口腔黏膜异种异体移植免疫反应巨噬细胞浸润及他克莫司干预作用的

口腔黏膜异种异体移植免疫反应巨噬细胞浸润及他克莫司干预作用的 中山大学 硕士学位论文口腔黏膜异种异体移植免疫反应巨噬细胞浸润及他克莫司干预 作用的实验研究 姓名:左雯鑫 申请学位级别:硕士 专业:口腔临床医学 指导教师:程斌 20090525中山大学硕上学位论文 口腔黏膜异种异体移植免疫反应巨噬细胞浸润及他克莫司于预作用的实验研究 口腔黏膜异种异体移植免疫反应巨噬细胞浸润 及他克莫司干预作用的实验研究 专业:口腔临床医学 硕士生:左雯鑫 导师:程斌主任医师 中文摘要 单核,巨噬细胞系统(,,,,,,;,,,, ,,,,,;,,, ,,,,,,，,,,)在非特异性免疫中，主要通过吞噬作用杀灭和清除病原体及异物并介导炎症反应。巨噬细胞来自于骨髓的造血干细胞，经血流到达各组织和脏器，发育成熟为,由，是体内功能最活跃的细胞之一，在炎症反应、抗原提呈和免疫调节等方面发挥重要作用，其活跃的功能是由于表面存在多种抗原及多种受体。急性移植排斥反应主要是以移植物内单个核细胞浸润为特征的细胞免疫应答，大量研究表明外周血单核细胞及组织中巨噬细胞通过加工递呈抗原、分泌多种炎性介质和免疫调节因子而与异种移植免疫排斥反应密切相关，但口腔黏膜中巨噬细胞作为效应细胞能否直接识别和排斥异种移植物及其在急性排斥反应中的动态变化过程目前尚缺乏相关报道。因此本研究利用本课题组建立的大鼠口腔黏膜异种异体移植模型，研究大鼠颊黏膜巨噬细胞浸润与外周血单核细胞在口腔黏膜异种异体移植免疫反应中的动态变化过程及规律，有助于阐明口腔黏膜异种异体移植免疫病理反应过程。目的 研究大鼠口腔黏膜异种异体移植模型急性排斥反应过程中颊黏膜,,,,，巨噬细胞浸润及外周血,,,,，单核细胞百分数的动态变化过程和规律及其意义。巾山大学硕:,:学位论文 口腔黏膜异种异体移植免疫反应巨噬细胞浸润及他克莫司干预作用的实验研究 方法 ,、模型的建立:,,只,,,级雌性,,,,,,大鼠随机分成移植组,,只、 常正、只,组常正、只,,组,,,,,，伤创、只,,组伤创、只,,组,,,,,，植 ，,,,,,组,只，以灌胃给药方式给予各用药组大鼠他克莫司(,,,,,)，手术前 三天,,,,,,,,,,,，术后蝤,,,,,,,,,。按照本课题组前期建立的大鼠口腔黏膜异 种异体移植模型手术方法给予各组相应处理，移植组和移植，,,,,,组:,,,,,; 出。二是失地农民来 小鼠舌体移植到雌性,,,,,,大鼠口腔左侧颊黏膜内;创鬟萋霎雾嘉囊,,,,,囊,到城市后，普遍感到孩子的教育成本增加，一方面是 学费， 篓鄯誊墓雾蠢囊羹囊羹蠢薹鬟鬟鬟;萋羹蓁羹蒙蓁霎,,,,,冀?薹弱那冀蠢薹另一方面是补习家教费。三是农民在小区购房后需要 支付物业管理费用。相对于住在农村而言家庭支出就多出 一项 萋雾薹鋈羹羹萋鬃菱;圈。因此，农民在被征地后收入增加少与支出增加多 的矛盾，将使其陷入生活困境中。使失地农民趋向边缘化 荔;萋羹羹 。,(,社会保障的缺失 失地农民边缘化也表现在社会保 障的缺失，虽然地方政府有针对失地农民的生活、就业 以及其他内容的保障，但是失地农民真正能受益的却不多。 完全失地农民享受集体福利减少，也被排斥在国家对城市社 会保障体系之外，两头不沾边。根据调查，被征地后失地农 民的农村合作医疗的参保率从征地前的,,(,,降至,,(,,(下降了,,(,,;而与此形成对比的是城镇居民医疗保险的参保 率只增加了,(,,(农村合作医疗下降幅度和城镇居民医疗 保险的增加量差距很大。根据调查结果，不仅是社会保险 参保率低，失地农民参加基本社会保障的积极性也低。在调 查中被问及失地农民基本生活保障和被征地农民生活补助 费这些社会保障项目 时(,,(,,的失地农民没有参加被 征地农民基本生活保障(,,(,,的失地农民没有享受被征地农民 的生活补助。在我国。