叶绿素提取

南京林业大学实验报告 专业 生态学 班级 1201051 学号120105110 姓名 贾艳芳 日期 实验四、叶绿体色素的提取、分离及化学性质鉴定 1、 实验目的 植物叶绿体色素的含量和光合作用有关，在品种鉴定方面也有一定意义。本实验在于练习叶绿素的提取和分离两方面，并了解叶绿体色素的一些重要化学性质。 （1） 提取和分离 二、实验原理 1、 叶绿体中含有叶绿素和黄色素两大类。他们与泪囊体膜结合成为色素蛋白复合体。 2、 两类色素不溶于水，易溶于有机溶剂，可用醇、丙酮等提取，提取液可用色素的原理加以分离。 3、 吸附剂对不同物质吸附力不同，当用适当溶剂推动时，混合物中各种成分在两相间有不同的分配系数，所以移动速度不同，经过一定时间后，可将各种色素分开。 4、 色层分离法快速、简便，可大致了解植物品种的叶片中所含叶绿素的情况。 2、 材料与设备 植物材料：植物叶片 试验器具：研钵1个 漏斗一个 试管2支 滴管2支 培养皿（直径9cm） 滤纸 试剂：95%乙醇 石油醚 3、 操作步骤 1、 叶绿体色素的提取 （1） 取新鲜植物叶片1g洗净、去中脉、剪碎研磨 （2） 研钵中加2-3ml95%乙醇研磨成浆，再加如乙醇过滤于刻度试管中，冲洗残渣，一并过滤，定容至10ml。 2、 叶绿素的荧光现象 将上述色素乙醇提取液放在太阳光下观察，注意反射光和透射光，观察提取液的颜色有无不同，反射光观察的颜色即为叶绿体色素的荧光颜色。 3、 叶绿体色素的萃取 将尚属乙醇提取液5ml放入另一试管中，加2ml-4ml石油醚，用力摇动，上层深绿色溶液为叶绿体色素的石油醚提取液。 4、 叶绿体色素的分离 （1） 取一条长4cm、宽2cm的滤纸条卷成灯芯，将灯芯的一端插入预先在圆滤纸中心已钻好的小孔中，灯缘和灯芯贴紧，滤纸上面只能露出少许，最好相平，用长滴管吸取叶绿体色素石油醚提取液少许，慢慢滴在灯芯的一端，待风干后进行色层分离。 （2） 将一盛有石油醚的小碟放在培养皿中，把插有灯心的滤纸放在培养皿上，使灯芯下端浸入石油醚中，迅速盖好培养皿 （3） 推动剂前沿接近滤纸边缘时，取出滤纸，风干，可看到4条色素带。标出各色素位置和名称。 4、 实验结果 理论结果 （二）氢和铜对叶绿素分子中镁的取代作用 一、实验原理： 叶绿素中的镁可被氢取代成为去镁叶绿素，然后再加入铜作用就变成绿色铜带叶绿素。浸制标本可用这个原理。 二、材料与设备 植物材料：叶绿素提取液 试验器具：试管2支 水浴锅 试剂：醋酸铜粉末 1NHCL 操作步骤：， 操作 现象 图片 原因 取4ml叶绿素提取液放入试管中，加几滴1NHCI，小心摇动。 提取液由绿变褐 因盐酸已将叶绿素分子破坏，移去其中的镁，以氢代之，形成去镁叶绿素。 用玻璃棒蘸取少量硫酸铜放入试管，慢慢加热。 又有绿色产生 示叶绿素分子中镁的位置已经被铜取代。