犬传染性气管支气管炎的流行病学调查与防治研究_刘占斌

犬传染性气管支气管炎的流行病学 调查与防治研究 刘占斌 , 戴宗浩, 周清俊, �� � 公安南昌警犬基地 �� � 中国刑警学院警犬技术系� 犬传染性气管支气管炎��� �� �� ��� � �� �� ! ��� �� �� �� � � , 又称犬窝咳 ,是指除犬瘟热以外的 以咳嗽为特征、具有传染性的犬的呼吸系统疾病的统称。 国内外对该病的报道比较多 , 一般都认为该病是由支气管败血波氏杆菌和多种病毒引 起的多病原疾病 ,但也有学者认为该病是由单一的支气管败血波氏杆菌引起【� , � 〕。 由于 犬的呼吸系统疾病繁多 , 且地区之间犬的呼吸系统疾病病原也可能不一样 ,所以我们希望 能从病原分离研究和临床症状等方面对该病进行研究分析 , 总结出该病的流行规律和防治 效果 , 为南昌地区该病的防治提供理论和技术方面的支持 。 � 、材料与方法 � � � 材料 � � � � � � 主要仪器设备 �无菌操作台、恒温培养箱 、高压灭菌锅 、 电冰箱 、显傲镜 、电炉丝 、游标卡尺 、电子称、接种针、接种棒、培养皿 、锥形瓶 、酒精灯 、 �� 试纸 。 � � � � � 主要试剂 �麦康凯培养基 、牛肉浸膏、胰蛋白陈、 �� ���� , � ��� , 琼脂条、革兰氏染色液 、� � �� � � �盐酸 、抗菌药物药敏纸片。 � � � 方法 � � � � �发病时间和发病数量调查 。 收集 ��� � 年 一 �以�� 年间南昌警犬基地犬传染性气 管支气管炎每个月的发病数量 , 制作成发病数量与月份的变化曲线。 同时 � � � � � 发病犬的基本情况调查 。 收集 ��� � 年 一 ��� � 年间南昌警犬基地犬传染性气管 支气管炎的所有病犬的年龄 、性别 、品种和临床症状。 年龄精确到月 , 并根据月龄划分为吃 乳犬�� 月龄以下� 、幼年犬�� 月 一 � 月 � 、青年犬�� 月 一 �� 月 �和成年犬 ��� 月龄以上�。 品种以罗威纳和德国牧羊犬为主。 临床症状主要包括发烧、咳嗽、流鼻涕、食欲不振等。 �� � � � 药物和疫苗防治效果调查 。 统计分析每年进行防治的方法 , 包括疫苗预防和药 物预防 , 同时进行发病数量和死亡数量统计 , 分析防治效果 。 � � � � � 用康复犬血清治疗发病的吃乳犬 。 用普通采血管采集不久前刚康复犬的血 , �以洲��� 而 � 分离血清。 血清治疗量以每头犬每天 �耐 ,皮下注射 , 连用 � 一 � 天 。 � � � � � 细菌分离及生化鉴定。 用新洁尔灭对病犬的鼻部进行清洗消毒 , 然后将灭菌的 棉拭子插人病犬的鼻腔深部 , 轻轻旋转 , 直接接种到麦康凯培养基上 。 死亡犬立即无菌采 �� � 集气管或肺部病变组织 。 取可疑的典型菌落在普通培养基上进行纯培养 , 并进行革兰氏染 色、生化试验和细菌药物敏感性试验 。 � � � � � 动物复归试验。 将细菌培养物的稀释溶液 � � ��� 滴人 � 头 � 月龄未发过病的犬鼻孔内 , 用生理盐水 � � ��� 滴人另外 � 头 � 月龄未发过病的犬鼻 孔做为对照组 。 � 、结果 � � � 暴发流行情况 。 ��� � 一 � �� � 年每年每月发病数量统计结果见表 � 。 同时为了研究 气温变化对该病发病的影响 , 我们同时调查 了 ��� � 一 � �� � 年每年每月的气温资料�见表 � � 。 表 � ��� � 一 � �� � 年度每月发病数目�头 � 默默默 ��� ��� ��� ��� ��� ��� ��� !!! ���� � !!! 