职业药师分章讲解1

职业药师分章讲解1 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 个条件，即挥发性、热稳定性和水不溶性（或虽可溶 于水，但经盐析后可被与水不相混溶的有机溶剂提出， 如麻黄碱）。凡能满足上述3个条件的中药化学成分 针对中药所含有效成分及共存杂质的性质，选择均可采用此法提取。如挥发油、挥发性生物碱（如麻 适当的溶剂，采用适宜的方法将有效成分从药材中提黄碱等）、小分子的苯醌和萘醌、小分子的游离香豆 取出来。需要掌握4个方面的问： 素等。 1.常用溶剂及性质 常用溶剂包括石油醚、苯、乙醚（Et2O）、氯仿 适用于具有升华性的成分的提取，如游离的醌类 （CHCl3）、乙酸乙酯（EtOAc）、正丁醇（n-BuOH）、成分（大黄中的游离蒽醌）、小分子的游离香豆素等， 丙酮（Me2O）、乙醇（EtOH或Alc）、甲醇（MeOH）、以及属于生物碱的咖啡因，属于有机酸的水杨酸、苯 水等，极性依次由小渐大。其中排在正丁醇以前的溶甲酸，属于单萜的樟脑等。 剂与水混合后能够分层，可用于从水溶液中萃取化学 成分，而丙酮、乙醇、甲醇与水混合后不分层。另外 象氯仿比水重、乙醚沸点低等一些基本知识，需要知 道。 1．结晶法 2．中药化学成分的极性 需要掌握结晶溶剂选择的一般原则及判定结晶纯 中药化学成分因分子结构的不同会现不同的极度的方法。 性。化合物极性的大小由分子中所含官能团的种类、 结晶溶剂选择的一般原则：对欲分离的成分热时 数目及排列方式等综合因素所决定。一般而言，中药溶解度大，冷时溶解度小；对杂质冷热都不溶或冷热 成分的分子越小，取代基的极性越强，极性基团的数都易溶。沸点要适当，不宜过高或过低，如乙醚就不 目越多，则该成分极性越大，亲水性越强。如何判断宜用。 某混合物中各成分的极性相对大小，是一个非常重要 判定结晶纯度的方法：理化性质均一；固体化合 的问题。 物熔距 ? 2?；TLC或PC展开呈单一斑点；HPLC或 3．溶剂提取法的基本原理——相似相溶原理 GC分析呈单峰。 “相似相溶原理”的“相似”指的是极性相似， 2．沉淀法 即所用溶剂的极性要与所提取成分的极性相似。一般， 可通过4条途径实现： 亲脂性强的溶剂，如石油醚，可提取亲脂性强的中药 1）通过改变溶剂极性改变成分的溶解度。常见的 成分，如油脂、挥发油、游离甾体和三萜类化合物；有水提醇沉法（沉淀多糖、蛋白质）、醇提水沉法（沉 氯仿或乙酸乙酯可提取游离生物碱、有机酸及黄酮苷淀树脂、叶绿素）、醇提乙醚或丙酮沉淀法（沉淀皂 元、香豆素苷元等中等极性化合物；丙酮或乙醇、甲苷）等。 醇可提取苷类、生物碱盐、鞣质等极性化合物；水可 2）通过改变溶剂强度改变成分的溶解度。使用较 提取氨基酸、糖等水溶性成分。 多的是盐析法，即在中药水提液中加入一定量的无机 4．提取方法 盐，使某些水溶性成分溶解度降低而沉淀出来。 溶剂法提取中药成分的常用方法有浸渍法、渗漉 3）通过改变溶剂pH值改变成分的存在状态。适法、煎煮法、回流提取法和连续回流提取法5种。其用于酸性、碱性或两性亲脂性成分的分离。如分离碱 中浸渍法和渗漉法属于冷提法，适用于对热不稳定的性成分的酸提碱沉法和分离酸性成分的碱提酸沉法。 成分的提取，但提取效率低于热提法，因此提取时间 4） 通过加入某种试剂与欲分离成分生成难溶性长、消耗溶剂多。含淀粉、果胶、粘液质等杂质较多的复合物或化合物。如铅盐沉淀法（包括中性醋酸铅 的中药提取可选择浸渍法。煎煮法、回流提取法和连或碱式醋酸铅）、雷氏盐沉淀法（分离水溶性生物碱）、 续回流提取法属于热提法，提取效率高于浸渍法、渗胆甾醇沉淀法（分离甾体皂苷）等。 漉法，但只适用于对热稳定的成分的提取。三法比较， 煎煮法只能用水作提取溶剂，回流提取法溶剂消耗量 较大，连续回流提取法节省溶剂，但提取液受热时间 1．液-液萃取 长。 选择两种相互不能任意混溶的溶剂，通常一种为 水，另一种为石油醚、乙醚、氯仿、乙酸乙酯或正丁 能够用水蒸气蒸馏法提取的中药成分必须满足3醇等。将待分离混合物混悬于水中，置分液漏斗中， 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 加适当极性的有机溶剂，振摇后放置，分取有机相或而不能被溶剂洗脱。如蒽醌类、黄酮类（葛根异黄酮 水相，即可将极性不同的成分分离。分离的难易取决除外）成分分离时一般不选择氧化铝。 于两种物质在同一溶剂系统中分配系数的比值，即分 3）活性炭吸附色谱 离因子。分离因子愈大，愈好分离。 活性炭为非极性吸附剂，其吸附规律与硅胶、氧 2．纸色谱（PC） 化铝恰好相反。对非极性物质具有较强的亲和力，在 属于分配色谱。可用于糖的检识、鉴定，亦可用水中对物质表现出强的吸附能力。常用于水溶液的脱 于生物碱的色谱鉴别等。 色素，也可用于糖、环烯醚萜苷的分离纯化等。 3．分配柱色谱 4）聚酰胺吸附色谱 可分为正相色谱与反相色谱。正相色谱固定相极 聚酰胺吸附属于氢键吸附，系通过其分子中众多 性大，流动相极性小，可用于分离水溶性或极性较大的酰胺羰基与酚类、黄酮类化合物的酚羟基，或酰胺 的成分。反相色谱与此相反，适宜分离脂溶性化合物。 键上的游离胺基与醌类、脂肪羧酸上的羰基形成氢键 缔合而产生吸附。因此，聚酰胺吸附色谱特别适合分 离酚类、醌类和黄酮类化合物。聚酰胺对被分离物质 1.透析法 吸附力的大小取决于被分离物质分子结构中可与聚酰 适用于水溶性的大分子成分（如蛋白质、多肽、胺形成氢键缔合的基团数目及氢键作用强度。同时， 多糖）与小分子成分（如氨基酸、单糖、无机盐）的溶剂也会影响聚酰胺对被分离物质的吸附，表现出各 分离。 种溶剂在聚酰胺吸附色谱中洗脱能力有大有小，其由 2.凝胶过滤法 弱到强的大致顺序为水、甲醇、丙酮、氢氧化钠水溶 又称凝胶渗透色谱、分子筛过滤、排阻色谱。分液等。 离混合物时，各组分按分子由大到小的顺序先后流出 5）大孔吸附树脂吸附色谱 并得到分离。常用凝胶有葡聚糖凝胶（Sephadex G） 大孔吸附树脂同时具有吸附性和分子筛性。一般 和羟丙基葡聚糖凝胶（Sephadex LH-20）。前者只适非极性化合物在水中易被非极性树脂吸附，极性物质 于在水中应用。后者既可在水中应用，又可在有机溶在水中易被极性树脂吸附。物质在溶剂中的溶解度大， 剂中应用，分离混合物时，既有分子筛作用，又有吸树脂对此物质的吸附力就小，反之就大。对非极性大 附作用。如分离游离黄酮时，主要靠吸附作用；分离孔吸附树脂来说，洗脱溶剂极性越小，洗脱能力越强。 黄酮苷时，则分子筛的性质起主导作用。 该法可用于皂苷类成分的纯化分离。 3.超滤法 4.超速离心法 1）离子交换法适用于酸性、碱性或两性成分的分 离，即被分离物质在水（或酸水，或碱水）溶液 在中药化学成分分离及精制工作中，应用较多的中呈解离状态。 是固液吸附，其中涉及吸附剂、被分离物质和洗脱剂3 2）根据被分离物质呈解离状态时所带电荷的性 个要素。按常用吸附剂的不同，大致可分为以下几种。 质，可选择阴离子交换树脂或阳离子交换树脂。鉴于 1）硅胶吸附色谱 中药所含大多数酸性、碱性或两性成分的酸碱性均较 硅胶为极性吸附剂，吸附力的大小取决于被分离弱，一般在分离碱性成分时选择强酸性的阳离子交换 物质的极性（极性越大，吸附力越强）和洗脱溶剂的树脂，在分离酸性成分时选择强碱性的阴离子交换树 极性（溶剂极性越弱，硅胶对被分离物质的吸附能力脂。 越强）。因此，用硅胶吸附色谱分离一组极性不同的 3）通过选择阴离子交换树脂和阳离子交换树脂， 混合物时，极性大的物质因吸附力大而洗脱慢；洗脱可将中药水提物中酸性、碱性、两性和中性成分进行 溶剂的极性增大，洗脱能力增强，洗脱速度加快。另分离。 外硅胶有一定的酸性，在用其分离碱性成分时，需注 4）离子交换法亦可用于相同电荷离子的分离，其 意。 分离的依据是解离程度的不同（酸性或碱性不同的化 2）氧化铝吸附色谱 合物，在相同条件下，其解离程度会有差异）。解离 氧化铝亦为极性吸附剂，其吸附规律与硅胶相似。程度越大，被洗脱下来的速度越慢。 不同的是，氧化铝有一定的碱性，且具有铝离子，在 用其分离一些酸性或酚性成分时，易产生不可逆吸附 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 1．什么是生物碱？其在植物界的分布规律及在植光性影响其生理活性，通常左旋体的生理活性强于右 物体内的存在形式有哪些？ 旋体。 生物碱是指一类来源于生物界（以植物为主）的 含氮有机化合物。多数生物碱分子具有较复杂的环状 结构，且氮原子在环状结构内，大多呈碱性，一般具 4．生物碱的溶解性有何规律？ 有生物活性。但有些生物碱并不完全符合上述生物碱 1）亲脂性生物碱易溶于亲脂性有机溶剂（如氯仿、 的含义，如麻黄碱的氮原子不在环内，咖啡不显碱性乙醚），可溶于醇类溶剂，难溶于水；生物碱盐难溶 等。 于亲脂性有机溶剂，可溶于醇类溶剂，易溶于水。 分布规律：（1）绝大多数生物碱分布在高等植物， 2）季铵型生物碱难溶于亲脂性有机溶剂，可溶于 尤其是双子叶植物中，如毛茛科、罂粟科、防己科、醇类溶剂，易溶于水、酸水、碱水。 茄科、夹竹桃科、芸香科、豆科、小檗科等。（2）极 3）一些小分子生物碱既可溶于水，也可溶于氯仿， 少数生物碱分布在低等植物中。（3）同科同属植物可如麻黄碱、苦参碱、秋水仙碱等。 能含相同结构类型的生物碱。（4）一种植物体内多有 4）具有羧基的生物碱，可溶于碱水，如碳酸氢钠 数种或数十种生物碱共存，且它们的化学结构有相似水溶液；具有酚羟基的生物碱，可溶于苛性碱溶液， 之处。 如吗啡、青藤碱。 存在形式：有机酸盐、无机酸盐、游离状态、酯、 5）具有内酯（或内酰胺）结构的生物碱可溶于热 苷等。 苛性碱溶液，如喜树碱。 2．生物碱的常见结构类型有哪些？ 5．生物碱的碱性大小如何表示？影响生物碱碱性 这一部分内容需要结合后面的重点中药（如麻黄、大小的因素有哪些？ 黄连、洋金花、苦参、汉防己、马钱子、乌头等）中 生物碱的碱性大小用pKa（生物碱的共轭酸的解离所含的生物碱的结构类型去掌握。重要类型包括： 常数的负对数）表示，pKa大，生物碱的碱性强。此处 吡啶类：主要是喹喏里西啶类（苦参所含生物碱，需要注意pKa、pKb、Ka、Kb四者之间的相互关系，它如苦参碱）。 们与生物碱碱性大小的关系为：pKa大、pKb小、Ka小、 莨菪烷类：洋金花所含生物碱，如莨菪碱。 Kb大，生物碱的碱性强，反之则弱。 异喹啉类：主要有苄基异喹啉类（如罂粟碱）、 影响生物碱碱性大小的因素包括： 双苄基异喹啉类（汉防己所含生物碱，如汉防己甲素）、 1）N原子的杂化方式：SP3氮大于SP2氮大于SP原小檗碱类（黄连所含生物碱，如小檗碱）和吗啡类氮 （如吗啡、可待因）。 2）电效应： 吲哚类：主要有色胺吲哚类（如吴茱萸碱）、单 诱导效应：烷基的供电子诱导效应使碱性增强； 萜吲哚类（马钱子所含生物碱，如士的宁）、二聚吲苯基、羰基、酯基、醚基、羟基、双键（含双键或氧 哚类（如长春碱、长春新碱）。 原子的基团）的吸电子诱导效应使碱性降低。 萜类：乌头所含生物碱（如乌头碱）、紫杉醇。 共轭效应：大部分共轭效应使碱性降低，其中苯 甾体：贝母碱 胺型、酰胺型生物碱碱性降低明显，如胡椒碱、秋水 有机胺类：麻黄所含生物碱，如麻黄碱、伪麻黄仙碱、咖啡碱；烯胺型生物碱大部分碱性降低，个别 碱。 碱性增强，如蛇根碱。 3．生物碱的物理性质有哪些？ 3）空间效应：碱性降低，如叔胺碱的碱性一般弱 这一部分内容需要重点掌握某些生物碱特殊的物于仲胺碱。东莨菪碱碱性小于莨菪碱，甲基麻黄碱的 理性质，主要包括： 碱性小于麻黄碱即是因为这个缘故。 液体生物碱：烟碱、槟榔碱、毒藜碱。 4）氢键效应：碱性增强，如麻黄碱的碱性小于伪 具挥发性的生物碱：麻黄碱、伪麻黄碱。 麻黄碱。 具升华性的生物碱：咖啡因 6．进行生物碱沉淀反应时需注意什么问题？ 具甜味的生物碱：甜菜碱 1）常用沉淀试剂：碘化物复盐、重金属盐、大分 有颜色的生物碱：小檗碱、蛇根碱、小檗红碱。 子酸，其中碘化铋钾试剂（Dragendorff试剂）最为常 另外需注意生物碱的旋光性受多种因素的影响，用。雷氏铵盐试剂可用于水溶性生物碱的分离。 如溶剂、pH值、生物碱存在状态等。同时生物碱的旋 2）反应条件：稀酸水溶液。 3）假阳性：蛋白质、多肽、鞣质等可引起假阳性， 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 需净化。净化方法为酸水提取液碱化后氯仿萃取，氯强。由于伪麻黄碱的共轭酸与 C2-OH形成分子内氢键仿萃取液再用酸水萃取，取酸水萃取液进行沉淀反应。 稳定性大于麻黄碱，所以伪麻黄碱的碱性强于麻黄碱。 4）假阴性：麻黄碱、咖啡碱与多数生物碱沉淀试 溶解性：由于麻黄碱和伪麻黄碱的分子较小，其 剂不能发生沉淀反应。 溶解性与一般生物碱不完全相同，既可溶于水，又可 5）应用：生物碱预识；生物碱提取、分离、纯化；溶于氯仿，但伪麻黄碱在水中的溶解度较麻黄碱小。 