醇浸药酒预防组(直接泡制)，每天早晚两次按0.75ml/100g的剂量灌服葛花解酲酒。水煎剂预防组，早晨按0.75ml/100g的剂量给大鼠灌服北京二锅头，下午首先按0.75ml/100g的剂量给大鼠灌服北京二锅头，待一个小时后，按1ml/100g的剂量灌服葛花解酲汤。于每次灌胃前后，观察大鼠皮毛、活动、食量、尿量、粪便情况。以上方法共持续14天，之后大鼠自然恢复11天。试验期间正常对照组、白酒对照组各死亡一只，水煎药物预防组死亡三只，共死亡五只。 2.4标本采集及制备 2.4.1大鼠取血、组织、及肝脾称重。实验至25天，大鼠禁食24h，称重，戊巴比妥钠麻醉，经下腔静脉穿刺取血5ml，然后剪断下腔静脉，迅速摘取肝脏和脾脏分别称重。每例均于肝的最大叶取材两块，分别置于10%甲醛中固定，用于制病理切片。将取材后的肝脏切碎，用液氮固定，置于-70?冰箱内保存。 2.4.2血清的制备。所取血液于洁净干燥玻璃试管内静置2小时后，用离心 158 探索性医学综合实验—教学改革与实践(第五期) 机分离血清，(3000prm，15min)，即得血清，集中待测。 2.5血清ALT、AST、GGT、白蛋白、总蛋白、总胆红素的测定 2.5.1血清ALT/GTP的测定方法及其原理。测定方法:赖氏法。设置测定管、对照管，按操作方法说明依次加入试剂，混匀，试问放置5分钟，505nm波长，蒸馏水调零，测各管OD值。计算公式为:测定管OD值—对照管OD值。查曲线，求得相应的ALT/GPT活力单位。标准曲线制备方法见是几何说明。 原理:谷丙转氨酶(ALT)在37?及PH7.4条件下，作用于丙氨酸及α-酮戊二酸组成的底物，生成丙酮酸及谷氨酸。反应30min后(固定时间)加入2，4-二硝基苯肼(DNPH)盐酸溶液，既终止反应，同时DNPH与酮酸中羰基加成，生成丙酮酸苯腙。苯腙在碱性条件下呈红棕色，于505nm比读吸光度及计算酶活力。 2.5.2 血清AST/GOT的测定方法及其原理 测定方法:赖氏法。设置测定管、对照管，按操作方法说明依次加入试剂，混匀，试问放置5分钟，505nm波长，蒸馏水调零，测各管OD值。计算公式为:测定管OD值—对照管OD值。查标准曲线，求得相应的AST/GOT活力单位。标准曲线制备方法见是几何说明书。 原理:AST/GOT能使α-酮戊二酸和天门冬氨酸移换氨基和酮基，生成谷氨 ，4-二酸和草酰乙酸。草酰乙酸在反应过程中可自行脱羧成丙酮酸。丙酮酸与2硝基苯肼反应生成2，4-二硝基苯腙，在碱性溶液中显红棕色。闭塞后，查标准曲线，可求得酶的活力单位。 2.5.3血清白蛋白的测定方法及其原理 测定方法:溴甲酚绿比色法。设置空白管、标准管和测定管，按照操作方法说明依次加入试剂，充分混匀，在室温中放置10分钟，628nm处，1cm光径，空白管调零，测各管OD值。计算公式为:蛋白含量(g/L)=(测定管OD值/标准管OD值)*白蛋白标准品浓度(g/L) 原理:白蛋白具有与阴离子染料结合的特性，在PH4.0左右，溴甲酚绿与白蛋白结合后，由黄色变成绿色，绿色的深浅与白蛋白深度成正比。 2.5.4血清总蛋白的测定方法及其原理 设置空白管、标准管和测定管，按照操作方法说明依次加入试剂，充分混匀，室温下放置30分钟后比色(550nm)，以空白管调零，读取各管OD值。计算公式为:血清总蛋白(g/L)=(测定管OD值/标准管OD值)*50 原理:蛋白质是由许多氨基酸通过肽键相互结合而成。肽键在碱性溶液中能与铜离子作用产生紫红色络合物。测定紫红色络合物的OD值，将能计算出血清中总蛋白含量。 2.5.5血清总胆红素的测定方法及其原理 测定方法:咖啡因法。