由于中山大学硕士学位论文 口腔黏膜异种异体移植免疫反戍巨噬细胞浸润及他克莫司干预作用的实验研究 ,,天之外，移植组、移植，,,,,,组和创伤，,,,,,组大鼠颊黏膜,,,,，巨噬 细胞记数均随时间推移呈递减趋势。相同时间点不同处理组大鼠在术后第,天、 第,,天和第,,天移植区巨噬细胞记数差别均有统计学意义(,,,(,,)。相同 处理不同时间点各组内移植组、创伤组大鼠在,个不同时间点移植区巨噬细胞 记数差别有统计学意义(尸,,(,,)。 ,、流式细胞仪检测结果显示，术后第,天正常组外周血;,,,，单核细胞 百分数为最高值(,,(,,,)，其次是移植，,,,,,组(,,(,,,)，再次为正常，,,,,, 组(,,(,,,)。术后第,,天正常组为最高值(,,(,,,)，其次足创伤，,,,,,组 (,,(,,,)，再次为创伤组(,,(,,,)。术后第,,天移植，,,,,,组为最高值 (,,(,,,)，其次是创伤组(,,(,,)，再次为正常，,, 移植，,,,,,组、移,,,组(,,(,,,)，每两组之间 比较显示移植与 植组与创伤组、移植，,,,,,组与创伤， ,,,,,组、移植，,,,,,组与正常，,,,,,组在术后第,,天其外周血,,,,， 单核细胞百分数差别有统计学意义(尸,,(,,)。除外正常组和正常，,,,,,组， 其余各组外周血,,,,，单核细胞百分数最高值均出现在术后第,,天，最低值 均出现在术后第,,天。相同时间点不同处理组大鼠外周血,,,,，单核细胞百 分数在术后第,天和第,,天其外周血;,,,，单核细胞百分数差别无统计学意 义(尸,,(,,)，而在第,,天差别有统计学意义(,,,(,,)。相同处理不同时问 点各组内移植组、创伤组大鼠在,个不同时间点其外周血,,,,，单核细胞百分 数差别有统计学意义(尸,,(,,)。 ,、术后第,天移植组大鼠外周血,,,,，单核细胞百分数与其颊黏膜局部 浸润的巨噬细胞记数成负相关关系(,,,(,,)，其余各时间点之间各处理组大 鼠外周血,,,,，单核细胞百分数与颊黏膜局部浸润的巨噬细胞记数均无相关关 系(尸,,(,,)。 结论 ,、本实验在异种抗原存在的情况下，大鼠体内巨噬细胞可识别并直接参与排斥异种移植物的动态过程，但巨噬细胞识别和排斥异种移植物的具体作用机制还需进一步研究。 中山大学硕士学位论文 口腔黏膜异种异体移植免疫反应巨噬细胞浸润及他克莫司干预作用的实验研究 ,, ,,,,,,,,,,, ,,,,, ,, ,,;,,,,,,, ，,,,,,,,,,,,, ,, ,,, ,,,, ,,;,,, ,,,,,,,,,,,,,,,,,,, ,,,,, ,,, ,,, ,,,,,,,,,,; ,毋,,;;, ,, ,,;,,,,,,, ,,,,,:,,,,,,,,,,, ,,,,:,,,,,, ,,, ,,,,,,，,,,:,,,,,,, ,,,,, ,,,,,,,,,,;,,,,,, ,,,,,,;,,,, ,,,,,;,,, ,,,,,,(,,,),,,,, ,,, ;,,,,, ,, ,,,,,,,, ,, ,,,,,,,,,,, ,,,,,, ,,,,,,, ,,,,,;,,,,,, ,,,, ,,,,,,,, ,,,,,,,,,,)，,,,;,,,, ,, ,,,,,,,,,,,,吼,,,,;,,, ,,,,,,,,,, ,, ,,, ,,,, ,,,,,, ,(,,, , ;,,,,, ,,,,,,,,,,,,,;,,,, ;,,,， ,,,, ,,,,, ,,, ,，,,,,,陀啪,,, ,,,,,,,, ,,,, ,,,,,, ,, ,唱,, ,,;,,,,,,,，,,,;, ,, ,,, ,, ,,, ,,,, ,;,,,, ;,,,, ,, ,,,,， ,, ,,,,, ,, ,,,,,,,, ,,,, ,,,,,,,,,,,,叫 ,,,;,,,,，,,垂,,,, ,,,,,,,,,,,, ,,, ,,,,,,,,,,;,, ,,,,,,,,,,( ，,,,,,,,,,, ,,,,,,,, ,,,,,,, ,,, ,,;,,,,,, ,,,, ,,,,, ,, ,,, ,;,,,, ,,;,,,, ,, ,,,,,,,,, ,,,,,,,,(,,,,, ,,, , ,,唱, ？