生物碱检识（薄层或纸层色谱显色剂）。 B17 麻黄碱和伪麻黄碱形成盐以后的溶解性能也不完全相 同，如草酸麻黄碱难溶于水，而草酸伪麻黄碱易溶于 水；盐酸麻黄碱不溶于氯仿，而盐酸伪麻黄碱可溶于 刘 斌（北京中医药大学中药学院） 氯仿。 10．苦参生物碱的结构类型是什么？其理化性质 （3）鉴别反应 和提取分离方法有哪些？ 麻黄碱和伪麻黄碱不能与大数生物碱沉淀试剂发 （1）结构类型 生反应，但可用下述反应鉴别： 苦参所含生物碱主要是苦参碱和氧化苦参碱。此 二硫化碳-硫酸铜反应 属于仲胺的麻黄碱和伪外还含有羟基苦参碱、N-甲基金雀花碱、安那吉碱、麻黄碱产生棕色沉淀。属于叔胺的甲基麻黄碱、甲基 巴普叶碱和去氢苦参碱（苦参烯碱）等。这些生物碱伪麻黄碱和属于伯胺的去甲基麻黄碱、去甲基伪麻黄 都属于喹喏里西啶类衍生物。分子中均有2个氮原子，碱不反应。 一个是叔胺氮，一个是酰胺氮。 铜络盐反应 麻黄碱和伪麻黄碱的水溶液加硫酸 （2）理化性质 铜、氢氧化钠，溶液呈蓝紫色。 碱性：苦参中所含生物碱均有两个氮原子。一个 （4）提取分离 为叔胺氮（N-1），呈碱性；另一个为酰胺氮（N-16）， 溶剂法：利用麻黄碱和伪麻黄碱既能溶于水，又 几乎不显碱性，所以它们只相当于一元碱。苦参碱和能溶于亲脂性有机溶剂的性质，以及麻黄碱草酸盐比 氧化苦参碱的碱性比较强。 伪麻黄碱草酸盐在水中溶解度小的差异，使两者得以 溶解性：苦参碱的溶解性比较特殊，不同于一般分离。方法为麻黄用水提取，水提取液碱化后用甲苯 的叔胺碱，它既可溶于水，又能溶于氯仿、乙醚等亲萃取，甲苯萃取液流经草酸溶液，由于麻黄碱草酸盐 脂性溶剂。氧化苦参碱是苦参碱的氮氧化物，具半极在水中溶解度较小而结晶析出，而伪麻黄碱草酸盐留 性配位键，其亲水性比苦参碱更强，易溶于水，难溶在母液中。 于乙醚，但可溶于氯仿。 水蒸汽蒸馏法：麻黄碱和伪麻黄碱在游离状态时 极性：苦参生物碱的极性大小顺序是：氧化苦参具有挥发性，可用水蒸汽蒸馏法从麻黄中提取。 碱＞羟基苦参碱＞苦参碱。 离子交换树脂法：利用生物碱盐能够交换到强酸 （3）提取分离 型阳离子交换树脂柱上，而麻黄碱的碱性较伪麻黄碱 苦参以稀酸水渗漉，酸水提取液通过强酸性阳离弱，先从树脂柱上洗脱下来，从而使两者达到分离。 子交换树脂提取总生物碱。苦参碱和氧化苦参碱的分 离，利用二者在乙醚中的溶解度不同进行。 北京中医药大学中药学院 刘 斌 11．麻黄生物碱的结构类型是什么？其理化性质、 12．黄连生物碱的结构类型是什么？小檗碱有何 鉴别反应和提取分离方法有哪些？ 主要理化性质和鉴别反应？ （1）结构类型 （1）结构类型 麻黄中含有多种生物碱，以麻黄碱和伪麻黄碱为 黄连生物碱主要包括小檗碱、巴马丁、黄连碱、 主，其次是甲基麻黄碱、甲基伪麻黄碱和去甲基麻黄甲基黄连碱、药根碱、木兰碱等，均属于苄基异喹啉 碱、去甲基伪麻黄碱。麻黄生物碱分子中的氮原于均衍生物，除木兰碱为阿朴菲型外都属于原小檗碱型， 在侧链上，属于有机胺类生物碱。麻黄碱和伪麻黄碱且都是季铵型生物碱。其中以小檗碱含量最高（可达 属仲胺衍生物，且互为立体异构体，它们的结构区别10%），有抗菌、抗病毒作用。 在于 Cl的构型不同。 （2）小檗碱的理化性质 （2）理化性质 1）性状 小檗碱为黄色针状结晶，加热至110? 挥发性：麻黄碱和伪麻黄碱的分子量较小，具有变为黄棕色，于160?分解。盐酸小檗碱加热至220? 挥发性。 分解，生成红棕色的小檗红碱。 碱性：麻黄碱和伪麻黄碱为仲胺生物碱，碱性较 2）碱性 小檗碱属季铵型生物碱，可离子化而呈 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 强碱性，其pKa值为11.50。 倪 健 3）溶解性 游离小檗碱能缓缓溶解于水中，易溶 3.苷类化合物的一般性状、溶解性、旋光性、显 于热水或热乙醇，在冷乙醇中溶解度不大。小檗碱的色反应如何？ 盐酸盐在水中的溶解度较小，较易溶于沸水，难溶于 （1)一般性状：苷类多是固体，其中糖基少的可 乙醇。小檗碱与大分子有机酸，如甘草酸、黄芩苷、结晶，糖基多的如皂苷，则多呈具有吸湿性的无定形 大黄鞣质等结合，形成的盐在水中的溶解度都很小。 粉末。苷类一般是无味的，但也有很苦的和有甜味的。 4）互变异构 小檗碱一般以季铵型生物碱的状态 （2）溶解性：苷类的亲水性与糖基的数目有密切 存在，可以离子化呈强碱性，能溶于水，溶液为红棕的关系，其亲水性往往随糖基的增多而增大，大分子 色。但在其水溶液中加入过量强碱，季铵型小檗碱则苷元如甾醇等的单糖苷常可溶于低极性有机溶剂，如 部分转变为醛式或醇式，其溶液也转变成棕色或黄色。果糖基增多，则苷元所占比例相应变小，亲水性增加， 醇式或醛式小檗碱为亲脂性成分，可溶于乙醚等亲脂在水中的溶解度也就增加。因此用不同极性的溶剂顺 性有机溶剂。 次提取时，在各提取部位都有发现苷的可能。C-苷与 （3）小檗碱的鉴别反应 O-苷不同，无论在水或其他溶剂中的溶解度一般都较 小檗碱除了能与一般生物碱沉淀试剂产生沉淀反小。 应外，还具有两个特征性检识反应。 （3）旋光性：多数苷类呈左旋光性，但水解后， 1）丙酮加成反应 在强碱性下，盐酸小檗碱可与由于生成的糖常是右旋的，因而使混合物呈右旋光性， 丙酮反应生成黄色结晶性小檗碱丙酮加成物。 比较水解前后旋光性的变化，可用以检识苷类的存在。 2）漂白粉显色的反应 在小檗碱的酸性水溶液中 （4）显色反应：Molish反应。Molish试剂由浓加入适量的漂白粉（或通入氯气），小檗碱水溶液即硫酸和α-萘酚组成。可检识糖和苷的存在。 由黄色转变为樱红色。 4.苷类化合物苷键裂解方法有哪些？ 13．汉防己生物碱的结构类型是什么？有何主要 通过苷键的裂解反应可使苷类化合物苷键切断， 理化性质？如何提取分离？ 其目的在于了解组成苷类的苷元结构及所连接的糖的 （1）结构类型 种类和组成，决定苷元与糖的连接方式及糖与糖的连 汉防己甲素和汉防己乙素均为双苄基异喹啉衍生接方式。苷类化合物苷键裂解方法主要包括以下几种。 物，氮原子呈叔胺状态；轮环藤酚碱为季铵型生物碱。 （1）酸催化水解 （2）理化性质 苷键具有缩醛结构，易为稀酸催化水解。反应一 1）碱性 汉防己甲素和汉防己乙素分子结构中均般在水或稀醇溶液中进行。常用的酸有盐酸、硫酸、 有两个处于叔胺状态的氮原子，碱性较强。轮环藤酚乙酸、甲酸等。水解反应是苷原子先质子化。然后断 碱属于原小檗型季铵碱，具强碱性。 键生成阳碳离子或半椅型中间体，在水中溶剂化而成 2）溶解性 汉防己甲素和汉防己乙素亲脂性较糖。 强，具有脂溶性生物碱的一般溶解性。但由于两者分 酸催化水解的难易与苷键原子的电子云密度及其 子结构中取代基的差异，前者为甲氧基，后者为酚羟空间环境有密切的关系，只要有利于苷键原子的质子 基，故汉防己甲素的极性较小，能溶于冷苯；汉防己化就有利于水解，其水解难易的规律可概括为： 乙素极性较大，难溶于冷苯。轮环藤酚碱为水溶性生 ?按苷键原子不同，酸水解的易难顺序为：N-苷物碱，可溶于水、甲醇、乙醇，难溶于乙醚、苯等亲＞O-苷＞S-苷＞C-苷。 脂性有机溶剂。 ?呋喃糖苷较吡喃糖苷易水解。 （3）提取分离 ?酮糖较醛糖易水解。 汉防己用乙醇提取得总生物碱，然后根据各成分 ?吡喃糖苷中吡喃环的C-5上取代基越大越难水溶解性和极性的差异进行分离。将总生物碱溶于稀酸解，因此五碳糖最易水解，其顺序为五碳糖＞甲基五 水，利用汉防己甲素和汉防己乙素在苯中溶解度的差碳糖＞六碳糖＞七碳糖。如果接有-COOH，则最难水解。 异，碱化后用苯萃取出汉防己甲素，再用氯仿萃取出 ?氨基糖较羟基糖难水解，羟基糖又较去氧糖难 汉防己乙素；轮环藤酚碱为水溶性生物碱，仍留在碱水解。 水层。汉防己甲素和汉防己乙素的分离也可采用氧化 ?芳香属苷，如酚苷因苷元部分有供电子结构， 铝柱色谱，利用其极性的差异进行分离，汉防己甲素水解比脂肪属苷如萜苷、甾苷容易得多。 极性小，先被洗脱，而汉防己乙素极性大，后被洗脱。 ?苷元为小基团者，苷键横键的比苷健竖键的易 水解，因为横键上原子易于质子化。苷元为大基团者， 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 苷键竖键的比横键的易水解，因为苷的不稳定性促使四氮唑盐试剂；苯胺-邻苯二甲酸盐试剂；3，5-二羟水解。 基甲苯—盐酸试剂；过碘酸加联苯胺试剂等。 ?N- 苷易接受质子，但当N原子处于嘧啶或酰胺 （2）薄层色谱 位置时，N-苷也难于用矿酸水解。 糖的极性大，在硅胶薄层上进行层析时，点样不 （2）碱催化水解 宜过多（一般少于5μg）。若点样太多，斑点就会明 仅酯苷、酚苷、烯醇苷和β-吸电子基取代的苷等显拖尾，Rf值也下降，使一些Rf值相近的糖难以获得才易为碱所水解。 满意的分离。若硅胶用0.03mol/L硼酸溶液或一些无 （3）酶催化水解 机盐（主要是强碱与弱或中等强度的酸所成的盐）的 酶催化反应具有专属性高，条件温和的特点。常水溶液代替水调制吸附剂涂铺薄层，则样品承载量可 用的酶有转化糖酶，水解β-果糖苷健。麦芽糖酶专使明显增加，分离效果也有改善。 α-葡萄糖苷键水解。杏仁苷酶是一种β-葡萄糖苷水 （3） 气相色谱 解酸，专属性较低，水解一般β-葡萄糖苷和有关六碳 （4） 离子交换色谱 醛糖苷。纤维素酶也是β-葡萄糖苷水解酶。 （5） 液相色谱 pH条件对酶水解反应是十分重要的，芥子苷酶水 7.研究苷类化合物结构时，糖链的结构研究内容 解芥子苷，在pH7时酶解生成异硫氰酸酯类，在pH3～及相应的研究方法有哪些？ 4时酶解生成腈和硫黄。 研究苷类化合物结构时，糖链的结构研究主要解 （4）氧化开裂法 决三个问题：单糖的组成；糖与糖的连接位置和顺序； Smith裂解是常用的氧化开裂法。特别适用于一般苷键的构型。 酸水解时苷元结构容易改变的苷以及难水解的C-苷。 （1）单糖的组成鉴定 但不适用于苷元上有1，2-二醇结构的苷类水解。 一般是将苷键全部酸水解，然后用纸色谱检出单 Smith裂解反应分3步：过碘酸钠氧化、四氢硼钠糖的种类。采用薄层扫描法或气相色谱法测定各单糖 还原、稀酸水解。 的分子比。 从Smith裂解得到的多元醇，可确定苷中糖的 （2） 单糖之间连接位置的确定 类型。如六碳糖苷（如葡萄糖、甘露糖、半乳糖）Smith 将苷全甲基化，然后水解苷键，鉴定所有获得的 裂解得到的多元醇为丙三醇；五碳糖苷（如阿拉伯糖、甲基化单糖，其中游离的羟基所在位置就是连接位置。 木糖）Smith裂解得到的多元醇为乙二醇；甲基五碳糖注意水解条件应尽可能温和，否则会发生去甲基化反 苷（如鼠李糖）Smith裂解得到的多元醇为1，2-丙二应和降解反应。 醇。 目前单糖之间的连接位置多用13CNMR中的苷化位B17 移来确定。 （3）糖链连接顺序的确定 北京中医药大学中药学院 刘 斌 早期决定糖连接顺序的方法主要是缓和酸水解， 5.提取苷类化合物时，应注意什么问题？ 酶水解，乙酰解，碱水解等方法，将苷的糖链水解成 提取原生苷时，必须设法抑制或破坏酶的活性。较小的片段（各种低聚糖），然后分析这些低聚糖的 一般常用方法是在中药中加入碳酸钙，或采用甲醇、连接顺序。质谱分析也可用于糖链连接顺序的研究。 乙醇或沸水提取。同时尽量避免与酸、碱接触。提取如在快原子轰击质谱（FABMS）中有时会出现苷分子中次生苷时要利用酶的活性。 依次脱去末端糖的碎片离子峰。此外，目前NOE差谱 采用溶剂萃取法分离时，一般可用乙醚或氯仿萃技术、HMBC谱也可用于糖链连接顺序的确定。 取得到苷元，用醋酸乙酯萃取得到单糖苷，用正丁醇 （4） 苷健构型的确定 萃取得到多糖苷。 ?利用酶水解进行测定 6.研究苷类化合物结构时，糖的鉴定方法有哪 如麦芽糖酶能水解的为α-苷键，而杏仁苷酶能水些？ 解的为β-苷键。但必须注意并非所有的β-苷键都能 （1） 纸色谱 为杏仁苷酶所水解。 糖类的纸色谱常用水饱和的有机溶剂展开，其中 ?利用Klyne经验进行计算 以正丁醇-乙醇-水和水饱和的苯酚两种溶剂系统应用 Δ[M]D=[M]D 苷— [M]D苷元 最为普遍。 ?利用NMR进行测定 糖类的纸色谱常用显色剂有：硝酸银试剂；三苯 1HNMR：葡萄糖β-苷键JH1-H2=6～8Hz，α-苷键 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 JH1-H2=3～4Hz。鼠李糖、甘露糖不能用上法鉴别。 生成氧化蒽酚及其互变异构体蒽二酚，氧化蒽酚及蒽 13CNMR：1JC1-H1=170Hz（α-苷键），二酚均不稳定，氧化蒽酚易氧化成蒽酮或蒽酚，蒽二 1JC1-H1=160Hz（β-苷键）。 酚易氧化成蒽醌。 8.苦杏仁苷有何主要理化性质？如何鉴别？ 3、蒽酚或蒽酮类。蒽醌在酸性溶液中被还原，则 苦杏仁苷是一种氰苷，易被酸和酶所催化水解。生成蒽酚及其互变异构体蒽酮。 