设置空白管、测定管，按照操作方法说明依次加入试剂，充分混匀，600nm，1cm光径比色，空白管调零，读各管OD值。计算公式:血清总胆红素(μmol/L)=总胆红素管的OD值*288 原理:血清或血浆中的结合胆红素直接与中氮试剂反应产生偶氮胆红素，在同样条件下，有理胆红素须加加速剂是胆红素氢键破坏后与重担试剂反应，(咖啡因苯甲酸钠为加速剂)。重氮反应后，加入碱性酒石酸溶液，偶氮胆红素在此碱性条件下呈蓝色，吸收峰从585nm移到600nm，提高颜色反应的灵敏度。其它成分表现为黄色(主要是咖啡因)，混合颜色为绿色。 2.5.6血清GGT测定方法及其原理 159 探索性医学综合实验—教学改革与实践(第五期) 按照说明书配置好试剂，设置空白管、标准管和测定管，按照操作方法说明依次加入试剂，充分混匀，室温放置5分钟，530nm波长，1cm光径，蒸馏水调零，测各管OD值。计算公式:血清中γ-GT活力(U/100ml)=[(测定管OD值—空白管OD值)/(标准管OD值—空白管OD值)]*标准浓度(0.15μmol/ml)*100ml 3.统计处理 统计学处理方法计量资料采用单因素方差分析，检验。结果用均数和标准q 差表示，统计软件使用SPSS10.0版本。 4. 实验结果 4.1各组大鼠一般情况 正常对照组大鼠精力充沛，活泼好动，饮食正常，毛色光泽，体重日增，大便呈颗粒状。白酒对照组大鼠每次灌胃后先呈兴奋状态，表现为笼内奔跑、翻滚、攀越，偶见厮斗，大约经过半个多小时到一个小时后，开始酣睡，持续4—5个小时。灌胃时反抗明显，每日饮水增多，饮食减少。大鼠精神萎靡不振，饮食减少，形体消瘦，毛色欠光泽，大便稀软，渐不成形。 肉眼观察正常对照组大鼠肝脏表面颜色暗红，色泽鲜亮，硬度中等，白酒对照组大鼠肝脏表面颜色晦暗，质地略较粗硬，偶见有部分黄色肝组织。 4.2各组大鼠体重、肝脾重量变化 正常对照组大鼠体重增幅明显高于白酒对照组，差异有统计学意义(p<0.05)。与白酒对照组相比，药酒预防组(p<0.05)的处理能加大大鼠体重 >0.05);水煎剂预防组大鼠体增长的幅度;而与正常对照组相比无显著性差异(p 重增幅无明显差异(p>0.05) 经单因素方差分析，各组肝重与体重比值的差异无统计学意义(p〉0.05)。 经单因素方差分析，各组脾重与体重比值的差异无统计学意义(p〉0.05)。(见表1、图1) 表1 葛花解酲汤药酒剂与水煎剂对酒精性肝损伤大鼠体重与肝脾重量的影响 分组 n 体重增幅(g) 肝重/体重(%) 脾重/体重(‰) 正常对照组 9 103.88?22.95 3.4?0.21 2.71?0.46 白酒对照组 9 81.11?16.60* 3.4?0.1 2.97?0.31 水煎剂预防组 7 76.14?17.91 2.8?0.1 2.59?0.33 药酒预防组 10 97.40?8.21# 3.1?0.3 2.52?0.20 与正常对照组比, *p<0.05。与白酒对照组比 # p<0.05 图1 各组大鼠体重(g)的比较 140103.88?22.9512097.40?8.21#81.11?16.60*76.14?17.91100 80 60单位:g 40 20 0正常对照组白酒对照组水煎剂预防组药酒预防组 4.2.4 葛花解酲汤对于大鼠血清肝功能的影响 ALT AST 白蛋白总蛋白含量总胆红GGT 分组 n (U/ml) (U/ml) 含量 (g/L) 素 (U/100m 160 探索性医学综合实验—教学改革与实践(第五期) (g/L) (μmoll) /L) 正常对42.22?141.67?140.4240.42?5.414.15?37.57?9 照组 7.04 0.09 ?5.42 2 13.96 14.78 