,,,,,,, ,,,,,,;, ,,,, ,,,,;,,,,,,;,,,,,,, ,,;,,,,,, ,,,,,,, ,, ,,,,,,,,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,;,,喇,;,,,, ,,, ,,,,,,,, ,, ,,,,,,,,,,, ,疏;,,, ;,,, ,, ,,,, ,,,,,,,，,,, ,,, ,,, , ,,,,,,,(,,,,,,,, ,,,,,,;, ,,,,,,;, , ,锄,; ;,,,,, ,, ,,,,;”,,,,,,,,,,,, ;,,,,,,, ,,,,;,,,,锄, ,,;,,,, ,, ,,,,,,,,,,,,,,幔簦椋铮?,,,,,,,,百;,, ,,,,;,,,, ,,,;,,, ;,,,,,,,,, ,, ,,,;,,,,,,,,,,,,,,,, ,,,,,,,, ,,,,,,,,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,,;,,,(，, ,,,, ,,,,,,,,,,，,,,,, ,,印,,,;, ,,, ,,,,,,,;,,;, ,, ,,, ,,,,,,,; ,,,;,,, ,, ,,;,,,,,,, ,,,,,,,,,,,,锄,、,,,,,,, ,,,,,,,,, ,,,,, ,,,,,,;,,,, ;,,,, ,,,, ;,,,,;,,,,,,,; ,, ,,,,,,,,;,,,,,,, ,, ,,, ,, ,,, ,;,,, ,,,,,,,,,,;,, 啊,;,,,, ,, ,,, ,,,, ,,;,,, —,一中山大学硕上学位论文 口腔黏膜异种异体移植免疫反应巨噬细胞浸润及他克莫司干预作用的实验研究,,,,,,,,,,,,,,,,,, ,,,,,(,,, ,;,,,, ,,, ,,,,,,,,,,, ,,, ,,,,,,; ,,,;,,, ,, ,,, ,,,,，,,;,,,,,,, ,,,,,,,,,,,,, ,, ,,;;,, ,,;,,, ,,, ,,,;,,, ,, ,,,,,,,,,, ,,,,, ,,,,，,,,,,,;,,,, ;,,,, ,, ,,, ,;,,, ,,,,,,,,,,;,, ,,,,;,,,, ,, ,,, ,,, ,,;,,, ,,,,,,,,,,,,,,,,,,, ,,,,,锄, ,, ,,,,,,, ,,, ,,,,，,,,,, ,,, ,,,,,,,;,,;, ,, ,,,, ,,,;,,,(,,,,,,,,, ,,, ,,,,,,, ,( ,,,,,,,,,,,,, ,, ,,,,,,, ,,,,,:,,,锣一,,,,佗,,,, ,,,,,, ,,,, ,,,, ,,,,,,, ,,,, ,,, ,,,,,啪,,,,,(,,,,,, ,,,, ,珈,,,,,, ,,,,,,,,,,,,,,,,,,, ,,,,,，,,,,,, ,,,, ,,,,,,,, ,,,,,,,,,,,,,,,,,,,，,,,,, ,,,,,，,、,,,,, ,,,, ,,,,,,,,, ,,,,, ,,,,,,， ,,旧,,, ,,,, ,,,,,,,, ,,,,,,，,,,,, ,,,,,，,,,, ,,,, ,,(,,,,, ,,,,, ,,,,,，，,,,, ,,,, ,,,,,,, ,,,,,,,，,,,,, ,,,,,(,,,,,,,,,,,,,,,,,,,，,,,,, ,,,,,，,,,,，，