水解得到的苷元α-羟基苯乙腈很不稳定，易分解生成 4、C-糖基蒽类。 苯甲醛和氢氰酸。因此小剂量口服苦杏仁苷，由于生 （二）双蒽核类 成α-羟基苯乙腈，并进而释放出少量氢氰酸，对呼吸 l、二蒽酮类衍生物。二蒽酮以苷的形式存在。若 中枢呈镇静作用，而具有镇咳作用。但大剂量口服，催化加氢还原则生成二分子蒽酮，用FeCl3氧化则生则可产生中毒症状。 成二分子蒽醌。大黄、番泻叶中致泻的主要成分番泻 鉴别苦杏仁苷时，可利用其水解产生的苯甲醛。苷A、B、C、D等皆为二蒽酮类衍生物。 苯甲醛不仅具有特殊的香味，而且可使三硝基苯酚试 二蒽酮类化合物C10-C10'键易于断裂，生成蒽酮纸显砖红色。以此鉴定苦杏仁苷的存在。B17 类化合物。大黄中致泻的主要成分番泻苷A，就是因其 在肠内转变为大黄酸蒽酮而发挥作用。 北京中医药大学中药学院 刘 斌 2、二蒽醌类。 3、去氢二蒽酮类。 中药中含有的醌类化合物从结构上分主要有苯 1、性状。醌类化合物如无酚羟基，则近乎无色。 醌、萘醌、菲醌、蒽醌等四类。 随着助色团酚羟基的引入而表现出一定的颜色。引入 一、苯醌类。可分为邻苯醌和对苯醌两大类，前的助色团越多，颜色越深。天然醌类多为有色晶体。 者不稳定，天然存在者以后者为多见。软紫草中含有苯醌及萘醌多以游离状态存在，蒽醌往往结合成苷。 的arnebinol、arnebinone属于此类，具有抑制前列 2、升华性。游离的醌类多具升华性，小分子的苯 腺素PGE2生物合成的作用。 醌类及萘醌类具有挥发性，能随水蒸气蒸馏。 二、萘醌类。紫草及软紫草中的紫草素、异紫草 3、溶解性。游离醌类多溶于乙醇、乙醚、苯、氯 素属于萘醌化合物，为紫草的有效成分，具有止血、仿等有机溶剂，微溶或不溶于水。而醌类成苷后，极 抗炎、抗菌、抗病毒及抗癌作用。 性增大，易溶于甲醇、乙醇、热水，几乎不溶于苯、 三、菲醌类。丹参含有多种菲醌衍生物，其中丹乙醚等非极性溶剂。 参醌?A、丹参?B、隐丹参醌、丹参酸甲酯、羟基丹 参醌?A等为邻醌类衍生物，丹参新醌甲、丹参新醌乙、 醌类化合物多具有酚羟基，呈酸性，易溶于碱性 丹参新醌丙为对醌类化合物。丹参醌类结构上具有菲溶剂。分子中酚羟基的数目及位置不同，酸性强弱也 醌母核，但生源属于二萜类。 不一样。一般规律如下： 丹参菲醌类成分的鉴别可用浓硫酸试剂。 （1）带有羧基的蒽醌类衍生物酸性强于不带羧基 四、蒽醌类。蒽醌类成分包括蒽酮及其不同还原者，一般蒽核上羧基的酸性与芳香酸相同，能溶于 程度的产物。按母核可分为 NaHCO3水溶液。 单蒽核类及双蒽核类，按氧化程度又可分为氧化 （2）如羟基位于苯醌或萘醌的醌核上，属插烯酸 蒽酚、蒽酮、蒽酚及蒽酮的二聚物。 结构，酸性与羧基类似。 （一）单蒽核类 （3）由于α-羟基蒽醌中的OH与C＝O 形成分子 1、蒽醌及其苷类。天然蒽醌以9，10-蒽醌最为常内氢键，β-羟基蒽醌的酸性强于α-羟基蒽醌衍生物。见，其C-9、C-10为最高氧化状态，较为稳定。?大α-羟基蒽醌的酸性较弱，不溶于碳酸氢钠及碳酸钠溶 黄素型。羟基分布于两侧的苯环上。多数化合物呈黄液。 色。大黄中的大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚 （4）羟基数目越多，酸性越强。随着羟基数目的 和芦荟大黄素属于此类。虎杖也含有此类成分。?茜增加，无论α位或β位，其酸性都有一定程度的增草素型。羟基分布在一侧苯环上，颜色为橙黄至橙红强。 色，种类较少，如茜草中的茜草素、羟基茜草素和伪 蒽醌类衍生物酸性强弱的排列顺序为：含COOH＞羟基茜草素等。 含二个以上β-OH＞含一个β-OH＞含二个以上α-OH 2、氧化蒽酚类。蒽醌在碱性溶液中可被锌粉还原＞含一个α-OH。据此可采用pH梯度萃取法分离蒽醌 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 类化合物：用碱性不同的水溶液（5%碳酸氢钠溶液、醚。 5%碳酸钠溶液、1%氢氧化钠溶液、5%氢氧化钠溶液） ?蒽醌苷类的分离：常用载体有聚酰胺、硅胶及 依次提取，其结果为酸性较强的化合物（带COOH或二葡聚糖凝胶。 个β-OH）被碳酸氢钠提出；酸性较弱的化合物（带一 个β-OH）被碳酸钠提出；酸性更弱的化合物（带二个 或多个α-OH）只能被1%氢氧化钠提出；酸性最弱的 1、紫外光谱。蒽醌母核可划分成具有苯甲酰基结 化合物（带一个α-OH）则只能溶于5%氢氧化钠。 构的部分和具有醌样结构的部分。苯甲酰基结构部分 给出第II和IV峰，醌样结构部分给出第III和V峰。 （1）Feigl的反应 醌类衍生物在碱性条件下加5个吸收谱带范围大致如下：230nm左右（第?峰）、热与醛类、邻二硝基苯反应，生成紫色化合物。 240～260nm（第?峰）、262～295nm（第?峰）、305～ （2）无色亚甲蓝显色试验 无色亚甲蓝乙醇溶液389nm（第?峰）、400nm以上（第?峰）。 专用于鉴别苯醌及萘醌。样品在白色背景下呈现出蓝 ?第?峰：羟基蒽醌母核上羟基数目越多，吸收 色斑点，可与蒽醌类区别。 峰波长越长。第?峰的波长与羟基所在的位置是α、 （3）Borntrager反应 在碱性溶液中，羟基蒽醌β无关，吸收强度主要取决于α羟基的数目。 类化合物显红色至紫红色。蒽酚、蒽酮、二蒽酮类化 ?第?峰：为醌样结构所引起，β-酚羟基取代，合物需氧化形成蒽醌后才能呈色。 吸收峰红移，吸收强度增加。若吸收强度lgε值大于 （4）Kesting-Craven反应 当苯醌及萘醌类化合4.l，提示蒽醌母核上具有β-酚羟基，否则β-酚羟物的醌环上有末被取代的位置时，在碱性条件下与含基不存在。 活性次甲基试剂，呈蓝绿色或蓝紫色，可用以与苯醌 ?第?峰：如蒽醌母核α位有供电子基，峰位红及萘醌类化合物区别。 移，强度降低；如取代基处于β位，则吸收峰强度增 （5）与金属离子的反应 蒽醌类化合物如具有α-大。 酚羟基或邻二酚羟基，则可与Pb2+、Mg2+等金属离子 ?第V峰：主要受α-酚羟基数目的影响，数目越形成络合物。其中与Mg2+形成的络合物具有一定的颜多，红移越多。 色，可用于鉴别。如果核上只有一个α-OH或一个β-OH 2、红外光谱。1，8-二羟基蒽醌和1-羟基蒽醌具或二个OH不在同环上，显橙黄色至橙色；如已有一个有2个羰基峰，其中1，8-二羟基蒽醌的2个羰基峰相α-OH，并另有一个OH在邻位显蓝色至蓝紫色，若在差大于40cm-1，1-羟基蒽醌的2个羰基峰相差小于间位则显橙红色至红色，在对位则显紫红色至紫色。 40cm-1。其他类型的羟基蒽醌均为1个羰基峰。 3、质谱。蒽醌类衍生物的质谱特征是分子离子峰 1、提取。一般选用甲醇、乙醇作为提取溶剂。 为基峰，游离醌依次脱去两分子CO，得到M－CO及M 2、分离。 －2CO的强峰以及它们的双电荷峰。B17 ?蒽醌苷类和游离蒽醌衍生物的分离：蒽醌苷类 与游离蒽醌衍生物的溶解性不一样，后者易溶于有机北京中医药大学中药学院 刘 斌 溶剂如氯仿，前者易溶于水。 1、常见香豆素的结构类型有哪些？ ?游离蒽醌衍生物的分离：一般采用溶剂分步结 香豆素属于天然苯丙素类成分。苯丙素类成分在 晶法、梯度pH 萃取法和色谱法。梯度pH 萃取法是最植物体内由醋酸或苯丙氨酸和酪氨酸衍生而成，后两 常用的手段。另外柱色谱也是常用手段，常用的吸附种物质脱氨生成桂皮酸的衍生物。 剂有硅胶、磷酸氢钙、聚酰胺，一般不用氧化铝，以 香豆素是邻羟基桂皮酸的内酯。香豆素的母核为 免发生不可逆的化学吸附。 苯骈α-吡喃酮。根据其结构特征可分为五大类，即简 从中药大黄中提取分离游离蒽醌衍生物时，可采单香豆素类、呋喃香豆素类、吡喃香豆素、异香豆素 用以下方法：大黄用乙醇回流提取—乙醇提取物用乙类和其他香豆素。 醚溶解—乙醚溶液依次用5%碳酸氢钠、5%碳酸钠和5% （1）简单香豆素：代表化合物是伞形花内酯。 氢氧化钠萃取—碱水液分别酸化，过滤，依次得到大 （2）呋喃香豆素：分为6，7-呋喃香豆素（线型）黄酸、大黄素以及大黄素甲醚、大黄酚、芦荟大黄素和7，8-呋喃香豆素（角型）。前者以补骨脂内酯为代 三者的混合物—后三者混合物用热异戊二醇溶解分离表，又称补骨脂内酯型；后者以白芷内酯为代表，又 出芦荟大黄素—大黄素甲醚、大黄酚的分离采用聚酰称异补骨脂内酯型。 胺柱色谱，先洗脱得到大黄酚，后洗脱得到大黄素甲 （3）吡喃香豆素：分为6，7-吡喃香豆素（线型） 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 和7，8-吡喃香豆素（角型）。前者以花椒内酯为代表，酚羟基，然后再用Gibbs或Emerson反应加以鉴别，后者以邪蒿内酯为代表。 如为阳性反应表示C-6位无取代。 （4）异香豆素：香豆素的异构体，代表化合物有 4.如何从中药中提取分离香豆素类成分？ 茵陈炔内酯、仙鹤草内酯等。 游离香豆素大多是低极性和亲脂性的，一部分与 （5）其他香豆素 糖结合的极性较大，故开始提取时先用系统溶剂法较 2.香豆素类化合物有哪些重要理化性质？ 好。在提取分离时，可利用其内酯环的性质以酸碱处 （1）性状：游离香豆素多数有较好的结晶，且大理，或利用游离香豆素的挥发性采用真空升华法或水 多有香味。香豆素中分子量小的有挥发性，能随水蒸蒸气蒸馏法。 气蒸馏，并能升华。香豆素苷多数无香味和挥发性， （1）水蒸气蒸馏法：小分子的香豆素类因具有挥 也不能升华。 发性，可采用水蒸气蒸馏法进行提取。 （2）荧光：香豆素母体本身无荧光，而羟基香豆 （2）碱溶酸沉法：由于香豆素类可溶于热碱液中， 素在紫外光下多显现蓝色荧光，在碱溶液中荧光更为加酸又析出，故可用0.5%氢氧化钠水溶液（或醇溶液）显著。香豆素类成分荧光强弱与分子结构中取代基的加热提取，提取液冷却后再用乙醚除去杂质，然后加 种类和位置有一定关系：一般在C-7位引入羟基即有酸调节pH至中性，适当浓缩，再酸化，则香豆素类即 强烈的蓝色荧光，加碱可变为绿色荧光；但在C-8位可沉淀析出。 再引入一羟基，则荧光减至极弱，甚至不显荧光。呋 （3）系统溶剂法：采用系统溶剂提取法，常用石 喃香豆素多显蓝色荧光，但较弱。 油醚、乙醚、乙酸乙酯、丙酮和甲醇顺次萃取。 （3）溶解性：游离香豆素能溶于沸水，难溶于冷 （4）色谱方法：吸附剂可用中性和酸性氧化铝以 水，易溶于甲醇、乙醇、氯仿和乙醚；香豆素苷能溶及硅胶，碱性氧化铝慎用。 于水、甲醇和乙醇，而难溶于乙醚等极性小的有机溶 5.香豆素类化合物的1HMNR谱有何主要特征？ 剂。 （1）H-3和H-4约在δ6.l～7.8产生两组二重峰 （4）与碱的作用：香豆素及其苷因分子中具有内（J值约为9Hz），其中H-3的化学位移值约为6.l～酯环，在强碱溶液中内酯环可以开环生成顺邻羟基桂6.4，H-4的化学位移值均为7.5～8.3。 皮酸盐，加酸又可重新闭环成为原来的内酯。但如与 （2）多数香豆素C7-位氧化，苯环上的其余三个碱长时间加热，则可转变为稳定的反邻羟基桂皮酸盐。芳质子，H-5呈d峰，δ7.38，H-6和H-8在较高场处，因此用碱提取香豆素时，必须注意碱液的浓度，并应δ6.87，2H，m峰，这组信号夹在H-3和H-4信号之间。 避免长时间加热，以防破坏内酯环。 （3）芳香环上的甲氧基信号一般出现在 3.香豆素类化合物有哪些重要检识反应？ δ3.8~4.0。 （1）异羟肟酸铁反应 6.含香豆素类成分的常见中药有哪些？ 由于香豆素类具有内酯环，在碱性条件下可开环， （1）秦皮：含有七叶内酯和七叶苷，白蜡素和白 与盐酸羟胺缩合成异羟肟酸，然后再于酸性条件下与蜡树苷等，属于简单香豆素。 三价铁离子络合成盐而显红色。 （2）补骨脂：含有多种香豆素类成分，包括补骨 （2）三氯化铁反应 脂内酯（呋喃骈香豆素，6，7-呋喃香豆素），异补骨 具有酚羟基的香豆素可与三氯化铁试剂产生颜色脂内酯（异呋喃骈香豆素，7，8-呋喃香豆素）等。 反应。 7.木脂素常见结构类型有哪些？ （3）Gibbs反应 木脂素是一类由苯丙素双分子聚合而成的天然成 Gibbs试剂是2，6-二氯（溴）苯醌氯亚胺，它在分，组成木脂素的单体有四种：?桂皮酸，偶有桂皮 弱碱性条件下可与酚羟基对位的活泼氢缩合成蓝色化醛；?桂皮醇；?丙烯苯；?烯丙苯。 合物。 木脂素可分为二类，一类由前两种单体组成，γ- （4）Emnerson反应 碳原子氧化型的，称为木脂素或Haworth木脂素。另 Emerson试剂是氨基安替比林和铁氰化钾，它可与一类由后二种单体组成，γ-碳原子未氧化型的，称为酚羟基对位的活泼氢缩合成红色化合物。 新木脂素。 Gibbs反应和Emerson反应都要求必须有游离的酚 已知的木脂素按其基本骨架及综合情况，可分为 羟基，且酚羟基的对位要无取代才显阳性，如7-羟香八种类型： 豆素就呈阴性反应。判断香豆素的C－6位是否有取代 ?简单木脂素：如叶下珠脂素。 基的存在，可先水解，使其内酯环打开生成一个新的 ?单氧环木脂素 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 ?