白酒对82.78?684.11?235.5735.57?2.926.85?43.71?9 照组 1.70* 3.84* ?2.90 0 44.63 18.97 水煎剂45.43?179.57?337.8937.89?4.27.59?441.57?7 预防组 9.17# 9.83 ?4.23 3 .59 21.23 药酒预137.70?153.30?337.2637.26?4.19.26?439.9?2防组 0 2.07# 5.92# ?4.18 8 .94 0.00 与正常对照组比* <0.05 。与白酒对照组比#<0.05 p p 图 3 各组大鼠血清ALT(U/ml)的比较 16082.78?61.70*140 120 100 8045.43?19.17#42.22?17.0437.70?12.07#60单位:U/ml40 20 0正常对照组白酒对照组水煎剂预防组药酒预防组 图 3 各组大鼠血清AST(U/ml)的比较 14079.57?39.8312084.11?23.84* 53.30?35.92#100 80 41.67?10.0960单位:U/ml40 20 0正常对照组白酒对照组水煎剂预防组药酒预防组 与正常对照组相比，白酒对照组大鼠血清ALT明显升高，其差异具有统计学意义(p<0.05)。与白酒对照组相比，水煎剂预防组(p<0.05)和药酒预防组(p<0.05)大鼠血清ALT无明显升高，有显著统计学意义。 与正常对照组相比，白酒对照组大鼠血清AST明显升高，其差异具有统计学意义(p<0.05)。与白酒对照组相比，药酒预防组(p<0.05)大鼠血清AST无明显升高，有显著统计学意义。水煎剂预防组大鼠血清AST相对于白酒对照组则无明显差异(p>0.05)。 4.3 各组大鼠肝脏病理变化 正常对照组:肝结构正常，肝索以中央静脉为中心向四周呈放射状排列，肝小叶轮廓清晰，肝细胞呈多边形，细胞分界清，核圆而清晰，位于细胞中央，胞 161 探索性医学综合实验—教学改革与实践(第五期) 质丰富。(见图一、图二) 白酒对照组:肝索紊乱，大量肝细胞肿胀水肿，轻微脂肪变性，大量酒精透明小体形成，汇管区炎细胞浸润明显。(见图三、图四) 水煎剂预防组:肝索轻度紊乱，轻微脂肪变性，较多酒精透明小体形成，汇管区轻微炎细胞浸润。(见图五、图六) 药酒预防组:肝索排列正常，肝小叶轮廓清晰，细胞核圆而清晰，位于细胞中央。偶见酒精透明小体。(见图七、图八) 5. 讨论 (1)乙醇的体内代谢特点 乙醇进入体内80%~90%经肝脏代谢。在肝内乙醇代谢产生乙酸经过两个氧化阶段，第一阶段由乙醇脱氢酶(ADH)和微粒体的乙醇氧化系统(MEOS)催化，第二阶段由乙醛脱氢酶(ALDH)催化。 肝内乙醇通过三种途径代谢氧化成乙醛。饮酒之后，首先启动0级经典途径，即通过细胞质内的ADH、过氧化小体内的触酶进行代谢;当乙醇浓度过高时，也启动一级代谢途径，即通过内质网内的MEOS进行代谢，通过这三种酶作用将乙醇氧化分解为乙醛。乙醛对于肝脏有直接毒性作用，可以造成肝细胞的变性坏死，而引发一系列的变化。因个体各自代谢活力不同而对乙醇的感受性亦异，故双亲遗传下来的基因决定着与生俱来的乙醇耐受性差别，也决定着肝细胞易损性的差别。酗酒后容易在肝内蓄积乙醛。 乙醛由ALDH代谢成乙酸，后者以乙酰CoA的形式进入三羧酸循环，氧化成二氧化碳和水。 (2)酒精性肝损伤的机制与特点 虽然体内吸收少量乙醇可被肝中的醇脱氢酶代谢产生乙醛，但过量乙醇可严重损害肝脏。 过去认为造成酒精性肝损伤时由于营养不良，但最近的研究证实，乙醇和乙醛是导致酒精性肝损伤的主要因素。研究认为，乙醇的肝毒性主要是由于乙醇脱氢酶接到过渡产生还原型腺嘌呤二核苷酸剂具有高度毒性的乙醛的结果。