共计计 ��� � � ��� ��� ��� ��� ��� � ��� !!! ∀∀∀ � ��� ���� � ��� � ��� ��� �� ��� ���� � ��� ��� ��� ��� � ��� ��� � ��� ��� ��� ��� ��� � ��� ��� � ���� ��� � � ��� ��� ��� ��� ��� ��� ��� ��� ��� ��� ��� ��� ��� � ��� � ���� ��� ��� ��� ��� ��� ��� ��� ��� ��� � ��� ��� � � ��� ��� ��� ��� ��� ���� � ��� ��� ��� ��� ��� ���� ��� � ���� 表 � ��� � 一 ��� � 年度每月平均气温�℃ � 淤淤淤 ��� ��� ��� ��� ��� ��� ��� ��� ��� ��� � ��� � ���� � ��� � � ��� � � ��� �� � ��� �� � ��� � � � ��� �� � ��� � � � ��� � � ��� � � � ��� �� � ��� �� � ��� � � ��� ���� � ��� � � ��� �� � ��� �� � ��� � � ��� � � � ��� �� � ��� � � � ��� �� � ��� � � � ��� � � � ��� � � � ��� � � ��� ��� � � ! � ��� � � ��� � � ��� � � � ��� � � � ��� �� � ��� � � � ��� �� � ��� � � � ��� �� � ��� � � � ��� � � ��� ���� � � � ��� � � ��� �� � ��� �� � ��� � � � ��� �� � ��� � � � ��� � � � ��� � � ��� �� � ��� �� � ��� � � ��� ���� � ��� � � ��� � � � ��� �� � ��� �� � ��� � �。 ��� � � � ��� � � � ��� �� � ��� � � � ��� � � � ��� �� 。 ��� , � ��� � � � 病犬的基本情况调查 。 根据统计结果 , ��� � 年 一 ��� � 年间共有 �� � 头犬发病 , 占 �� 月龄以下犬总数 �� �� 的�� � � � 。 其中� 月龄以下犬发病 �� 头�占� � �� � , � · � 月龄犬 发病 ��� 头�占 �� � � � � , � 一 �� 月龄犬发病 � �� �占�� � � � � , �� 月龄以上的犬未见发病�见 表 � �。 表 � 不同月龄犬发病情况统计 类类别别 � 月龄以下下 � 一 6 月龄龄 6 一 1 8 月龄龄 18 月龄以上上 发发病数 (头))) 3 111 12888 31999 000 百百分比比 6.5%%% 26.8%%% 66 .7%%% 0%%% 在统计调查的年限里 , 共有213 头罗威纳犬发病 , 占18 月龄以下该品种总数64 2的 33 . 223 共有 265 头德国牧羊犬发病 , 占 18 月龄以下该品种总数790 的33 .5% (见表4) 。 表4 不同品种犬发病情况统计 品品种种 罗威纳纳 德国牧羊犬犬 发发病数量量 2 1333 26555 1118 月龄以下该品种犬总数数 64 222 79000 百百分比比 33.2%%% 33.5%%% 在所有的临床症状中 , 有咳嗽症状的犬占100 % , 有流鼻涕症状的犬占90 .2% , 有食欲 不振症状的犬占86 .8% , 有发烧症状的犬占70 .0% , 有感觉过敏 、抽搐 、四肢划水 、共济失调 等神经症状的犬占2.3% , 死亡率为 3.6% (见表5 ) 。 其中 , 出现神经症状的犬都是 2 月龄 以下的病犬 。 表5 主要临床症状调查表 临临床症状状 发烧烧 咳嗽嗽 流鼻涕涕 食欲不振振 神经症状状 死亡数数 发发病数量(头))) 32555 47888 43 111 4 1555 llll 1777 百百分比比 70 .0%%% 100 %%% 90 .2 %%% 86 .8 %%% 2 .3 %%% 3 .6%%% 2 .3 药物和疫苗防治效果 。 