木脂内酯：如牛蒡子苷。 状动脉血管的有效成分。 ?环木脂素 2、黄酮类化合物有哪些重要理化性质？ ?环木脂内酯：上向的称4-苯代-2，3-萘内酯； （1）性状 下向的称为1-苯代-2，3-萘内酯。 黄酮类化合物多为结晶性固体，少数（如黄酮苷 ?双环氧木脂素：如连翘脂素、连翘苷。 类）为无定形粉末。 ?联苯环辛烯型木脂素：如五味子素、五味子醇。 游离的各种黄酮苷元母核中，除二氢黄酮、二氢 ?新木脂素：如厚朴酚、和厚朴酚。 黄酮醇、黄烷及黄烷醇有旋光性外，其余无光学活性。 8.木脂素有何主要理化性质？ 苷类由于在结构中引入糖的分子，故均有旋光性，且 （1）物理性质 多为左旋。 木脂素多数为无色或白色结晶（新木脂素除外）。 黄酮类化合物的颜色与分子中是否存在交叉共轭 多数无挥发性，少数能升华，如去甲二氢愈创酸。游体系及助色团（OH、OCH3等）的种类、数目以及取代离木脂素偏亲脂性，难溶于水，能溶于苯、氯仿、乙位置有关。黄酮、黄酮醇及其苷类多显灰黄色~黄色，醚、乙醇等。与糖结合成苷者水溶性增大，并易被酶查耳酮为黄色~橙黄色，而二氢黄酮、二氢黄酮醇、异 或酸水解。 黄酮类，因不具有交叉共轭体系或共轭链短，故不显 （2）化学性质 色（二氢黄酮及二氢黄酮醇）或显微黄色（异黄酮）。 木脂素分子结构中常含醇羟基、酚羟基、甲氧基、 黄酮、黄酮醇分子中，尤其在7位或4’位，引入亚甲二氧基及内脂环等官能团，具有这些官能团所具-OH及-OCH3等助色团后，因促进电子移位、重排，而 有的化学性质。如具亚甲二氧基者，可发生Labat反使化合物的颜色加深。 应等。 花色素及其苷元的颜色随pH不同而改变，一般显 9.含木脂素类成分的常见中药有哪些？ 红（pH＜7）、紫（pH =8.5）、蓝（pH＞8.5）等颜色。 （1）五味子：含有多种联苯环辛烯型木脂素，如 （2）溶解性 五味子醇，五味子素，以及五味子酯甲、乙、丙、丁 一般黄酮苷元难溶或不溶于水，易溶于甲醇、乙 和戊等。 醇、醋酸乙酯、乙醚等有机溶剂及稀碱水溶液中。其 （2）厚朴：含有新木脂素厚朴酚、和厚朴酚等。中黄酮、黄酮醇、查耳酮等平面性强的分子，因分子 B17 与分子间排列紧密，分子间引力较大，难溶于水；而 二氢黄酮和二氢黄酮醇等，因系非平面性分子，分子 与分子间排列不紧密，分子间引力降低，有利于分子 刘 斌 北京中医药大学中药学院 进入，溶解度稍大。 1、常见黄酮类化合物的结构类型有哪些？ 花色素（花青素）苷元虽为平面型结构，但因以 黄酮类化合物经典的概念主要是指基本母核为2-离子形式存在，具有盐的通性，故亲水性较强，水中 苯基色原酮的衍生物。现泛指两个苯环（A环与B环）溶解度较大。 通过三个碳原子相互联结而成，分子结构中具有 黄酮苷元分子中引入羟基，将增加在水中的溶解 C6-C3-C6基本碳架的一系列化合物。 度；而羟基甲基化后，则增加在有机溶剂中的溶解度。 根据中央三碳链的氧化程度、B环连接位置（2位 黄酮苷一般易溶于水、甲醇、乙醇等强极性溶剂 或3位）以及三碳链是否构成环状等特点，可将主要中；难溶或不溶于苯、氯仿等有机溶剂中。糖链越长， 天然黄酮类化合物分为黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、二在水中溶解度越大。糖与苷元的连接位置不同，对苷 氢黄酮醇、异黄酮、二氢异黄酮、查耳酮、二氢查耳在水中的溶解度也有一定影响。 酮、花色素、黄烷醇（黄烷-3-醇、黄烷-3，4-二醇）、 （3）酸碱性 橙酮、口山酮（双苯吡酮）、高异黄酮等。 ?酸性：黄酮类化合物因分子中多具有酚羟基， 此外尚有由两分子黄酮或两分子二氢黄酮，或一显酸性，可溶于碱性水溶液、吡啶、甲酰胺及二甲基 分子黄酮及一分子二氢黄酮按C-C或C-O-C键方式联甲酰胺中。由于酚羟基数目及位置不同，酸性强弱不 接而成的双黄酮类化合物。有少数黄酮类化合物结构同。以黄酮为例，其酚羟基酸性强弱顺序依次为7，4’-很复杂，如水飞蓟素为黄酮木脂素类化合物，榕碱及二羟基＞7或4’-羟基＞一般酚羟基＞5-羟基。 异榕碱为生物碱型黄酮。 ?碱性：γ-吡喃酮环上的1位氧原子，因有未共 除O-苷外，天然黄酮类化合物还发现有C-苷，如用的电子对，表现出微弱碱性，可与强无机酸，如浓 葛根黄素、葛根黄素木糖苷，为中药葛根中的扩张冠硫酸、盐酸等生成盐，但生成的盐极不稳定，遇水即 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 分解。黄酮类化合物溶于浓硫酸产生的盐，常表现出棕色。 特殊的颜色，可用于鉴别。 ?分子结构中有邻二酚羟基或3，4’-二羟基取代 3、黄酮类化合物有哪些重要颜色反应？ 时，在碱液中不稳定，易被氧化，产生沉淀。 黄酮类化合物的颜色反应多与分子中的酚羟基及 4、黄酮类化合物常用提取纯化方法有哪些？ γ-吡喃酮环有关。 黄酮苷类以及极性稍大的苷元（如羟基黄酮、双 （一） 还原反应 黄酮、橙酮、查耳酮等），一般可用丙酮、醋酸乙酯、 ?盐酸-镁粉（或锌粉）反应：是鉴定黄酮类化合乙醇、水或一些极性较大的混合溶剂进行提取。其中 物最常用的颜色反应。多数黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、用得最多的是醇-水（1：1）或甲醇。一些多糖苷类则二氢黄酮醇类化合物显橙红色至紫红色，少数显紫色可以用沸水提取。为了避免在提取过程中黄酮苷类发 至蓝色。查耳酮、橙酮、儿茶素类则无该显色反应。生水解，常按一般提取苷的方法事先破坏酶的活性。 异黄酮类除少数外，也不显色。 大多数黄酮苷元宜用极性较小的溶液，如氯仿、乙醚、 ?四氢硼钠（钾）反应：NaBH4是对二氢黄酮类化醋酸乙酯等提取，对多甲氧基黄酮的游离苷元，亦可 合物专属性较高的一种还原剂，显红色至紫色。 用苯进行提取。 ?磷钼酸反应：二氢黄酮可与磷钼酸试剂反应呈 （1）溶液萃取法：一般而言，苷元多用氯仿或乙 现棕褐色，可作为二氢黄酮类化合物的特征鉴别反应。 醚萃取，单糖苷可用醋酸乙酯萃取，多糖苷可用水饱 （二）金属盐类试剂的络合反应 和正丁醇萃取。也可采用逆流分配法，常用的溶液系 ?铝盐：常用试剂为1%三氯化铝或硝酸铝溶液。统有：水-醋酸乙酯，正丁醇-石油醚等。 生成的络合物多为黄色（λmax=415nm），并有荧光， （2）碱提取沉淀法：一些黄酮苷类，如芦丁、橙 可用于定性或定量分析。 皮苷、黄芩苷等，虽有一定极性，可溶于水或碱水， ?铅盐：常用1%醋酸铅及碱式醋酸铅水溶液，可但难溶于酸水。此时可用碱水提取，再将碱水提取液 生成黄色至红色沉淀。醋酸铅只能与分子中具有邻二调成酸性，黄酮苷类可沉淀析出。但需要注意，所用 酚羟基或兼有3-羟基、4-酮基或5-羟基、4-酮基结构碱液浓度不宜过高；加酸酸化时，酸性也不宜过强。 的化合物反应生成沉淀。而碱式醋酸铅的沉淀能力要当药材含有大量果胶、粘液等水溶性杂质时（如花、 大得多，一般酚类化合物均可与其发生沉淀反应。 果类药材），宜用石灰乳或石灰水代替其他碱性水溶 ?锆盐：多用2%二氯氧锆甲醇溶液。黄酮类化合液进行提取。 物分子中有游离的3-或5-羟基存在时，均可与该试剂 （3）炭粉吸附法：主要用于苷的精制。甲醇粗提 反应，生成黄色的锆络合物。在实际应用时，通常同物被活性炭吸附后，大部分黄酮苷可用7%酚-水洗下。时使用二氯氧锆和枸橼酸，以判断黄酮类化合物3-OH、（一）B17 5-OH的存在。若有3-OH和（或）5-OH，加二氯氧锆显 黄色。若只有5-OH，加枸橼酸后黄色减褪，若有3-OH， 则加枸橼酸后黄色不变，因此可用于区分黄酮和黄酮刘 斌 北京中医药大学中药学院 醇。 5、黄酮类化合物常用分离方法有哪些？ ?镁盐：常用醋酸镁甲醇溶液为显色剂，二氢黄 一、柱色谱法 酮、二氢黄酮醇类可显天蓝色荧光。 分离黄酮类化合物常用的吸附剂或载体有硅胶、 ?氯化锶（SrCl2）：在氨性甲醇溶液中，氯化锶聚酰胺、葡聚糖凝胶及纤维素粉等。 可与分子中具有邻二酚羟基结构的黄酮类化合物生成 1、硅胶柱色谱。主要适用于分离异黄酮、二氢黄 绿色至棕色乃至黑色沉淀。 酮、二氢黄酮醇及高度甲基化（或乙醚化）的黄酮及 ?三氯化铁 黄酮醇类。 （三）硼酸显色反应 2、聚酰胺柱色谱。对分离黄酮类化合物来说，聚 黄酮类化合物分子中具有5-羟基黄酮及2’-羟基酰胺是较为理想的吸附剂。其吸附强度主要取决于黄 查耳酮类结构时，在无机酸或有机酸存在条件下，可酮类化合物分子中羟基的数目与位置及溶剂与黄酮类 与硼酸反应，生成亮黄色。 化合物或与聚酰胺之间形成氢键缔合能力的大小。黄 （四）碱性试剂显色反应 酮类化合物从聚酰胺柱上洗脱时大体有下述规律： ?二氢黄酮易在碱液中开环，转变成相应的异构 ?苷元相同，洗脱先后顺序一般是：参糖苷、双 体查耳酮，显橙色至黄色。 糖苷、单糖苷、苷元。 ?黄酮醇类在碱液中先呈黄色，通入空气后变为 ? 苷元母核上增加羟基，洗脱速度相应减慢。 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 ?不同类型黄酮类化合物，洗脱先后顺序一般是：用。 异黄酮、二氢黄酮、黄酮、黄酮醇。 （2）银杏叶：银杏叶中的黄酮类化合物有黄酮、 ?分子中芳香核、共轭双键多者易被吸附，故查黄酮醇及其苷类、双黄酮和儿茶素等。银杏叶黄酮具 耳酮比相应的二氢黄酮难于洗脱。 有扩张冠状血管和增加脑血流量的作用。 3、葡聚糖凝胶（Sephadex gel）柱色谱。可用 8、槐米、陈皮、满山红中含有的主要黄酮类化合 Sephadex G和Sephadex LH-20。分离游离黄酮时，主物分别是什么？ 各有何主要药理活性和理化性质？ 要靠吸附作用，苷元的羟基数目越多，越难以洗脱； （1）槐米：芦丁是其有效成分，苷元为槲皮素， 分离黄酮苷时，则分子筛的性质起主导作用，苷的分属于黄酮醇类化合物。可用于治疗毛细血管脆性引起 子量越大，其上联结糖的数目越多，越容易洗脱。 的出血症，并用作高血压的辅助治疗剂。 二、梯度pH萃取法 芦丁分子中因含有邻二酚羟基，性质不太稳定， 梯度pH萃取法适合于酸性强弱不同的黄酮苷元的暴露在空气中能缓缓变为暗褐色，在碱性条件下更容 分离。根据黄酮苷元酚羟基数目及位置不同其酸性强易被氧化分解，硼酸盐能与邻二酚羟基结合，达到保 弱也不同的性质，可以将混合物溶于有机溶剂（如乙护的目的，故在碱性溶液中加热提取芦丁时，往往加 醚）后，依次用 5%NaHCO3、5%Na2CO3、0.2%NaOH、4%NaOH入少量硼砂。 溶液萃取，来达到分离的目的。一般规律是具7，4’- （2）陈皮：主要有效成分为橙皮苷，属于二氢黄 二羟基者可溶于NaHCO3溶液，具7或4’-羟基者可溶酮，具有和芦丁相同的作用。 于Na2CO3溶液，具一般酚羟基者可溶于0.2%NaOH溶 橙皮苷几乎不溶于冷水，在乙醇或热水中溶解度 液，具5-羟基者只能溶于4%NaOH溶液。 较大，可溶于吡啶、甘油、乙酸或稀碱溶液，不溶于 三、根据分子中某些特定官能团性质进行分离 稀矿酸、氯仿、丙酮、乙醚或苯中。与三氯化铁、金 有邻二酚羟基的黄酮可被醋酸铅沉淀，不具有邻属盐类反映显色或生成沉淀，与盐酸-镁粉反应呈紫红二酚羟基的黄酮可被碱式醋酸铅沉淀，据此可将两类色。 成分分离。 （3）满山红：满山红叶中含有杜鹃素。杜鹃素属 具有邻二酚羟基的黄酮可与硼酸络合，生成物易于二氢黄酮，是祛痰有效成分，临床用于治疗慢性支 溶于水，借此可与不具上述结构的黄酮类化合物分离。 气管炎。 6、黄芩中含有的黄酮类化合物有哪些？黄芩苷有 杜鹃素为淡黄色片状结晶，与盐酸-镁粉反应呈粉何性质？如何提取？ 红色，加热后变为玫瑰红色，与三氯化铁反应成草绿 黄芩主要含有黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄色。B17 芩素等黄酮类化合物。黄芩苷具有抗菌消炎、降转氨 酶作用。黄芩素为黄芩苷的苷元，其磷酸酯钠盐可用 于治疗过敏、喘息等疾病。 刘 斌 北京中医药大学中药学院 黄芩苷为淡黄色针晶，几乎不溶于水，难溶于甲 9、如何用色谱法鉴别黄酮类化合物？ 醇、乙醇、丙酮，可溶于热乙酸。遇三氯化铁显绿色， 1.纸色谱（PC）：适用于分离各种天然黄酮类化 遇醋酸铅生成橙红色沉淀。溶于碱及氨水中初显黄色，合物及其苷类混合物。混合物的鉴定常采用双向色谱 不久则变成棕黑色。经水解后生成的黄芩素分子中具法。以黄酮苷类来说，一般第一向展开采用某种醇性 有邻三酚羟基，易被氧化转为醌类衍生物而显绿色，溶剂，如正丁醇-醋酸-水（4：1：5，上层）等，主要这是保存或炮制不当的黄芩药材外观变绿色的原因。是根据分配作用原理进行分离。第二向展开溶剂则用 黄芩变绿色后，有效成分受到破坏，质量随之降低。 水或其他含水溶液，如2～6%醋酸等，主要是根据吸附 黄芩苷的提取多采用水煮提，加酸沉淀的方法。 作用原理进行分离。 