也就是说，宜春在以上氧化过程中脱下大量的氢，辅酶?(NAD)转变为还原型辅酶?(NADH)，NADH/NAD比值升高引起依赖于还原性NADH/NAD的物质代谢发生变化，成为代谢紊乱和治病的基础。 [3]酒精性肝损伤与AST、ALT的关系。ALT主要存在于肝细胞浆内，当肝细胞损伤时，细胞内转氨酶可进入血中，引起血ALT升高。阿斯塔耶存在于肝细胞浆内，AST并分布于线粒体内，当肝细胞损害严重时，线粒体内AST释放入血，使血清AST升高大于ALT。正常肝内转氨酶含量约为血中的100倍，所以肝脏实质性损害时，只要有1%的肝细胞淮西，就可使血清活性增加一倍;当细胞膜透过性增加日，及时无坏死，肝细胞内的转氨酶也可以顺浓度差而释放入血。因此转氨酶是肝细胞损害的敏感标志，也是乙醇所致肝损伤最敏感的指标。 酒精性肝损伤肝细胞镜下变化。肝组织切片肝小叶界限不清，肝细胞索为乱，肝窦变窄;肝细胞广泛浊重，胞浆、胞核淡染，胞浆内出现弥漫脂滴，有的细胞核结构模糊不清，实为肝细胞坏死。?肝细胞管广泛性空泡变形，部分肝细胞呈典型气球样变，多数细胞核固缩变形。 (3)酒精性肝损伤模型的建立 [6]1947年Emannal Rubin 等给非给饮用含酒精饮料，同时予以充足营养， 162 探索性医学综合实验—教学改革与实践(第五期) 经9个月~2年，成功复制出脂肪肝、肝炎直至肝硬化的模型，其超微结构变化与人类及其相似，第一次建立了酒精性肝病的理想模型。以后Robert J.Pamlosby[7]等采用横河猴也取得了成功。但是灵长类动物模型造模时间长，且代价较高，难以推广。 [8]国内河福金等率先利用酒精灌胃造模，研究中药对酒精性肝病的作用，伤。 (4)中医对于酒精性肝损伤的认识 对病名的认识。酒精性肝损伤在中医学中没有专属名词与之对应，但根据其病因、病理及临床特征，可将其归属于“伤酒”、“酒病”、“饮酒中毒”、“胁痛”、“酒癖”、“酒疸”、“酒鼓”等疾病的范畴。。张仲景在《金匮要略》黄疸病分类中提出了“酒疸”的病名。李东垣对长期饮酒中毒所引起的疾患，进行了“论酒客病”的专题讨论，并建立了葛花解酲汤这一解酒名方。巢元方在《诸病源候论》中首先提出了“酒癖”的病名，后世医家基本沿用。一般认为“酒癖”相当于西医学的中正酒精性肝炎或酒精性肝纤维化、硬化。而“胁痛”则可出现于酒精性肝损伤的各个阶段。“酒鼓”一般认为相当于酒精性肝炎硬化腹水期。 对病因的认识。长期饮酒耗伤正气，正气不足为发病的继发性内因。在隋?巢元方的《诸病源候论》中明确指出“酒性有毒，而复大热”，“酒者，水谷之精 ，气也，其剽悍而又大度，入胃则酒胀气逆，上逆于胸，内熏肝胆，故令肝浮胆横”确切论述了酒毒损伤肝胆的机制。 若素体禀赋不足，脾胃虚弱，或情志不畅、抑郁易怒乃至肝失疏泄，或夹杂其他邪气则会导致加重病情或提前发作。 对病机的认识。中医学认为，酒为大热大毒之品，少饮强身，过饮伤身。其主要病机可归纳为脾胃损伤，肝失疏泄，脾失健运，气机不畅，痰湿内生，湿热内阻，水湿内停，气血不和，气滞血瘀。 (5)葛花解酲汤作用研究进展 组成 人参、猪苓、白茯苓、橘皮各4.5g 木香1.5g 白术、干生姜、神曲(炒黄)、泽泻各6g 、青皮1g、缩砂仁、白豆蔻仁、葛花各15g 56度的白酒270g? 功效 理气健脾，分消酒湿。 主治 酒积伤脾证。眩晕呕吐，胸膈痞闷，食少体倦，小便不利，大便泻泄，舌苔腻，脉滑。现可用于饮酒过量致醉，或嗜酒成性者。 方解 过饮无度，湿热之毒积于肠胃。 葛花甘寒芳香，其性轻清发散，且独入阳明，令酒湿从肌肉而解，故为君。蔻仁、砂仁理气开胃醒脾，除痞闷，增[10]食欲;神曲解酒化食，尤善消酒食从小便而去，共为臣。