,,， ,,,,, ,,,,, ,,, ,,,,,，,,,,, ,,,,, ,,,, ,,,,,,,,,,,,, ,,;,,,,,,,(,,,,,) ,, ,,,,,,,,,,,; ,,,,,,,,,,,,,, ,, ,,, ,,,,,, ,, ,?,,,,(酣,, ,,, ,,,,, ,,,, ,,,,,, ,,,,,,,,, ,,,眈,,,,,酣,, ,,,, ,,,,,,,,,(,,;, ,,,,, ,,, ,,,,,,, ,,,,,;,,,,,, ,,,,,, ,, ,,, ,,,,,,,,, ,,,,,,, ,, ,,, ,,, ,,,, ,,;,,, ,,,,,,,,,,,,,,,,,,, ,, ,,,,,; ,,,,, ,,,,,, ,,,,,,(,,, ,,,, ,,, ,,,,,,,,,, ,,,, ,,, ,,,,,, ,,;;,, ,,,,,, ,, ,,, ,,,,,,,,,,,,,,,,,,,, ,,,,,, ,,, ,,,,,啪,,,,,,,,,,,，,,,,, ,,,,,;,,, ,,;;,, ,,;,,,舰吼, ,,,,,,,,, ,,,, ,,, ,,,,,, ,,,,, ,,, 臼,啪,，,,,,, ,(,,，,,, ,, ,,,,,,;,,;;,, ,,;,,, ,, ,,吼,, ,,,,,锄, ,,,,,,，,,,,, ,,,,, ,,, ,,, ,,;,,,,,硼, ,,,,,,(,,,, ,,,, ,,,, ,,,,,,，,,,,,,,,,,,,, ,,,,印，,(,,, ,,, 行,, ,,,,,,,,,,,,,,,,,,,，,,,,, ,,,,,，,,,, ,,,, ,硒, ,,,啪,黟,,,， ,,,, 豫,, ,,,仃,,,,，,,,,, ,,,,,，,,,,, ,,,仔,, ,,舯,, ,,,, ,,, ,,,,, ,,,, ,(,,, ,,,,,，,,,,, ,,,,, ,,,, ,,;,,,,;,, ,, ,,, ,,,，, ,,,， ,,,，,,,, ,,,?,,,;,,,,,,， ,,, ,,, ,,,;,, ,,,,,,, ,,, ,,订,,,,,, ,,,,, ,,,, ,,,,,,,,, ,,, ,,,,,,, ,,,,,,,,,,,,( ,( ，,,,,,,,,,,;,,,,;,, ,,,,, (，,,) ,,, ,,,,,咖,, ,, ,戗,;, ,,, ;,吼, —,，—中山大学硕十学位论文 口腔黏膜异种异体移植免疫反应巨噬细胞浸润及他克莫司干预作用的实验研究 ,,;,,,,,,, ,,,,,,,,,,, ,,,,,, ,,,,, ,,;,,,,,,, ,,,, ,,,, ,,, ,,, ;,,,,,仃,(,,,),,,,,,,, ,,, ？,,,,,,,,, ,,,，,,,, ,,, ,,,;,,, ,, ,,,,,,,,,, ,，,,, ,,,,，,,,,,,,,,,, ;,，,, ,, ,,;, ,,,, ,,,,,(,,,,，,,,( ，,, ,,,,,,, ,,,,,, ,,,, ,,, ;,,,,, ,, ,,,,,,,,,,,, ,,;,,,,,,, ,, ,,,,,,,,,,,,,,,,,,, ,,,,,、,,肿,,,,,,,, ,,,,,,,，,,,,, ,,,,、仃,,,, ,,,,, ,,, ,,岫,，,,,,, ,,,,, ,,, ,;,,,,,, ,,,,,;,,,, ,,,, ,,,,, ,, ,, ,,, ,,,, ,,,,,,,,玛 ,,, ,,,,,瑚皿,,,,,,,,,,, ,,,,, ,,, ,,, ,,)(,,,, ,,,,, ,, ,,,(,,,,,, ,,,,, ,,, ,,, ,,,,,,，,,, ,,,,,,,,,,,,,,,,,，,,,,, ,,,,, ,, ,,,(,,,,,, ,,？