2 (X) 3 年和 2《X抖 年主要通过口服四环素进行预防 , 2 的5 年 、 2 (X) 6 年和 2(X) 7 年主要通过口服复方新诺明进行预防。 在2《X拓年暴发流行时期 ,用 “ 窝咳” 疫苗(犬支气管败血波氏杆菌和犬副流感的弱毒苗)对 50 头易感犬进行了紧急预防 , 共有6 头犬发病 , 占实验犬总数的 12 % ,低于同期群体发病率的 20 .7% 。 在 200 7 年 , 对于一些严 重的犬同时进行卡那霉素肌肉注射进行治疗 , 死亡数目包括 11 头2 月龄以下的病死犬 (见 表6 ) 。 表6 2(X) 3 一 2 00 7 年药物防治情况调查 \\\\\ 防治药物物 18 月龄以下下 发病数数 死亡数数 犬犬犬犬总数数 (发病率))) (死亡率))) 22200 3 年年 四环素7天天 24 666 153 (62.2% ))) 2 (3.8% ))) 22200 4 年年 四环素7天天 25888 110 (42.6% ))) l(0.9% ))) 22200 5 年年 磺胺类7 天天 27111 2 1(7 .7 % ))) 0 (0 % ))) 222《X)6 年年 磺胺类 7 天天 29999 62 (20.7% ))) 0 (0% ))) 222(X) 7 年年 磺胺类7天天 35888 132 (36.9% ))) 14 (10 .6% ))) 2.4 康复犬血清治疗效果情况统计。 在 2(X) 7 年间 , 有多窝吃乳期幼犬发病 , 经抗生素 治疗效果后效果不明显 ,病情反而变地严重 , 整窝犬在后期出现神经症状 , 死亡数目增加 。 采用康复犬血清联合治疗后效果非常明显 。 对出现抽搐 、运动失调的幼犬注射血清 12 小时 后 ,病犬的神经症状就消失 , 同时能够主动吃乳 , 死亡趋势明显得到抑制。 治疗效果见表7 。 其中A I、 A2 表示经产母犬 , Bl 、 B2 、 B3 、 B4 表示首次怀孕并在怀孕前或怀孕期间感染了犬 传染性气管支气管炎的青年犬。 22 4 表7 用康复犬血清治疗吃乳期幼病犬情况统计。 母母犬犬 A 111 A222 B 111 B222 B333 B444 总总数数 777 l000 777 777 444 333 发发病数数 000 l000 777 777 444 222 用用抗生素治疗死亡数000 000 333 222 222 22222 联联合血清治疗后死亡数数 000 000 000 000 000 000 康康复后突然死亡数数 000 000 000 lll 000 lll 2.5 细菌学鉴定 。 从鼻腔 、气管、肺等处分离的细菌在麦康凯培养基上形成微红色菌 落 , 取典型菌落进行革兰氏染色 , 结果为革兰氏阴性 、两端染色的细小杆菌(见图5)。 不分 解碳水化合物 , 甲基红 、 V P 和叫噪实验阴性 。 有鞭毛 , 在半固体培养基穿刺试验内呈毛刷状 生长(见图 6) 。 我们对分离菌的药物敏感性实验表明:该菌对卡那霉素 、丁胺卡那霉素高度 敏感 , 对复方新诺明 、 四环素、恩诺沙星 、硫酸庆大霉素中度敏感 , 对头抱唾肪钠 、青霉素不 敏感 。 3 . 6 动物复归试验 。 用分离细菌感染的 5 头犬在 24 小时后出现干咳症状 , 对照组未见 异常。 3 、分析与讨论 3.1暴发流行规律分析。 根据表 1 发病数量和图 l 发病曲线可以看出 , 在 2(X) 3 年、 2 0( 抖 年、 2 以)6 年和 2(X) 7 年内 ,该病平均每年暴发两次 。 第一次暴发流行的时间从4 月底或 5 月初开始 , 在 5 月份或6 月份达到高峰;第二次暴发流行的时间从 ro 月底开始 , 在 n 月 份达到高峰。 但是在 200 5 年发病的时间比较早 , 数量也比较小 。 在 2(X巧 年发病时间早 , 但 仍然有明显的两个发病流行过程 。 不难看出 , 每次发病的时间主要从春夏交替时节和秋冬 交替时节开始发病 , 在夏天 6 月份和冬天 11 月份分别达到发病的高峰。 