木香、干姜调气而温中;青皮、陈皮除痰而疏滞;二苓、泽泻能驱湿热从小便出，乃内外分消之剂。以上共为佐药。 饮多则中气伤，故又加参、朮以补其气也。 药方来源 李东垣《脾胃论》《内外伤辨惑论》 (6)结论 酒精性肝损伤的发病原因:酒本水谷之精液酝酿而成，体湿性热，，其性彪悍，恣饮无度，耗伤正气，脾胃受伤，湿饮内阻，升降失常。其病位主要在肝脾，气血皆病。 分消酒湿，理气健脾之治法切中酒精性肝损伤的病因病机，葛花解酲汤药酒疗效确切。 葛花解酲酒相对于白酒可有效维持大鼠体重的增长。 葛花解酲酒预防酒精性肝损伤的机制:有效抑制肝细胞酒精透明小体的形 163 探索性医学综合实验—教学改革与实践(第五期) 成，控制血清ALT、AST肝功能指标的上升。且药酒预防组的疗效相对于水煎剂预防组较好，更说明了若仅仅在饮酒之后进行治疗，则其效果不如直接饮用葛花解酲汤药酒更能保护肝脏。 参考文献: 1. 王大骏. 酒精性肝病. 山西中医药杂志.1992;21(2):103 2. 蔡中起, 刘传民.酒精性肝病研究现状.临床肝胆病杂志，1995;11(2):63 3. 金静敏, 贾少谦,等.丹葛解酒茶对小鼠酒精性肝损伤血清ALT、AST的影响. 内蒙古中医药.2004,23(5):47-49. 4. 彭勃,苗明三,等. 橄榄解酒饮对大鼠急性酒精性肝损伤肝组织病理形态的影 响.中国医药学报 2004,19(8): 468-470. 5. 杨牧祥, 田元祥,等.解酒护肝饮对酒精性肝损伤大鼠血清和肝组织IL-8的 影响.中国中医基础医学杂志 . 2001,7(1): 30-32. 6. Rubin E,LieberCS.Fatty liver,alcoholic hepaitits and cirrhosis produced by alcohol in primates.N Engl J Med,1947:290:128 7. Pawlosky RJ ,Flynn BM,SalemN Jr.The effects of low dietary levels of polyunsaturates on alcohol-induced liver disease in rhesus monkeys.Hepatology.1997,26(6):1386 8. 何福金，贲长恩，王德福.小柴胡汤对大鼠酒精性肝损伤的防护作用.中西医 结合肝病杂志，1994，4(3):19 大鼠急性酒精性肝损伤模型分析。中日友好医院9. 赵静波，王泰玲，张晶，等. 学报，1996，10(1):17 10.邓文龙主编.中医方剂的药理与应用:440 11.刘春梅，李彤;解酒口服液的药理研究，长春中医学院学报，2003，19(3) 81,84 164 探索性医学综合实验—教学改革与实践(第五期) 附图 正常对照组(图一) 白酒对照组(图二) 葛花解酲水煎剂组(图三) 葛花解酲药酒组(图四) HE染色，X 200。 正常对照组(图五) 白酒对照组(图六) 葛花解酲水煎剂组(图七) 葛花解酲酒剂组(图八) HE染色，X 400。 165 探索性医学综合实验—教学改革与实践(第五期) 致 谢 在本论文付梓之际，首先，我们要对导师刘成海老师表达最诚挚的谢意。我们从对科学实验一片空白到形成初步认识，这离不开刘老师耐心细致的教导。在探索性课题完成过程中，导师给予诸多帮助。导师渊博的知识、严谨的学风和实事求是的态度，将使我们受益终生～ 衷心感谢肝病研究所的陶艳艳博士在我们学习、科研及论文撰写过程中给与的精心指导和热切关怀～ 感谢肝病研究所的诸位学长学姐在动物实验、指标测定和组织病理研究时给与我们的无私帮助～ 166