,,,,,,,,,’ ,,, ,,,,, ,,,,, ,, ,,,(,,,,,, ,,,,,,(,,,,,,,;,,, ,,,绝,,,;, ,, ,,, ,,,,,,,,,,,, ,,;,,,,,,, ;,,,,, ,,,, ,,,,,, ,,,,,,, ,,, ,,,,,,,,,,,,,,,,,,, ,,,,, ,,, ,,,,, ,,,,,，,,,,,,,,,,,,,,,,,,, ,,,,, ,,, ,,,,, ,,,,,，,,,,,,,,,,,,,,,,,,,， ,,,,, ,,,,, ,, ,,啪,,，,,,,, ,,,,, ,, ,,, ,, ,,,,撕,, ,, ,,,,,,,,(,,,(,,)( ,, ,,, , ,,，， ,,,行,, ,,,,,,,,, ,,, ,,,,,,,,,,,,,,,,,,,，,,,,, ,,,,, ,,, ,,, ,,,,,,, ,,,,, ,, ,,,(,,,,,,，,,, ,,,,,,,,,,,,,,,,,,,, ,,,,,, ;, , ,,,(,,,,,,，,,,,,,, ,,, ,,,,, ,,,,,, , ,,,,，,,,,, ,,,,, ,, ,,,(,,,,,,(,,,,,,,;,,, ,,毹,,,,;, ,, ,,, ,,,,,,,,,,,, ,,;,,,,,,, ;,,,,,、,,,, ,,,,,, ,,,,,,, ,,, ,,,,,,,,,,,,,,,,,,,, ,,,,,, ,,, ,,,,,, ,,,,,,， ,,,,,,,,,,,,,,,,,,, ,,,,,锄, ,,舶,, ,,,,,，,,,,,,,,,,,,,,,,,,，,,,,, ,,,,, ,,, ,,衄,,，,,,,, ,,,,, ,, ,,, ,,, ,,,, ,舭, ,,,,,,,,,(,,,(,,)(,, ,,, ,,,, ,,, ,,,, ,,,,,,,, ,,, ,,,,,啪,,,,,,,,,,,, ,,,印,,, ,,, ,,,,,,, ,,,,, ,, , ,,(,,,,,,， ,,, ,,,，，,, ,,,,, ,, , ,,(,,,,,, ,,;,,,,,，,,,咖,,，,,,,, ,,,,, ,, ,,(,,,,,, ,,,,,,,( ,,鲥,,;,,, ,,,,,,,,,;, ,, ,,, ,,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,, ;,,,,, ,,,, ,,,,,, ,,,,,,, ,,, ,,,,,彻,,,,,,,,,,,, ,,,,叩,,, ,,,,, ,,,,,,，,,,,, ,,,,, ,,, ,,,,,,, ,,,,, ,, ,,, ,,, ,,,, ,,,, ,,,,,,,,,(,,,(,,)(,,;,,, ,,,, ,,, ,,,,,,, ,,,,, ,,,,, ,,,,,, ,,,,,印,,,,,, ,, ,,, , ,也,,, ,,,, ,,,,,,,,,，,,, ;,,,, ,, ,,,, ,,,,,,,, ,,;,,,,,,, ,, ,,, ,,,,舰,,,,,,,,,,,,, ,,,,,，,,,,,,,,,,,,,,,,,,，,,,,, ,,,, ,, ,,,, ,,,(眦,,，,,,,,掣。,,, ,,,,,,,,, ,,;,;,,,, ,,,,,,;,硒,,,,—,印,,(,,,,, —,，，—中山大学硕上学位论文 口腔黏膜异种异体移植免疫反应巨噬细胞浸润及他克莫司于预作用的实验研究 原创性声明 本人郑重声明:所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其它个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的已经作出重要贡献的个人或集体，均已在文中以明确方式表明。