但仍然有可能提前 l 一 2 个月左右时间发病 , 在3 月份或4月份达到高峰。 根据表 2 和图 2 的气温变化曲线图 , 我们可以看出气温在 3 月份与4 月份 、9 月份与 10 月份之间变化曲线比较陡峭 , 既气温变化比较突然 。 尤其是在 2阅5 年和 2《X巧 年的2 月份 和 3 月份之间温度变化幅度比2(X) 3 年 、2 (X 抖 年和 200 7 年同期气温变化大很多 , 这与 2(X) 5 年和 20(拓 年该病暴发时间提前相对应。 说明气温突然变化对该病的发生有一定的促进作 用。 根据表3 可以看出 , 该病主要发生在青年犬 , 其次是 2 一 6 月份的幼犬 , 吃乳犬发病数t 比较少 , 而 18 月龄以上的犬未见发病。 这可能与发病犬的体温和抗病力有粉一定的关系。 支气管波氏杆菌的最适生长温度为35 一 37 ℃ , 而 2 月龄以下幼犬的体温在38 .7 一 39 . 5 ℃之 间 , 6 月龄以上的犬体温在37 .5 一 38 . 5 ℃之间 , 可以看出 6 月龄以上幼犬呼吸道的沮度比较 适合支气管败血波氏杆菌的生长 , 一旦各种因素导致幼犬抵抗力下降 , 就会引起该病的流 行。 18 月龄以上的犬基本都曾经感染过该病 , 有一定的抵抗力 , 所以基本不会再次发病。 在所统计的 2 月龄以下吃乳犬的死亡数目中 ,所有死亡的犬都是 200 7 年6 月份暴发流 225 行期间的死亡数 , 而以前还未见过 2 月龄以下吃乳犬发生该病 。 值得注意的是 , 2 (X) 7 年之 所以会有2月龄以下犬发病 , 这与母犬怀孕年龄太年轻和隔离措施不到位有着重要的关系。 在2(X) 7 年之前 , 母种犬都是在第二次发情后准予怀孕 , 且母种犬与年轻的易感该病的犬是 分区饲养的。 而 2(X) 7 年发病幼犬的母犬基本都是在第一次发情就准予怀孕 , 这些年轻的母 ‘ 犬在怀孕之前、怀孕期间感染过该疾病或与其它年轻病犬饲养的距离过于接近。 在表 3 中 可以看出 , 经产母犬的幼犬抗该病的能力比初产母犬的幼犬要强 , 要么不发病 , 要么发病后 死亡率比较低。 而初产母犬的幼犬全部发病 , 且死亡率比较高。 这说明2 月龄以下的犬也 很容易感染 , 康复犬有明显的带菌现象。 但是如果隔离措施比较好 , 完全可以延缓该病在 2 月龄以下犬中发生 。 根据表4可以看出 , 该病在罗威纳犬和德国牧羊犬中的发病率基本相同。 根据资料显 示 ,该病也可以在史宾格犬 、拉布拉多犬等其它品种间暴发流行 , 所以该病的暴发流行没有 品种特异性 。 3 . 2 病原分析 。 根据细菌分离鉴定和易感犬复归试验 , 表明支气管败血波氏杆菌参与 犬传染性气管支气管炎的发病 , 而且可以单独引起犬的咳嗽症状 。 由于条件限制 , 我们未 能做病毒培养试验 ,所以不能确定病毒是否参与该病的发生 。 但根据 2月龄以下病犬具有 的神经症状分析 , 引起犬气管支气管炎的病原不只是支气管败血波氏杆菌 , 因为还未见过 支气管败血波氏杆菌可以引起神经症状的报道 。 根据资料显示 , 在犬的呼吸道病毒中可以 引起犬神经症状的病毒主要有犬瘟热病毒(可以排除) 、犬副流感和犬呼肠孤病毒 , 所以犬 传染性气管支气管炎很有可能是有支气管败血波氏杆菌和副流感等病毒引起。 3 . 3 临床症状分析。 根据临床症状可以看出 , 犬传染性气管支气管炎的主要临床症状 是咳嗽、流鼻涕 、发烧和食欲不振。 死亡率比较低。 如果发生在2 月龄以下幼犬 , 则有些病 例会出现神经症状 , 死亡率升高。 2 月龄以下幼犬出现的神经症状和突然死亡现象可能与 它们的血脑屏障尚未发育完善和其它病毒感染有关。 3 . 4 防治效果分析。 根据细菌药物敏感性实验 , 四环素和磺胺类药物属于中度敏感的 药物。 在用四环素防治的 2(X) 3 年和2(X抖 年里 , 该病的发病率比较高 , 几乎一半的犬都会感 染。 在2(X) 5 年和 20( 巧 年里用复方新诺明进行预防 , 发病率明显下降 , 死亡率也相应降低 。 说明磺胺类药物的作用要比四环素效果好。 