7、葛根、银杏叶中含有的主要黄酮类化合物分别 黄酮类化合物苷元中，平面性分子如黄酮、黄酮 有哪些？ 各有何主要药理活性？ 醇、查耳酮等，用含水溶剂如3%～5%HOAC展开时，几 （1）葛根：葛根主要含异黄酮类化合物，主要成乎停留在原点不动（Rf＜0.02）；而非平面性分子如分有大豆素、大豆苷、大豆素-7，4’-二葡萄糖苷及二氢黄酮、二氢黄酮醇、二氢查耳酮等，因亲水性较 葛根素、葛根素-7-木糖苷。其中大豆素属于异黄酮苷强，Rf 值较大（ 0.10～0.30）。黄酮类化合物分子元，大豆苷属于异黄酮氧苷，葛根素属于异黄酮碳苷。中羟基苷化后，极性随之增大，在醇性展开剂中Rf 值葛根总黄酮的分离可以使用氧化铝柱层析。葛根总异相应降低，同一类型苷元，Rf值依次为：苷元＞单糖黄酮有增加冠状动脉血流量及降低心肌耗氧量等作苷＞双糖苷。但在用水或2～8%醋酸、3%氯化钠水溶液 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 或1%盐酸展开时，则苷元几乎停留在原点不动，Rf 值出现在δ8.0左右。H-6因有H-5的邻偶（J=9.0Hz）大小顺序为：苷元＜单糖苷＜双糖苷。 及H-8的间偶（J=2.5Hz）作用，将表现为一个双二重 2.硅胶薄层色谱：用于分离和鉴定弱极性黄酮类峰。H-8 因有H-6的间位偶合作用，显现为一个裂距 化合物。分离黄酮苷元常用的展开剂是甲苯-甲酸乙酯较小的二重峰（J=2.5Hz）。 -甲酸（5：4：1）。 二、B环质子 3.聚酰胺薄层色谱：特别适合于分离含游离酚羟 1.4’-氧取代黄酮：B环质子分为H-3’，H-5’基的黄酮及其苷类。展开剂中多含有醇、酸和水。 和H-2’，H-6’两组，各以相当于2个氢的双峰信号 10、用紫外及可见光谱对黄酮类化合物进行结构（（J=8.5Hz）出现在δ6.5～7.9区域。H-3’，H-5’测定的一般程序是什么？ 的化学位移总是比H-2’，H-6’的化学位移值小，原 (1)测定样品在甲醇溶液中的UV光谱。 因是有4’-OR取代基的屏蔽作用，以及C环对H-2’， (2)测定样品在甲醇中加入各种诊断试剂后得到H-6’的负屏蔽效应。 的UV及可见光谱。常用的诊断试剂有甲醇钠（NaOMe）、 2.3’,4’,5’-三氧取代黄酮类：当B环有醋酸钠(NaOAc)、醋酸钠-硼酸(NaOAc-H3BO3 )、三氯3’,4’,5’-羟基时，则H-2’及H-6’将作为相当于化铝(AlCl3)、三氯化铝-盐酸(Al?鄄Cl3-HCl)等。 两上质子的一个单峰，出现在δ6.50～7.50范围内。 (3)样品如为黄酮苷类，需先进行水解或甲基化后 三、C环质子 水解，得到苷元或甲基化苷元，再测定苷元或其衍生 1.黄酮类：H-3常常作为一个尖锐的单峰信号出现 物的UV光谱。 在δ6.30处。 11、黄酮类化合物在甲醇溶液中的UV光谱有何特 2.异黄酮类：异黄酮上的H-2，因正好位于羰基的征？ β位，且通过碳和氧相接，故将作为一个单峰出现在 1.黄酮及黄酮醇类：黄酮、黄酮醇等多数黄酮类比一般芳香质子较低的磁场区（δ7.60～7.80）。 化合物，因分子中存在桂皮酰基及苯甲酰基组成的交 3.二氢黄酮及二氢黄酮醇类 叉共轭体系，故其甲醇溶液在200～400nm的区域内存 ?二氢黄酮类：H-2与两个磁不等同的H-3偶合在两个主要的紫外吸收带，称为峰带?（300～400nm）（Jtrans=11.0Hz，Jcis=5.0Hz），故作为一个双二重及峰带?（220～280nm）。黄酮、黄酮醇可通过带I峰出现，中心位于δ5.2处。两个H-3，因有相互偕偶的最大吸收峰波长予以鉴别，小于350nm者为黄酮，（J=17.0Hz）及H-2的邻偶，将分别作为一个双二重 而大于350nm者为黄酮醇。 峰出现，中心位于δ2.80处，但往往相互重迭。 2.查耳酮及橙酮类：共同特征是带?很强，为主 ?二氢黄酮醇类：在天然存在的二氢黄酮醇中， 峰，而带?较弱，为次强峰。查耳酮中，带?位于220～H-2及H-3多为反式二直立键，故分别作为一个二重峰 270nm， 带?位于340～390nm，有时分裂为?a (340～出现（J=11.0Hz）。H-2位于δ4.9前后，H-3则位于390nm)及?b（300～320nm）。 δ4.30左右。 3.异黄酮、二氢黄酮及二氢黄酮醇：除有由A环 14、如何利用13CMNR谱推断黄酮类化合物的骨架 苯甲酰基系统引起的带?吸收（主峰）外，因B环不类型？ 与吡喃酮环上的碳基共轭（或共轭很弱），带?很弱，在黄酮类化合物的13CNMR谱中，可根据中央三个碳原 常在主峰的长波方向处有一肩峰。根据主峰的位置，子信号（C-2、C-3和C4=O）的波谱特征，推断黄酮类 可以区别异黄酮与二氢黄酮及二氢黄酮醇。前者在化合物的骨架类型， 245～270nm，后者在270～295nm。 12、加入诊断试剂后黄酮及黄酮醇类化合物的紫刘 斌 北京中医药大学中药学院 外光谱位移及其在结构测定中的意义如何？ 1、萜类化合物的含义是什么？ 13、黄酮类化合物的1HMNR谱有何主要特征？ 萜类化合物是由甲戊二羟酸衍生而成的一类成 一、A环质子 分，其基本骨架多具有2个或2个以上异戊二烯单位 1.5,7-二羟基黄酮：H-6及H-8将分别作为二重峰（C5）。开链萜烯具有（C5H8）n 的通式，碳原子数（J=2.5Hz），出现在δ5.7～6.9区域内，且H-6总一般为5的倍数，而氢的比例一般不是8的倍数。 是比H-8位于高场。 绝大多数萜类化合物为含氧衍生物，结构中具有 2.7-羟基黄酮：A环上有H-5、H-6、H-8三个芳香醇、醚、醛、酮、羧酸、酯、内酯、亚甲二氧基等含 质子。H-5因有C-4位羰基强烈的负屏蔽效应的影响，氧基团。有的萜类化合物以苷的形式存在，如环烯醚 以及H-6的邻偶作用，将作为一个二重峰（J=9.0Hz）萜类成分；有的萜类化合物分子含有氮原子，称为萜 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 类生物碱，如乌头碱。 或无定形粉末，多具旋光性、吸湿性，味苦。 2、常见萜类化合物可分为哪些类型？ 溶解性：环烯醚萜苷类化合物分子量一般较小， 按异戊二烯单位（C5单位）的多少，可将常见萜大多具有极性官能团，偏亲水性，易溶于水、甲醇， 类化合物分为单萜、倍半萜、二萜、二倍半萜、三萜、可溶于乙醇、丙酮和正丁醇，难溶于氯仿、乙醚、苯 四萜和多萜。每类再根据基本碳链是否成环及成环数等亲脂性有机溶剂。环烯醚萜苷的亲水性较其苷元的 的多少进一步分类。 亲水性更强。 单萜：单萜类化合物可看成是由两个异戊二烯单 水解性：环烯醚萜苷对酸很敏感，其苷键极易被 元聚合而成的化合物及其衍生物，为挥发油的组分。酸水解，生成的苷元很不稳定，易发生聚合反应，在 多数具有较强的香气和生理活性。如链状单萜香叶醇不同水解条件下（温度、酸度等），产生不同颜色的 具有抗菌作用；单环单萜辣薄荷酮具有平喘、止咳、变化或沉淀。玄参、地黄等炮制加工变黑，均与此有 抗菌的作用；双环单萜龙脑（冰片）具有发汗、兴奋、关。 镇痉和驱虫作用。 鉴别反应：环烯醚萜分子结构中具有半缩醛羟基， 倍半萜：倍半萜化合物是由3个异戊二烯单元聚性质很活泼，能与一些试剂产生颜色反应，可用于环 合而成的化合物及其衍生物，可存在于挥发油中，多烯醚萜及其苷的鉴别。如： 具有香气和生物活性。单环倍半萜青蒿素具有抗恶性 氨基酸反应：游离的苷元与氨基酸加热，产生深 疟疾的作用。 红色至蓝色，最后生成蓝色沉淀。 二萜：二萜类化合物是由4个异戊二烯单元聚合 乙酸-铜离子反应：苷元溶于冰醋酸，加少量铜离而成的化合物及其衍生物。分子量增大，绝大多数不子，加热，显蓝色反应。 具挥发性。双环二萜类的银杏内脂为治疗心血管疾病 （2）提取分离 的有效药物，穿心莲内酯具有抗菌、抗炎作用；三环 提取：环烯醚萜苷类成分一般采用溶剂法提取， 二萜类的雷公藤内酯具有抗癌、抗炎、抗生育等作用；常选用的提取溶剂为水、甲醇、乙醇、丙酮等溶剂。 四环二萜类的甜菊苷可用作禁糖病人的甜味剂，其甜用水作提取溶剂时，需在药材中拌入碳酸钙或氢氧化 度为蔗糖的300倍；五环二萜的乌头碱具有镇痛、局钡，以防止酶和有机酸的影响。 部麻醉、降温、消肿的活性。 分离：提取液减压浓缩后预先用乙醚或石油醚脱 三萜：三萜类化合物是由6个异戊二烯单元聚合脂，再用正丁醇萃取出环烯醚萜苷类成分；或将除脂 而成的化合物及其衍生物。以游离状态存在时称为三后的水提液通过活性炭或大孔吸附树脂柱，先用水洗 萜类化合物或三萜苷元，与糖结合则称为三萜皂苷。 脱除去水溶性杂质后，再用乙醇将环烯醚萜苷洗脱下 3、常见环烯醚萜苷类化合物可分为哪些结构类来。 型？ 5、紫杉中含有的萜类化合物有何生物活性？紫杉 环烯醚萜苷类成分属于单萜类化合物，在玄参科、醇有何主要理化性质？ 茜草科、唇形科、龙胆科中较为常见。按其结构不同， 紫杉又称红豆杉，主要含有二萜类成分。具生物 可分为： 活性的成分为分子结构中含C-4、C-5和C-20位的环 （1）环烯醚萜苷 氧丙烷结构的10余种化合物，其中紫杉醇属于紫杉烷 基本母核为环烯醚萜醇，具有半缩醛及环戊烷环型三环二萜，具有显著的抗癌作用。 的结构，主要以C1-OH与糖成苷的形式存在于植物中。 游离的紫杉醇可溶于甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙 根据其结构上C-4位有无取代基可分为两小类；? C-4酯、二氯甲烷、三氯甲烷等有机溶剂，难溶于水，不 位有取代基的环烯醚萜苷，如栀子苷；? C-4位无取溶于石油醚。紫杉醇分子中含有N原子，但因处于酰代基的环烯醚萜苷，如桃叶珊瑚苷、梓醇苷。 胺状态，不显碱性，故紫杉醇为中性化合物。紫杉醇 （2）裂环烯醚萜苷 在pH4~8范围内比较稳定，碱性条件下很快分解，对 环烯醚萜苷的C7－C8断键开环衍生而成的化合酸相对较稳定。紫杉醇可与二氧化锰试剂发生氧化反 物。獐牙菜中的獐牙菜苷、獐牙菜苦苷和龙胆中的龙应，且不易还原。 胆苦苷属于此类。 6、龙胆中含有的萜类化合物有何主要理化性质？ 4、环烯醚萜类化合物有哪些主要理化性质？如何如何提取分离？ 提取分离？ （1）理化性质 （1）理化性质 龙胆中主要环烯醚萜类成分为龙胆苦苷、獐牙菜 性状：环烯醚萜苷和裂环烯醚萜苷为白色结晶体苦苷和獐牙菜苷等。龙胆苦苷有显著的苦味。易溶于 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 水，可溶于甲醇、乙醇、丙酮、正丁醇等亲水性有机溶剂，在低浓度乙醇中溶解度较小。 溶剂，难溶于氯仿、乙醚、石油醚等亲脂性有机溶剂。 4、稳定性 龙胆苦苷、獐牙菜苦苷等具有环烯醚萜苷类的一般化 挥发油对空气、光、热均较敏感。 学性质，如易被酸水解，能与氨基酸、铜离子、Shear 5、物理常数 试剂等产生颜色反应。 挥发油的物理常数主要有相对密度、比旋度、折 （2）提取分离 光率和沸点。 常用渗漉法以甲醇或乙醇提取。活性炭—硅藻土 6、化学常数 （1：1）纯化，硅胶柱色谱分离，先洗脱下来龙胆苦 酸值：表示挥发油中游离羧酸和酚类成分的含量 苷，后洗脱下来獐牙菜苦苷。 指标。以中和1g挥发油中的酸性成分所消耗氢氧化钾 的毫克数表示。 酯值：表示挥发油中酯类成分的含量指标。用水 刘 斌 北京中医药大学中药学院 解1g挥发油中所含的酯需要的氢氧化钾的毫克数表 1、挥发油的主要化学组成是什么？ 示。 挥发油又称精油，是存在于植物中的一类具有芳 皂化值：表示挥发油中游离羧酸、酚类和酯类成 香气味、可随水蒸气蒸馏出来而又与水不相混溶的挥分总量的指标。以皂化1g挥发油中所消耗氢氧化交的发性油状成分的总称。挥发油为一混合物，其组份较毫克数表示。皂化值等于酸值和酯值之和。 为复杂。挥发油成分中以萜类成分多见，另外，尚含 3、挥发油的提取分离方法有哪些？ 有小分子脂肪族化合物和小分子芳香族化合物。 1、提取 萜类成分：挥发油中的萜类成分主要是单萜和倍 水蒸气蒸馏法：利用挥发油的挥发性和与水不相 半萜类化合物。其中，它们的含氧衍生物多具有较强混溶的性质提取。 的生活活性，并且是挥发油具芳香气味的主要组成成 溶剂提取法：挥发油为亲脂性物质，选用低沸点 分。 有机溶剂如乙醚、石油醚（30~60?）等进行提取，通 脂肪族成分：挥发油中的脂肪族成分多为一些小常采用连续回流提取法，也可用冷浸法。 分子化合物，具有挥发性，如正庚烷、辛烯、甲戊酮、 压榨法：适用于含油量高的新鲜植物药材的提取。 异戊醛、乙酸戊酯等。鱼腥草所含挥发油主要有效成 CO2超临界流体提取法：适用于提取不稳定、易氧 分为癸酰乙醛（鱼腥草素），具有抗菌作用，有鱼腥化、受热易分解的挥发油成分。具有提取效率高，提 气味。 出物杂质含量低等优点。 芳香族成分：挥发油中的芳香族化合物多为含氧 2、分离 衍生物，如苯乙醇、水杨酸、香草醛等。其中大多数 冷冻析晶法：将挥发油于-20~0?以下放置。