本声明的法律责任由本人承担。 关于学位论文使用授权的声明 本人同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的印刷件和电子版，允许论文被查阅和借阅;本人授权中山大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其它复制手段保存论文和汇编本学位论文。学位论文作者签名: 导师签名: 日期: ,日日期: ?,年,月了 日 ,年 占月中山大学硕上学位论文 口腔黏膜异种异体移植免疫反应巨噬细胞浸润及他克莫司干预作用的实验研究 口腔黏膜异种异体移植免疫反应巨噬细胞浸润 及他克莫司干预作用的实验研究 专业:口腔临床医学 硕士生:左雯鑫 导师:程斌主任医师 引 言,、单核,巨噬细胞系统(,,,伽,;,,,, ,,,,,;,,, ,,,,,,，,,,)功能概述 一百多年前诺贝尔奖获得者,,,;,,,,,,,首次描述了“吞噬现象(,,,,,;,,,,,,)”，并提出免疫应答的关键在于巨噬细胞的激活?。单核,巨噬细胞参与免疫应答的全过程，在非特异性免疫中主要通过吞噬作用杀灭和清除病原体及异物，并介导炎症反应;在特异性免疫中主要发挥免疫调节及抗原提呈功能。它们作为先天免疫的执行者在产生特异性细胞免疫和体液免疫之前就发挥了防御作用。,,,,,, ,,总结了单核,巨噬细胞的三种功能:宿主防御、损伤修复和免疫调节,,。单核,巨噬细胞是由骨髓造血干细胞发育分化而来，在骨髓中经历多能干细胞(,,,,,,,,,,, ,,,, ;,,,)一定向干细胞(,,,,,,,,, ,,,, ;,,,)(髓样干细胞,,,,,,, ,,,, ;,,,)一单核母细胞(,,,,,,,,,)一前单核细胞(,,,，,,,,;”,)一单核细胞(,,,,;”,)的发育过程，骨髓中的单核细胞成熟后进入外周血，血中的单核细胞穿过血管内皮细胞间隙进入组织则进一步发育分化为巨噬细胞乜’,,。巨噬细胞在全身分布极为广泛，几乎存在于全身所有表皮、黏膜下组织和各个器官中，包括肾、肝、肺、心脏和骨髓口,。正是巨噬细胞的这种组织分布特性，决定其在防御感染、自身稳定和免疫监视中都起着重要作用，可抵御细菌、真菌和病毒等病原体的感染以及清除凋亡细胞和突变细胞。单核,巨噬细胞具有迁移性，能以吞噬、吞饮和受体介导的方式将抗原性颗粒或液体摄入胞内，发挥杀伤作用或对抗原进行加工处理，与,,,分子形成复合物表达在细胞表面，诱导获得性免疫应答。在异物、创伤和感染等因素的刺激下单核,巨噬细胞迅速作出反应，这些中山大学硕士学位论文 口腔黏膜异种异体移植免疫反应巨噬细胞浸润及他克莫司干预作用的实验研究,、口腔黏膜移植免疫研究现状 黏膜免疫系统(,,;,,, ,,,,,, ,,,,,,，,，,)是由呼吸道、消化道和泌尿生殖系的黏膜相关淋巴组织组成的免疫系统，又称黏膜相关淋巴组织 (,,;,,,,,,,,;,,,,, ,,,,,,,, ,,,,,,，,,,,)，机体,,,以上的淋巴组织和,,,以上的免疫细胞集中于黏膜免疫系统，构成机体抵抗异物和病原体入侵的第一道免 疫屏障，在口腔黏膜中包括涎腺导管相关淋巴组织、舌扁桃体以及,,,,,,,,环的其它淋巴组织，因此口腔黏膜作为整个黏膜免疫系统的组成部分，在清除和排斥外源分子保护机体免受损伤发挥着重要作用口?。由于各种原因造成口腔黏膜缺损和功能不全，最理想的方法是采用白体皮肤或黏膜进行移植修复，尽管皮肤与黏膜有类似的结构，而且皮肤移植后虽能发生适应性黏膜化外观，但并不能出现黏膜化生改变，与正常黏膜相比在功能、色泽和质地上仍存在差异,,,。自体黏膜虽然最适合于口腔自然环境，但供区来源受限。现阶段使用组织工程方法修复和重建口腔黏膜乃至口腔颌面部组织的形态和功能虽然在临床上得到了快速推广嘞川崩,，但由于口腔黏膜移植免疫的基础研究尚未能与之并驾齐驱，临床上适应证难以准确把握以及对移植后出现的问题还不能完善解决，使得该方法远期疗效不容乐观。