如薄属于苯丙素衍生物，如桂皮挥发油中具有解热镇痛作荷油中薄荷脑的分离。 用的桂皮醛，丁香挥发油中具有抑菌和镇静作用的丁 分馏法：挥发油的组成成分由于类别不同，分子 香酚等。 量的大小、双键的数目、位置及含氧官能团等可能有 2、挥发油的主要理化性质有哪些？ 一定的差异，因此它们的沸点各异。如单萜类化合物 1、性状 的沸点随双键的增多而升高，含氧单萜的沸点随官能 颜色：挥发油大多为无色或淡黄色液体，少数挥团极性的增大而升高。根据沸点的差异，采用分馏法 发油具有其他颜色，如含有奥类成分的挥发油多显蓝分离。 色。 化学分离法： 形态：挥发油在常温下为透明液体。低温放置， （1）碱性成分的分离：将挥发油溶于乙醚，用1％挥发油所含主要成分可能结晶析出，这种析出物习称硫酸或盐酸提取，所得酸水液经碱化后再用乙醚萃取， 为“脑，”如薄荷脑、樟脑等。 蒸去乙醚即得碱性成分。 气味：挥发油具有特殊的气味，大多数为香味。 （2）酚、酸性成分的分离：将分出碱性成分的挥 2、挥发性 发油乙醚液，再分别用5％碳酸氢钠和2％氢氧化钠萃 挥发油均具有挥发性，可随水蒸气蒸馏。 取，所得水溶液分别酸化后用乙醚萃取，前者可得酸 3、溶解性 性成分，后者可得酚性成分。 挥发油为亲脂性物质，难溶于水，可溶于高浓度 （3）醛、酮成分的分离：? 将分出碱性、酸性、 乙醇，易溶于乙醚、二硫化碳、石油醚等亲脂性有机酚性成分的挥发油乙醚液用水洗至中性，以无水硫酸 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 钠干燥后，加亚硫酸氢钠饱和溶液，分出水层或加成采用气相色谱-质谱(GC-MS)联用法，可大大提高挥发物结晶，加酸或碱液处理，以乙醚萃取，可得醛类成油分析鉴定的速度和研究水平。 分和甲基酮类成分；? 将分出碱性、酸性、酚性、含 5、薄荷油中主要含有哪些成分？ 醛和甲基酮等成分的挥发油乙醚液，回收乙醚后加入 薄荷油化学组成复杂，主要成分是单萜及其含氧 适量Girard T或P的乙醇溶液，加热回流，用乙醚萃衍生物，如薄荷醇、薄荷酮、新薄荷醇等。薄荷醇有3取除去不具羰基的组分，水层酸化后再用乙醚萃取，个手性碳原子，共有8种立体异构体，但其中只有（-）可获得含酮基类成分。 薄荷醇和（+）新薄荷醇存在于薄荷油中。B17 （4）醇类成分的分离：将挥发油与丙二酸单酰氯 或邻苯二甲酸酐或丁二酸酐反应生成酸性酯，再将生刘 斌 北京中医药大学中药学院 成物转溶于碳酸钠溶液，用乙醚洗去未作用的挥发油， 碱液酸化，用乙醚萃取出所生成的酯，蒸除乙醚，残 皂苷是存在于植物界的一类结构较复杂的苷类化 留物经皂化反应，再用乙醚萃取，即得醇类成分。 合物，其苷元大多属于具有螺甾烷及其生源相似的甾 色谱分离法： 族化合物或三萜类化合物。大多数皂苷水溶液振摇后 （1）吸附柱色谱：常用硅胶和氧化铝为吸附剂。 可产生持久性的泡沫，故称皂苷。 （2）硝酸银络合色谱：挥发油中的萜类成分多具 皂苷有多种分类方法。按照皂苷元的化学结构不 有双键，可依据其双键的数目和位置的不同，与硝酸同，可以将皂苷分为甾体皂苷和三萜皂苷；按照皂苷 银形成π -络合物的难易及稳定性的差异，采用硝酸分子中糖链数目的不同，可分为单糖链皂苷（单皂苷） 银-硅胶或硝酸银-氧化铝薄层色谱或柱色谱进行分（只含1条糖链的皂苷）、双糖链皂苷（双皂苷）（含 离，可获得常规吸附色谱难以达到的分离效果。在硝有2条糖链的皂苷）和三糖链皂苷（三皂苷）（含有3酸银络和色谱中，化合物形成络合物的能力越强，被条糖链的皂苷）等；按照皂苷分子中是否含有酸性基 吸附剂吸附越牢，其Rf值越小。一般来说，双键多的团（如羧基），可将皂苷分成中性皂苷和酸性皂苷。 化合物易形成络合物，末端双键较其他双键形成的络 合物稳定；顺式双键大于反式双键的络合能力。例如， 甾体皂苷由甾体皂苷元和糖组成。甾体皂苷元有 石菖薄挥发油中具反式双键的α-细辛醚先洗脱出来，螺旋甾烷醇类、异螺旋甾烷醇类、呋甾烷醇类和变形 其次是具顺式双键的β-细辛醚，最后是具末端双键的螺旋甾烷醇类等，它们的基本碳架均为螺旋甾烷及异 欧细辛醚。 构体异螺旋甾烷。 4、如何用气相色谱对挥发油进行鉴定？ 1、螺旋甾烷醇和异螺旋甾烷醇类 气相色谱法具有分离效率好、灵敏度高、样品用 （1）甾体皂苷元由27个碳原子组成，分子中都量少、分析速度快的优点，与质谱联用更能加速成分含有A、B、C、D、E和F六个环，其中A、B、C、D环结构的确定，是研究挥发油的重要手段，现已广泛用为具有环戊烷骈多氢菲结构的甾体基本母核。E环和F于挥发油的分离和定性定量分析。 环以螺缩酮形式相联接，它们与甾体母核共同组成了 1、色谱条件 螺旋甾烷的结构。 流动相（载气）：一般是氢气、氮气或氦气。 （2）一般B/C和C/D环的稠合为反式；A/B环稠 固定相：?非极性的饱和烃润滑油类（如硅酮、合有反式（5α-H，即C-5上的氢原子和C-10上的甲甲基硅油等），适用于沸点差异大的萜类成分的分离。基为异侧），也有顺式（5β-H，即C-5上的氢原子和?极性固定相类（如聚酯、聚乙二醇类等），适用于C-10上的甲基为同侧）。 沸点差异小，而极性差异大的萜类成分的分离。 （3）分子中含有多个羟基，大多数在C-3上有羟 柱温：对分离的影响较大。一般单萜类可在130?基。 或低于130?的柱温下分离；倍半萜烯在170?～180? （4）在甾体皂苷元的E、F环中有三个不对称碳或更高的温度下分离效果较好；而含氧衍生物一般在原子C-20、C-22和C-25。C-20位上的甲基都是α结130?～190?之间分离。目前多采用程序升温法，可构，C-25甲基则有两种构型，当C-25位上的甲基为直使挥发油中的单萜、倍半萜及其含氧衍生物一次分离立键时，为β型，其绝对构型为L-型（也叫L-系，成功。 或25S、25L、25βF、Neo）；当C-25位上甲基为平伏 2、鉴定方法 键时，为α型，其绝对构型为D-型（也叫D-系，或 常用相对保留时间对挥发油中的已知成分进行定25R、25D、25αF、Iso）。一般来说，D-型化合物比性鉴别。对于组成极其复杂的挥发油和未知成分，多L-型化合物稳定。L-型的衍生物称为螺旋甾烷，D-型 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 的衍生物称为异螺旋甾烷。 完全溶解的最低浓度。 （5）甾体皂苷分子中多不含羧基，显中性，故甾 皂苷溶血作用的有无与皂苷元有关，溶血作用的 体皂苷又称中性皂苷。 强弱则与结合的糖有关。单糖链皂苷溶血作用一般较 2、呋甾烷醇类，是螺旋甾烷醇和异螺旋甾烷醇类显著；双糖链皂苷，尤其是中性三萜类双糖链皂苷溶 F环开环，26-OH苷化形成的呋甾烷皂苷，均为双糖链血作用较弱或没有溶血作用；酸性皂苷的溶血作用介 皂苷，均为原生苷。 于二者之间。需要注意的是，并不是所有的皂苷都有 3、变形螺旋甾烷醇类，基本结构与螺旋甾烷醇类溶血作用，例如人参皂苷无溶血现象，但经过分离，B相同，唯F环为四氢呋喃环。 型和C型人参皂苷具有显著溶血作用，而A型皂苷则 有抗溶血作用。 三萜皂苷的皂苷元为三萜类衍生物，其基本骨架 5、皂苷的水解：皂苷苷键的裂解，可采用酸催化 由6个异戊二烯单位、30个碳原子组成。根据皂苷元水解、氧化开裂、酶解等。水解条件剧烈时，一些皂 的结构，三萜皂苷可分为四环三萜皂苷和五环三萜皂苷元往往会发生脱水、环合、双键移位、取代基位移、 苷两大类。 构型转化等，生成次生产物。若想得到真正皂苷元， 1、四环三萜皂苷。常见结构类型有羊毛脂甾烷型需选用温和的水解方法，如光分解法、Smith氧化降解（如猪苓酸A）、达玛烷型（如人参皂苷Rb1）等。 法、酶解法或土壤微生物淘汰培养法等。 2、五环三萜皂苷。常见结构类型有齐墩果烷型（又 称β-香树脂烷型，皂苷元以齐墩果酸为多见）、乌索 Liebermann反应：样品溶于乙酐，加浓硫酸，发 烷型（又称α-香树脂烷型或熊果烷型，皂苷元以熊果生一系列的颜色变化。 酸（乌索酸）为多见）、羽扇豆烷型（常见皂苷元有 醋酐-浓硫酸（Liebermann-Burchard）反应：可白桦脂醇和白桦脂酸）等。 用以区别甾体皂苷和三萜皂苷，甾体皂苷最后呈蓝绿 色，三萜皂苷最后呈红色或紫色。 1、性状：（1）皂苷的分子量较大，不易结晶， 氯仿-浓硫酸反应：样品溶于氯仿，加入浓硫酸后， 大多为白色或乳白色无定形粉末，仅少数为晶体，如氯仿层呈红色或蓝色，硫酸层显绿色荧光。 常春藤皂苷为针状晶体，而皂苷元大多呈结晶状态。 三氯醋酸反应：将甾体皂苷样品的氯仿溶液滴在 （2）皂苷多无明显的熔点，一般测得的是分解点。（3）滤纸上，加三氯醋酸试剂，加热至60?，生成红色渐 皂苷多数具有苦、辛辣味，其粉末对人体各部位的粘变为紫色。在同样条件下，三萜皂苷必须加热到100? 膜有较强的刺激性。（4）皂苷多具吸湿性。（5）大才能显色。 多数甾体皂苷属于中性皂苷，而多数三萜皂苷属于酸 五氯化锑反应：样品溶于氯仿或乙醇，点于滤纸 性皂苷。 上，喷以五氯化锑氯仿液，60～70?加热，显蓝色、 2、溶解性：大多数皂苷极性较大，易溶于水、含灰蓝色或灰紫色。 水稀醇、热甲醇和乙醇，难溶于丙酮、乙醚。皂苷在 芳香醛-硫酸/高氯酸反应：芳香醛多用香草醛或含水丁醇或戊醇中有较大的溶解度。皂苷水解成次皂对-二甲氨基苯甲醛。其中以香草醛应用最为普遍，且 苷后，在水中的溶解度随之降低，易溶于中等极性的显色灵敏。 醇、丙酮、乙醚。皂苷完全水解后生成的皂苷元则不 溶于水，而溶于石油醚、苯、乙醚、氯仿等低极性溶 1、皂苷的提取 剂。 （1）甲醇或乙醇提取-正丁醇萃取法：一般常用 皂苷有一定的助溶性能，可促进其它成分在水中不同浓度的乙醇或甲醇作溶剂提取皂苷。醇提取物混 的溶解。 悬于水中，先用石油醚、乙醚等亲脂性有机溶剂萃取， 3、表面活性（发泡性）：皂苷有降低水溶液表面除去亲脂性杂质，然后再用水饱和的正丁醇萃取，得 张力的作用，多数皂苷的水溶液经强烈振摇能产生持到总皂苷。此法被认为是皂苷提取的通法。 （2）久性的泡沫，并不因加热而消失。而含蛋白质和粘液甲醇或乙醇提取-丙酮或乙醚沉淀法：醇提取液适当浓 质的水溶液虽也能产生泡沫，但不能持久，加热后很缩后，加入适量的丙酮或乙醚，则皂苷可能被沉淀析 快消失。 出。 4、溶血性：皂苷的水溶液大多能破坏红细胞，产 （3）碱水提取法：一些酸性皂苷，可依其难溶于 生溶血现象。溶血强度的大小可用溶血指数来衡量。水，易溶于碱水的性质，先用碱水提取，再加酸酸化 所谓溶血指数是指皂苷在一定条件下使血液中红细胞使皂苷沉淀析出。 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 2、皂苷元的提取 腈-水或甲醇-水为流动相分离和纯化皂苷可得到良好 皂苷元多数难溶或不溶于水，易溶于有机溶剂，的效果。也可将极性较大的皂苷做成衍生物后用正相 所以一般采用加酸加热将粗皂苷水解，再用与水不相柱进行分离。 混溶的弱极性有机溶剂，如苯、氯仿等从水解液中将 ?液滴逆流色谱法 皂苷元提取出来；或者直接用酸水加热水解中药原料 8、甾体皂苷和三萜皂苷有何主要光谱特征？ 中的皂苷，滤除不溶物，水洗，干燥，再用有机溶剂 1、甾体皂苷 提取皂苷元。 （1）紫外光谱：与硫酸反应后可在270～275nm 皂苷加酸加热水解提取皂苷元时，应注意在剧烈范围出现最大吸收峰。凡含C-12羰基的甾体皂苷元均的酸水解条件下，皂苷元容易发生脱水、环合、双键有350nm的最大吸收峰。 移位、取代基移位、构型转化等变化，使得到的皂苷 （2）红外光谱：可用于区别C-25的立体异构体。元不是原来的结构形式，而是次生物质。 25D系甾体皂苷有866～863cm-1、899～894cm-1、920～ 分离含有羰基的甾体皂苷元，常用季铵盐型氨基951cm-1及982cm-1四条谱带，其中899～894cm-1 处乙酰肼类试剂，如吉拉尔T（Girard T）或吉拉尔P的吸收较920～915cm-1处的强2倍，25L系甾体皂苷（Girard P）两种试剂。这类试剂在一定条件下与含在857～852cm-1、899～894cm-1、920～915cm-1及羰基的甾体皂苷元生成腙，借此与不含羰基的皂苷元986cm-1 处也有吸收，其中920～915cm-1处的吸收较分离。B17 899～894cm-1 处强3～4倍。 （3）质谱：甾体皂苷元的质谱中均出现一个很强 刘 斌 北京中医药大学中药学院 的m/z139的基峰和中等强度的m/z115碎片峰以及一 7、皂苷和皂苷元有哪些主要分离方法？ 个很弱的m/z126的辅助离子峰。 1、皂苷分离 （4）NMR谱：螺旋甾烷醇类皂苷元的C-22信号大 （1）分段沉淀法：将皂苷溶于少量甲醇或乙醇，多数情况下出现在δ109.5处。 然后分步加入乙醚、丙酮或乙醚-丙酮混合溶剂，将皂 2、三萜皂苷 苷分步沉淀出来。 （1）质谱：对于具有(12的三萜皂苷，分子中因 （2）胆甾醇沉淀法：甾体皂苷与胆甾醇可生成难具有环乙烯结构，容易发生 RDA 裂解，根据生成的碎溶性分子复合物，据此分离。?