本实验采用本课题组先期建立的大鼠口腔黏ひ熘忠焯逡浦材,停 缘ズ耍 奘上赴 腥氲悖 芯靠谇火つぴ谝浦参镉盏枷碌拿庖卟?砉 蹋 剿骺谇火つひ浦裁庖吲懦夥从Φ姆?』 坪头乐伟械闾峁?笛楹屠砺垡谰荨,怠? 四 镜拿庖咭种苹 ?他克莫司(,’,;,,,,,,,，,,,,,)是,,,,年从,,,,,,,,,,,,链霉菌发酵液中提取出的大环内酯类化合物，,,,,年他克莫司首次应用于临床的报道标志着器官移植中新的免疫抑制剂的诞生，有力推动了器官移植的发展嘲,。,,,,年我国获准进口，目前已有部分器官移植患者在应用他克莫司。作为钙调素抑制剂(,,,;,,,,,, ,,,,,,,,,)的他克莫司其主要效应细胞是,细胞，它通过抑制炎性因子基因的转录而干扰,细胞的活化?,,。具体途径如下所述，他克莫司与胞浆中免疫菲林(，,,,,,,,,,,,,)形成,,,,,结合蛋白(,,,,,)，该化合物可抑制钙调素的活性，后者为丝氨酸(苏氨酸磷酸酶，在,细胞活化后，该酶可调节，,一,启动子的诱导作用，而钙调素的抑制可阻碍钙依赖性信号的传导，同时因促进细胞因 一,一中山大学硕士学位论文 口腔黏膜异种异体移植免疫反应巨噬细胞浸润及他克莫司于预作用的实验研究子基因活化的转录因子(如,,—,,等)丝氨酸(苏氨酸磷酸酶的直接或间接底物，故也将被灭活汹,。他克莫司可抑制,细胞的活化作用及,,细胞依赖型,细胞的增生作用，也能抑制，,(,、，,(,及，,,吖等的生成与，,,彩芴宓谋泶铩, 四 咎逋庖种屏馨拖赴 钚缘淖饔们坑诨锋呔 兀保啊 欤希媳叮 ?弑傅退劳雎省?咭浦泊婊盥省?团懦夥从Ψ? 实扔诺悖 俅仓な担 疲耍担埃恫唤隹勺魑 ?庖咭种萍劣糜诩毙耘懦夥从Φ姆乐危 宜 阅图に匦团懦夥从Α?阎涡团懦夥从σ灿幸欢 菩А,冢停铮欤欤澹觯?,, ,, ,,建立的仓鼠(大鼠心脏和肝脏异种移植模型中，通过经大鼠后足肌肉注射剂量为,(,,,,,,,,,,的,,,,, , ,天后，心脏和肝脏移植体的存活天数分别为,,?,天和,,?,天，而在中止给予,,,,, ,,?,天和,,?,天后，心脏和肝脏移植体各自分别出现了排斥反应哪】。,,,,, ,, ,, ,,在对,,,大鼠。,,大鼠异种肾移植模型的研究中发现，,,,,,较之环孢菌素不仅能预防排斥反应，还能对正在进行中的排斥反应起到抑制作用，而在移植后,天给予环孢菌素其排斥反应的发生率较之对照组已无显著差异?,。他克莫司较常规免疫剂的诸多优点使之在器官移植中具备了良好的应用前景，但对其应用研究也多集中于同种实质器官移植及获得性免疫抑制方面。他克莫司对于同种系移植排斥反应的抑制作用已比较明确，而异种移植是其免疫抑制作用应用的新领域， 因此我们使用异种异体移植的动物模型并针对臣噬细胞来设计本实验，试图拓展对他克莫司药理作用机制和应用的研究。 一,一中山大学硕士学位论文 口腔黏膜异种异体移植免疫反应臣噬细胞浸润及他克莫司干预作用的实验研究 ,、材料与方法 制配及剂试要主,(, ,(,(,主要试剂 (,)造模药物 ,，,,,,，,,,,,,,,,,，囊胶复可乐普:名品商(司莫克他 )粒,,,,(进口注册证号:,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,字准药国:号文准批装分品药 ,,,,,、,,,。,,,,、,,,,,,,:号批品产 ,,爱尔兰安斯泰来有限公司生产 (,)免疫组织化学染色(，,,)试剂 小鼠抗大鼠,,,,单克隆抗体 美国,嘲,,,,公司 抗体稀释液 福州迈新生物技术开发公司 链霉素抗生物素蛋白一过氧化物酶福州迈新生物技术开发公司 免疫组化染色超敏试剂盒 盒剂试色显, 福州迈新生物技术开发公司 磷酸盐缓冲液(,,,，,,,(,,,(,) ,, 柠檬酸组织抗原修复液 福州迈新生物技术开发公司 二甲苯、乙醇、盐酸、氢氧化.