凡有3β-OH，A/B环片离子峰可以确定A、B环及D、E环上的取代基性质、反式稠合（5α-H）或?δ的平展结构的甾醇，如β-数目、位置等。 谷甾醇、豆甾醇、胆甾醇和麦角甾醇等，与甾体皂苷 （2）NMR谱：五环三萜齐墩果烷型（β-香树脂醇形成的分子复合物的溶度积最小。?凡有3α-OH，或型）含有6个SP3杂化季碳原子，13CNMR谱中有6个3β-OH经酯化或成苷的甾醇，不能与甾体皂苷生成难季碳信号，乌索烷型（α-香树脂醇型）13CNMR谱中有溶性的分子复合物。?三萜皂苷不能与甾醇形成稳定5个季碳信号。羽扇豆烷型13CNMR谱中有异丙基信号。 的分子复合物，据此可实现甾体皂苷和三萜皂苷的分 9、人参皂苷可分为哪几类？各有何主要结构特 离。 点？ （3）铅盐沉淀法：可用以分离酸性皂苷和中性皂 人参皂苷可分为3种类型：人参二醇型（A型）：苷。 代表化合物有人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd等；人参三 （4）色谱分离法： 醇型（B型）：代表化合物有人参皂苷Re、Rf、Rg1、 ?吸附色谱法：常用的吸附剂是硅胶、氧化铝和Rg2等；齐墩果酸型（C型）：代表化合物有人参皂苷 反相硅胶，洗脱剂一般采用混合溶剂。例如分离混合Ro。 甾体皂苷元的方法，先将样品溶于含2%氯仿的苯中， A型、B型皂苷的皂苷元属于四环三萜，C型皂苷上柱后用此溶剂洗出单羟基皂苷元，再用含20%氯仿的的皂苷元属于五环三萜。人参皂苷A型、B型皂苷元属苯洗出单羟基且具酮基的皂苷元，最后用含10%甲醇的达玛烷型，是达玛烷二醇的衍生物，其中C-20的结构苯洗出双羟基的皂苷元。 为S。A型皂苷元为20（S）-原人参二醇；B型皂苷元 ?分配色谱法：由于皂苷极性较大，可采用分配为20（S）-原人参三醇。这两种皂苷元的性质均不太 色谱法进行分离。一般用低活性的氧化铝或硅胶作吸稳定，当皂苷用矿酸水解时，C-20构型容易由S型转附剂，用不同比例的氯仿-甲醇-水或其他极性较大的为R型。继之侧链受热发生环合，环合后生成人参二 有机溶剂进行梯度洗脱。 醇及人参三醇。若将人参总皂苷用7%HCl的乙醇溶液 ?高效液相色谱法：一般使用反相色谱法，以乙进行酸水解，其酸水解产物用硅胶柱色谱分离，可得 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 到人参二醇、人参三醇和齐墩果酸。 ?甾体母核的C-10、C-13、C-17位取代基均为β- 20（S）-原人参二醇分子中有3个羟基，其中C3 构型。C-3和C-14位上都连有羟基，C-3位羟基多数-OH，C29-OH可能与糖结合成苷，由于C-20羟基是叔为β-构型，C-14位羟基都是β-构型。 羟基，结合的糖与50%乙酸共热即被水解，而C3-OH与 （2）不饱和内酯环部分 糖形成的苷键必须在较强的酸性条件下才能水解。 根据甾体母核C-17位上连接的不饱和内酯环的不 10、甘草的主要成分是什么？有何主要理化性质同，可将强心苷元分为两类。 和生物活性？常用提取方法是什么？ ?甲型强心苷元（强心甾烯类）：甲型强心苷元 甘草主要含有三萜皂苷，其中含量较高的为甘草共由23个碳原子组成，其基本母核称为强心甾。此类 皂苷，又称甘草酸或甘草甜素，是由皂苷元甘草次酸苷元在甾体母核C-17位上连接的是五元不饱和内酯 与2分子葡萄糖醛酸所组成，为甘草的甜味成分。 环，即?αβ-γ-内酯。 甘草皂苷易溶于热稀乙醇，几乎不溶于无水乙醇 ?乙型强心苷元（蟾蜍甾烯类）：乙型强心苷元 或乙醚，但极易溶于稀氨水中。甘草皂苷水溶液有微共由24个碳原子组成，其基本母核称为海葱甾或蟾蜍 弱的起泡性及溶血性。甘草皂苷多以钾盐或钙盐形式甾。此类苷元在甾体母核C-17位上连接的是六元不饱存在于甘草中。甘草皂苷与5%稀H2SO4在加压下，和内酯环，即?αβ，γδ-双烯-δ-内酯。 110~120?进行水解，生成2分子葡萄糖醛酸及皂苷元 2、糖 ——甘草次酸。 （1）α-羟基糖：除D-葡萄糖外，还有6-去氧糖 甘草皂苷和甘草次酸都具有促肾上腺皮质激素（如L-鼠李糖、L-夫糖、D-鸡纳糖）、6-去氧糖甲醚（ACTH）样的生物活性，临床上作为抗炎药使用，并（如L-黄花夹竹桃糖、D-洋地黄糖）等。 用于治疗胃溃疡。 （2）α-去氧糖：主要存在于强心苷类化合物的 甘草皂苷常用提取方法为碱溶酸沉法。 分子中，主要有2，6-去氧糖（如D-洋地黄毒糖）、2， 11、柴胡和知母的主要成分是什么？有何生物活6-二去氧糖甲醚（如L-夹竹桃糖、D-加拿大麻糖）等。 性？ 3、苷元和糖的连接方式 柴胡：柴胡主要成分为三萜皂苷，其苷元为齐墩 强心苷类按与苷元与糖的连接方式不同分为以下 果烷衍生物，如柴胡皂苷a、b、c、d等。柴胡总皂苷三种类型： 具有镇静、止痛、镇咳和抗炎作用。 ?型强心苷：苷元-（2，6-二去氧糖）X-（D-葡 知母：知母中的化学成分主要为甾体皂苷，可分萄糖）Y 为螺甾烷醇类（如知母皂苷A?和B?等）、异螺甾烷 ?型强心苷：苷元-（6-去氧糖）X-（D-葡萄糖）醇类（如知母皂苷?）和呋甾烷醇类（如知母皂苷B?Y 等）。其中知母皂苷A?含量最高。知母皂苷可抑制血 ?型强心苷：苷元-（D-葡萄糖）Y 小板聚集。B17 紫花样地黄苷A和洋地黄毒苷均属?型强心苷， 真地吉他林为?型强心苷，绿海葱苷则属?型强心苷。 刘 斌 北京中医药大学中药学院 2、强心苷有何主要物理性质？ 1、什么是强心苷？有何主要结构特征？如何分 1、性状：强心苷多为无色结晶或无定形粉末，具 类？ 有旋光性。C-17位上侧链为β-构型者味苦，而α- 强心苷是指天然界存在的一类对心脏具有显著生构型者味不苦，但无强心作用。对粘膜有刺激性。 理活性的甾体苷类，主要用于治疗充血性心力衰竭及 2、溶解性：强心苷一般可溶于丙酮、甲醇、乙醇 节律障碍等心脏疾患。 及水等极性溶剂，微溶于乙酸乙酯、含醇氯仿，难溶 强心苷由强心苷元和糖缩合而成。强心苷元属甾于乙醚、苯、石油醚等非极性溶剂。 体衍生物，其结构特征是甾体母核的C-17位上连接一 强心苷的溶解性与其分子中所含糖的数目和种 个不饱和内酯环。 类、苷元所含的羟基数目和位置等有关。 1、强心苷元 （1）糖的数目：糖基多的原生苷比其次生苷及苷 （1）甾体母核部分 元的亲水性强，在极性溶剂中的溶解度大。苷元则难 ?甾体母核部分的A、B、C、D四个环的稠合方式溶于极性溶剂，易溶于氯仿、乙酸乙酯中。 为B/C环反式，C/D环多为顺式，个别反式。A/B环则 （2）糖的种类：当苷分子中糖基数目相同时，则 有顺式或反式两种稠合方式，但大多数是顺式，如洋随着葡萄糖、6-去氧糖和2，6-二去氧糖羟基数目的递地黄毒苷元；少数为反式，如乌沙苷元。 减，在极性溶剂中的溶解度依次降低。 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 （3）羟基数目：强心苷类的溶解性能随苷元部分苷元结构的改变，形成脱水苷元。例如以强烈酸水解 羟基数目的增加，亲水性增强。例如乌本苷虽是单糖法进行水解时，紫花洋地黄苷A不能得到洋地黄毒苷苷，但其分子中共有8个羟基（其中5个羟基存在于元而得缩水洋地黄毒苷元；紫花洋地黄苷B不能得到苷元部分），水溶性很大（1：75），难溶于氯仿。洋羟基洋地黄毒苷元而得到二缩水羟基洋地黄毒苷元。 地黄毒苷虽是三糖苷，但分子中的3个糖基都是α- 2、酶水解 去氧糖，整个分子只有5个羟基，在水中溶解度很小， 含强心苷的植物中均有水解葡萄糖的酶，无水解 易溶于氯仿（1：40）。 α-去氧糖的酶。所以酶能水解除去强心苷分子中的葡 （4）羟基位置：强心苷分子中羟基数目相等时，萄糖而保留α-去氧糖，得到次级苷。紫花洋地黄叶中 溶解性能也受苷元中羟基位置的影响，苷元上的羟基含有紫花苷酶，可将紫花洋地黄苷A、B分别水解除去不能形成分子内氢键的比能形成分子内氢键的水溶性分子中的D-葡萄糖而生成洋地黄毒苷和羟基洋地黄毒 大。毛花洋地黄苷乙几乎不溶于水，在氯仿中溶解度苷，故紫花洋地黄叶中上述四种苷都存在。 较大（1：550），因为苷元上的羟基能形成分子内氢 糖基上有乙酰基的强心苷对酶作用阻力大。苷元 键而极性降低；而毛花洋地黄苷丙在水的溶解度（1：类型不同，被酶水解的难易亦有区别。一般来说，乙 18500）较大，在氯仿中的溶解度（1：17500）小于毛型强心苷较甲型强心苷更易为酶水解。 花洋地黄苷乙，因为苷元上的羟基不能形成分子内氢 酶解法在强心苷生产中有很重要的作用。由于甲 键。 型强心苷的强心作用与分子中的糖基数目有关，即苷 3、在提取分离强心苷时，应注意什么问题？ 的强心作用强度为单糖苷＞二糖苷＞三糖苷，所以常 1、提取 利用酶解法使植物中的原生苷水解成强心作用更强的 提取原生苷，首先要注意抑制酶的活性，防止酶次生苷。 解，原料要新鲜，采收后要低温快速干燥，保存期间 3、碱水解 注意防潮，控制含水量，提取时要避免酸碱的影响。 强心苷的苷键对碱较稳定而不被水解。但是，在 提取次生苷，可利用酶解或酸水解的方法，提高目标碱试剂的作用下，可使强心苷分子中酰基水解、内酯 提取物的产量。 环开裂、?20（22）转位及苷元异构化等。 常用甲醇或70～80%的乙醇作溶剂。原料含脂类杂 （1）酰基的水解 质较多时，可先用石油醚或溶剂汽油脱脂；原料含叶 常用的碱有碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钙和氢 绿素较多时，可用稀碱液皂化法，静置析胶法，活性氧化钡，它们能选择性地水解苷元或糖基上的酰基而 炭吸附法除去叶绿素。 不影响内酯环。碳酸氢钠或碳酸氢钾主要使α-去氧糖 2、分离 上的酰基水解，而α-羟基糖及苷元上的酰基往往不被 强心苷浓缩液，可用氯仿和不同比例的氯仿-甲醇其水解；氢氧化钙或氢氧化钡可以使α-去氧糖、α-（乙醇）溶液依次萃取，将强心苷按极性大小分为几羟基糖和苷元上的酰基水解。 部分，再采用溶剂萃取法、逆流分溶法和色谱分离法 （2）内酯环的水解 分离。分离亲脂性单糖苷、次苷和苷元，一般选用吸 在水溶液中，氢氧化钠、氢氧化钾能使强心苷的 附色谱，常以硅胶和氧化铝为吸附剂。B17 内酯环开裂，酸化后又可重新闭环。醇溶液中，氢氧 化钠、氢氧化钾亦能使内酯环开裂，但同时还使其结 构异构化，故酸化也不再有可逆变化。 刘 斌 北京中医药大学中药学院 甲型强心苷在氢氧化钾的醇性溶液中，通过内酯 4、强心苷有哪些主要水解反应？ 环的质子转移、双键转移形成C-22活性亚甲基。乙型 1、酸水解 强心苷在醇性氢氧化钾溶液中，不发生双键转移，不 （1）温和酸水解：用稀酸，如0.02～0.05mol/L能形成活性亚甲基。 的盐酸或硫酸，在含水醇中经短时间（半小时至数小 5、强心苷有哪些主要显色反应？ 时）加热回流。在此条件下可使?型强心苷水解生成 1、甾体母核的显色反应 苷元和糖。如紫花洋地黄苷A经温和酸水解，得到洋 （1）醋酐-浓硫酸反应（Liebermann-Burchard反地黄毒苷元、D-洋地黄毒糖和洋地黄双糖。 应）：强心苷溶于氯仿，加醋酐-浓硫酸混合液数滴， （2）强烈酸水解：?型和?型强心苷中的糖，均反应液呈黄?红?蓝?紫?绿的颜色变化，最后褪色。 非α-去氧糖，用温和酸水解无法使其水解，必须增高 （2）Salkowski反应：样品溶于氯仿，加浓硫酸，酸的浓度（3～5%），延长水解时间或加压。但常引起氯仿层显血红色，硫酸层显绿色荧光。 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 （3）三氯化锑反应：样品点于滤纸或薄层板，喷 7、蟾酥含有哪些主要成分？有何主要药理活性和 以三氯化锑氯仿液，100?加热，显灰蓝、蓝、灰紫斑理化性质？ 点。 1、化学成分 （4） 三氯乙酸-氯胺T反应：样品点于滤纸或薄 蟾酥化学成分复杂，主要有蟾蜍甾二烯类、强心 层板，喷以三氯乙酸-氯胺T试剂，100?加热，紫外甾烯蟾毒类、吲哚碱类、甾醇类以及肾上腺素、多糖、 灯下观察荧光。可用于区分三种洋地黄毒苷元（洋地蛋白质、氨基酸和有机酸等，前二类成分具有强心作 黄毒苷元、羟基洋地黄毒苷元和异羟基洋地黄毒苷用。 元）。洋地黄毒苷元衍生的苷类显黄色荧光；羟基洋 蟾蜍甾二烯类和强心甾烯蟾毒类成分的甾体母核 地黄毒苷元衍生的苷类显亮蓝色荧光；异羟基洋地黄分别和乙型强心苷元和甲型强心苷元相同。不同的是， 苷元衍生的苷类显蓝色荧光。 蟾蜍甾二烯类和强心甾烯蟾毒类甾体母核C-3位羟基 （5）Tschugaev反应 多以游离状态存在或与酸成酯，故它们不属于苷类化 2、C-17位不饱和内酯环的颜色反应 合物。 甲型强心苷在碱性醇溶液中，双键由20（22）转 2、理化性质 移到20（21），生成C-22活性亚甲基，能与下列活性 蟾酥中蟾毒配基、结合性蟾毒配基和强心甾烯蟾 亚甲基试剂作用而显色。乙型强心苷在碱性醇溶液中毒类都具有强心苷元的母核结构，所以它们都具有强 不能产生活性亚甲基，故无此类反应。此类反应不仅心苷元母核的颜色反应。强心甾烯蟾毒类还具有甲型 可用于强心苷类的检识，还可用来区别甲型和乙型强强心苷的反应，如Kedde反应、Legal反应、Baljet心苷。其反应均呈深红色。 反应和Raymond反应等。而蟾蜍甾二烯类蟾毒配基和 （1）Legal反应：试剂为亚硝酰铁氰化钠和氢氧结合蟾毒配基和乙型强心苷一样不具有活性亚甲基反 化钠醇溶液。 应。此外还可以用紫外光谱来鉴别：强心甾烯类在 （2）Raymond反应：试剂为间二硝基苯和氢氧化217～220nm（logε4.20～4.42）有吸收，而蟾蜍甾二钠醇溶液。 烯类在295～300nm（logε约3.93）有吸收。 （3）Kedde反应：试剂为3，5-二硝基苯甲酸和 结合型强心甾烯和蟾蜍甾二烯类化合物结构中具 氢氧化钠醇溶液。 有酯键，可被碱水解，生成游离的强心苷元类化合物。 （4）Baljet反应：试剂为苦味酸和氢氧化钠醇溶应当注意的是，在碱水解反应中常常伴随着异构化物 液。 的产生。 3、α-去氧糖的颜色反应 8、麝香含有哪些主要成分？有何主要药理活性？ （1）Keller-Kiliani（K-K）反应：α-去氧糖的 麝香的化学成分较为复杂，其中麝香酮（1-3-甲显色反应，试剂包括冰醋酸、浓硫酸和三氯化铁。若基十五环酮）是天然麝香的有效成分之一，具有麝香 在此条件下，能水解出游离的α-去氧糖，醋酸层渐呈特有的香气，对冠心病有与硝酸甘油同样的疗效。麝 蓝色。需要注意的是，这一反应是α-去氧糖的特征反香酮为油状液体，难溶于水，易溶于乙醇。另外，麝 应，但只对游离的α-去氧糖或α-去氧糖与苷元连接香的雄性激素样作用与其含有的雄甾烷衍生物有密切 的强心苷呈色。α-去氧糖和葡萄糖或其他羟基糖连接关系。 的双糖、叁糖及乙酰化的α-去氧糖，由于在此条件下 不能水解出的α-去氧糖而不呈色。 （2）占吨氢醇反应：该反应为α-去氧糖的显色刘 斌 北京中医药大学中药学院 反应，只要分子中有α-去氧糖即可呈红色。试剂包括 1、胆汁酸类成分有何主要结构特征？ 冰醋酸、浓盐酸和占吨氢醇。 天然胆汁酸是胆烷酸的衍生物，在动物胆汁中通 （3）过碘酸-对硝基苯胺反应 常与甘氨酸或牛磺酸的氨基以酰胺键结合成甘氨胆汁 （4）对-二甲氨基苯甲醛反应 酸或牛磺胆汁酸，并以钠盐形式存在。 6、如何用紫外光谱区别甲型强心苷元和乙型强心 胆烷酸的结构中有甾体母核，其中B/C环稠合皆苷元？ 为反式，C/D稠合也多为反式，而A/B环稠合有顺反两 具有?αβ五元不饱和内酯环的甲型强心苷元在种异构体形式。甾体母核A/B环为顺式稠合时称为正217～220nm（logε4.20～4.42）处呈现最大吸收，具系，若为反式稠合则为别系，如胆酸为正系，而别胆 有?αβγδ六元不饱和内酯环的乙型强心苷元的紫酸则为别系。 外光谱特征吸收在295～300nm（logε3.39）处。 胆汁中发现的胆汁酸有近百种。在高等动物的胆 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 汁中发现的胆汁酸通常是24个碳原子的胆烷酸的衍生 有机酸按其结构可分为芳香族有机酸、脂肪族有 物，常见的有胆酸、去氧胆酸、鹅去氧胆酸、α-猪去机酸和萜类有机酸三类。 氧胆酸及石胆酸；而在鱼类、两栖类和爬行类动物中 （1）芳香族有机酸：羟基桂皮酸衍生物普遍存在 的胆汁酸则含有27个碳原子或28个碳原子，这类胆于中药中，尤以对羟基桂皮酸、咖啡酸、阿魏酸和芥 汁酸是粪甾烷酸的羟基衍生物，而且通常和牛磺酸结子酸较为多见。桂皮酸衍生物的结构特点是：基本结 合。 构为苯丙酸，取代基多为羟基、甲氧基等。有些桂皮 2、胆汁酸类成分有何主要化学性质、鉴别反应和酸衍生物以酯的形式存在于植物中，如咖啡酸与奎宁 药理活性？如何提取？ 酸结合成的酯，3-咖啡酰奎宁酸（又称绿原酸）和3， 化学性质 4-二咖啡酰奎宁酸分别是金银花抗菌有效成分之一及 胆酸的结构中有羧基，可与碱反应生成盐，与醇茵陈利胆有效成分之一。 反应生成酯。上述两个化学性质常常用于胆酸的提取 （2）脂肪族有机酸：脂肪族有机酸，如柠檬酸、 与分离过程中。游离胆汁酸在水中溶解度很小，但与苹果酸、酒石酸、琥珀酸等普遍存在于中药中。 碱成盐后则易溶于水，故常用碱水溶液提取胆汁酸， （3）萜类有机酸：属于萜类化合物，如甘草次酸、 在胆汁酸的分离和纯化时，常将胆汁酸制备成酯的衍齐墩果酸等。 生物，使其容易析出结晶。 理化性质 鉴别反应 （1）性状：低级和不饱和脂肪酸多为液体，高级 （1）Pettenkofer反应：胆汁酸与蔗糖和浓硫酸脂肪酸和芳香酸多为固体。 反应，在两液面分界处出现紫色环。 （2）溶解性：小分子脂肪酸和含极性基团较多的 （2）Gregory Pascoe反应：胆汁酸与硫酸和糠醛脂肪酸易溶于水，难溶于亲脂性有机溶剂；大分子脂 混合，65?加热，显紫色。 肪酸和芳香酸大多为亲脂性化合物，易溶于亲脂性有 （3）Hammarsten反应：与20%铬酸溶液温热，胆机溶剂而难溶于水。有机酸均能溶于碱水。 酸显紫色，鹅去氧胆酸不显色。 （3）酸性：因分子中含羧基而呈较强的酸性，能 药理活性 与碳酸氢钠反应生成有机酸盐。 去氧胆酸具有松弛平滑肌的作用，鹅去氧胆酸和 提取分离 熊去氧胆酸有溶解胆结石的作用，α-猪去氧胆酸具有 （1）有机溶剂提取法：利用游离有机酸（分子量 降低血液胆固醇的作用。 小的除外）易溶于亲脂性有机溶剂而难溶于水，有机 提取方法 酸盐易溶于水而难溶于亲脂性有机溶剂的性质，一般 各种胆汁酸的提取方法基本相同，即将新鲜动物先用稀酸水湿润药材，使有机酸游离，然后再用合适 胆汁加入适量的固体氢氧化钠进行加热，使结合胆汁的有机溶剂提取。 酸水解成游离胆汁酸钠盐，溶于水中，收集水层，加 （2）离子交换树脂法：将中药的水提取液直接通 盐酸酸化，使胆汁酸沉淀析出，即得总胆酸粗品，然过强碱型阴离子交换树脂柱，使有机酸交换到树脂柱 后再用适当方法进行分离精制。 上，碱性成分和中性成分则流出树脂柱而被除去，先 3、牛黄、熊胆含有哪些主要成分？ 用水洗净树脂，再用稀氨水洗脱树脂柱，从树脂柱上 牛黄 交换下来的有机酸以铵盐的形式存在于洗脱液中，将 牛黄约含8%胆汁酸，主要成分为胆酸、去氧胆酸洗脱液减压蒸去过剩的氨水，加酸酸化，总有机酸即 和石胆酸。此外，尚含7%SMC（一种肽类混合物）及胆可游离析出。 红素。牛黄具有解痉作用，其对平滑肌的松弛作用主 5、金银花含有哪些主要成分？有何主要理化性 要由去氧胆酸引起，而SMC作用相反，能引起平滑肌质？如何提取分离？ 的收缩作用。 金银花主要有效成分为有机酸。其中绿原酸、异 熊胆 绿原酸以及3，4-二咖啡酰奎宁酸、3，5-二咖啡酰奎 熊胆解痉作用主要由熊去氧胆酸引起，其解痉作宁酸、4，5-二咖啡酰奎宁酸的混合物是金银花的主要用原理与罂粟碱作用相似。熊去氧胆酸在不同来源的抗菌有效成分。绿原酸为一分子咖啡酸与一分子奎宁 熊胆中含量差异很大。 酸结合而成的酯，即3-咖啡酰奎宁酸；异绿原酸是绿 4、中药中常见有机酸可分为哪些结构类型？有何原酸的同分异构体，为5-咖啡酰奎宁酸。 主要理化性质？如何提取分离？ 绿原酸的理化性质 结构类型 （1）酸性：呈较强酸性，能使石蕊试纸变红，可 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 与碳酸氢纳形成有机酸盐。 鞣质的常用方法有哪些？ （2）溶解性：可溶于水，易溶于热水、甲醇、乙 1、理性性质 醇、丙酮等亲水性溶剂，微溶于乙酸乙酯，难溶于乙 （1）性状：鞣质多为无定形粉末，分子量在500～醚、氯仿、苯等亲脂性有机溶剂。 3000之间；呈米黄色、棕色、褐色等；具有吸湿性。 （3）水解性：绿原酸分子结构中含酯键，在碱性 （2）溶解性：鞣质具有较强的极性，可溶于水、 环境中易被水解。 甲醇、乙醇、丙酮等亲水性溶剂，也可溶于乙酸乙酯， 绿原酸的提取分离 难溶于乙醚、氯仿等亲脂性溶剂。 （1）提取：利用绿原酸极性较大的性质，通常采 （3）还原性：鞣质是多元酚类化合物，易氧化， 用水煎煮提取法、水提醇沉提取法、70%乙醇回流提取具有较强的还原性，能还原多伦试剂和费林试剂。 法提取。 （4）与蛋白质作用：鞣质可与蛋白质结合生成不 （2）分离：?离子交换法：用强碱型阴离子交换溶于水的复合物沉淀。实验室一般使用明胶检识、提 树脂分离。?聚酰胺吸附法：提取物溶于水，通过聚取或除去鞣质。 酰胺柱，依次用水、30%甲醇、50%甲醇和70%甲醇洗脱， （5）与三氯化铁作用：鞣质的水溶液可与三氯化 收集70%甲醇洗脱液，得到绿原酸。B17 铁作用呈蓝黑色或绿黑色反应，常用作鞣质的检识反 应。 （6）与重金属盐作用：鞣质的水溶液能与醋酸铅、 醋酸酮、氯化亚锡等重金属盐产生沉淀反应。这一性 刘 斌 北京中医药大学中药学院 质通常用于鞣质的提取分离或除去中药提取液中的鞣 1、什么是鞣质？鞣质有何主要生物活性？可分为质。 哪些结构类型？ （7）与生物碱作用：鞣质为多元酚类化合物，由 鞣质又称鞣酸或单宁，是植物界中一类结构比较于具有酸性，故可与生物碱结合生成难溶于水的沉淀。 复杂的多元酚类化合物。这类物质能与蛋白质结合形常作为检识生物碱的沉淀试剂。 成不溶于水的沉淀。鞣质具有多种生物活性：?收敛 （8）与铁氰化钾的氨溶液作用：鞣质的水溶液与 作用；?抗菌、抗病毒作用，如贯众鞣质可抗流感病铁氰化钾氨溶液反应呈深红色，并很快变成棕色。 毒；?解毒作用；?降压作用，如槟榔鞣质；?驱虫 2、提取分离 作用；?清除自由基、抗衰老作用等。根据结构，鞣 （1）提取：一般用95%乙醇作为溶剂，采用冷浸质可分为可水解鞣质和缩合鞣质。 或渗漉法提取。 1、可水解鞣质 （2）分离：将提取物加热水溶解，放凉，滤除不 可水解鞣质是由酚酸与多元醇通过苷键和酯键形溶物，滤液用乙醚等亲脂性有机溶剂除去脂溶性成分， 成的化合物，可被酸、碱和酶催化水解。根据可水解再用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯萃取液回收溶剂，加水 鞣质经水解后产生酚酸的种类，又可将其分为没食子溶解，在水溶液中加入醋酸铅或咖啡碱沉淀鞣质，经 酸鞣质和逆没食子酸鞣质。 处理后再用色谱法进一步分离。葡聚糖凝胶柱色谱法 （1）没食子酸鞣质：水解后可生成没食子酸（或是分离鞣质的常用方法，多以水、不同浓度的甲醇和 其缩合物）和多元醇。没食子酸鞣质水解后产生的多丙酮作洗脱剂。 元醇大多为葡萄糖。如五倍子鞣质。 3、除去鞣质的方法 （2）逆没食子酸鞣质：水解后产生逆没食子酸和 除去鞣质的方法主要有冷热处理法、石灰（沉淀） 糖，或同时有没食子酸等其他酸的生成。有些逆没食法、铅盐（沉淀）法、明胶（沉淀）法、聚酰胺吸附 子酸鞣质的原生物并无逆没食子酸的组成，其逆没食法和溶剂法（醇溶液调pH法）等。 子酸是由鞣质水解所产生的黄没食子酸或六羟基联苯 3、蛋白质、酶和多糖有何主要理化性质？ 二甲酸脱水转化而成。如诃子鞣质。 1、蛋白质 2、缩合鞣质 蛋白质是由氨基酸通过肽键聚合而成的高分子化 缩合鞣质不能被酸水解，经酸处理后反而缩合成合物，分子量可达数百万。多数可溶于水，形成胶体 不溶于水的高分子鞣酐，又成鞣红。缩合鞣质化学结溶液，加热煮沸则变性凝结而自水中析出。不溶于有 构复杂，组成缩合鞣质的基本单元是黄烷-3-醇，最常机溶剂，用水煮醇沉法即可使蛋白质沉淀除去。 见的是儿茶素。如大黄鞣质。 蛋白质溶于碱水中，加入少量硫酸铜溶液，即显 2、鞣质有何主要理化性质？如何提取分离？除去紫色或紫红色，称之为双缩脲反应，是检识蛋白质的 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网 常用方法。 2、酶 酶是一种活性蛋白，除具有蛋白质的通性外，还 具有促进化学成分水解的性质，如苷类。酶的水解作 用具有专属性。加热、加入电解质或重金属盐可使酶 灭活。 3、多糖 糖类成分包括单糖、低聚糖（2～10分子单糖）和多糖（含10个以上单糖）。多糖经酸或酶水解后能生 成多分子单糖。中药中常见多糖包括淀粉、菊糖、黏 液质、果胶、树胶、纤维素和甲壳质等。多糖不具有 单糖和低聚糖的一般性质，无甜味，大多不溶于水， 即使有的多糖在水中有一定溶解度，也只能形成胶体 溶液。多糖不溶于稀醇及其它有机溶剂。 4、蜕皮激素有何主要生物活性和结构特点？ 蜕皮激素是一类具有强蜕皮活性的物质，具有促 进细胞生长的作用，对人体有促进蛋白质合成、排除 体内胆固醇、降血脂、抑制血糖上升等作用。牛膝中 含有的牛膝甾酮、杯苋甾酮即属于此类成分。蜕皮激 素的主要结构特点是甾核上带有7位双键和6位酮基。此外还有多个羟基，因而在水中溶解度较大。蜕皮激 素的活性与其甾核A/B环的顺式稠合（5β-H）有关。 你的考试好帮手，记住我们的网址：www.zuowenw.com.快乐阅读网