在用“窝咳”疫苗免疫的 50 头犬中 , 发病率比 同一时期整个犬群的发病率明显降低 ,说明该疫苗具有一定的保护作用 。 如果考虑到这 50 头犬中可能存在处于潜伏期的病犬 , 那么该疫苗的保护率应该还更高一些 。 2 (X) 7 年死亡率 明显增加主要是遇上了2 月龄以下犬的暴发流行 , 由于病犬年龄太小 , 死亡率明显增加。 如 果不考虑2 月龄以下的病犬 ,则死亡率为2.5% (3/121) , 比 2加5年和 2(X 巧年有所增加 , 但 仍然维持在一个较低的数目。 此外 , 由于该病传播迅速 , 而使用药物预防的时间有滞后性 , 使用药物预防的时间也比较短 , 所以用发病率来评估药物的预防效果还必须考虑到人的因 素。 3 . 5 血清治疗效果分析。 在对 2 月龄以下病犬的治疗中 , 早期单纯使用支气管败血波 226 氏杆菌敏感的抗生素进行治疗 , 效果不理想 。 一方面与给药途径有关。 很多药物难以通过 肌肉注射后在呼吸道分泌物中的含量较低 , 影响了药物的疗效。 另一方面 , 2 月龄以下幼犬 抗病能力低下 、免疫程序尚未实施 ,往往导致病情恶化或继发其它呼吸道疾病。 此外 , 康复 犬血清明显的治疗效果 , 说明康复犬体内会产生抗体 , 体液免疫在犬传染性气管支气管炎 的防御中有重要作用 。 同时表明 , 通过皮下 、肌肉注射疫苗等方式可以产生体液抗体 , 从而 提高机体抵抗该病的能力。 4 、结论 4.1病原 。 根据病犬呼吸道分泌物细菌培养 , 我们发现了支气管败血波氏杆菌。 通过 致病性试验 , 发现支气管败血波氏杆菌可以单独引起易感犬出现咳嗽 、流鼻涕等呼吸道感 染症状 。 说明支气管败血波氏杆菌可以引起犬的气管支气管炎症状 , 是犬传染性气管支气 管炎的病原或病原之一 。 根据病犬出现的的神经症状 , 我们认为这不是支气管败血波氏杆 菌所能产生的症状 , 有可能还继发了其它病毒感染。 因此 , 我们认为支气管败血波氏杆菌 是犬传染性气管支气管炎的病原之一 ,但不排除有其它的病毒先于或继发于或同时感染 。 4 . 2 暴发流行规律。 根据调查分析 , 我们发现犬传染性气管支气管炎的暴发和流行有 明显的季节性 。 该病一般每年发生两次 , 一般在春夏交替和秋冬季节交替等气温变化幅度 大的时节发病 , 一般在夏天的 6 月份和冬天的 11 月份达到发病的高峰时间。 该病在品种间 暴发和流行没有品种差异 。 主要感染对象是 6 一 18 月龄的青年犬 , 其次是 2 一 6 月龄的幼年 犬 , 这可能与它们各自的体温接近支气管败血波氏杆菌的最适生长温度和抵抗力低下有 关。 但死亡率比较低。 如果感染 2 月龄以下的犬 , 则死亡率比较高。 4 . 3 治疗。 病犬的治疗主要是采取针对支气管败血波氏杆菌的抗菌治疗 , 同时通过管 理和支持疗法 , 提高机体的抗病 、抗病毒能力。 由于该病持续时间长 , 病菌很容易对药物产 生耐药性 ,所以在临床治疗中要采取敏感的药物进行治疗 。 2 月龄以下的犬由于年龄太小 、 抗病力低下 、容易继发多种病原感染 , 所以单纯使用抗生素治疗效果可能会不理想 , 尤其是 对病毒的感染缺乏有效的治疗 。 而康复犬血清含有抵抗该病多种病原的特异性抗体 , 因此 使用康复犬血清对 2 月龄以下的病犬进行治疗效果比较全面 。 年青犬由于抵抗力比较强 , 一般不需要进行血清治疗。 4 . 4 预防。 根据该病的流行规律和往年防治工作效果调查 , 我们认为该病的有效预防 措施主要包括饲养管理 、疫苗预防和药物预防 。 4 . 4 . 1 减少应激反应 。 控制环境应激对犬产生的影响 , 减少人为饲养管理方面对犬产 生的应激反应 。 环境应激主要是气温和天气的突变 , 这些因素往往导致青幼年犬抵抗能力 下降 , 导致像支气管败血波氏杆菌这一类存在于正常犬呼吸道的细菌发病。 为了防范这些 不良刺激 , 一方面要通过犬舍的合理布局 , 减少天气等环境变化对犬舍局部”气候”的变化 。 尤其在季节更替 、昼夜温差过大的时候 , 一定要注意犬舍的保暖工作。 平时和该病的流行 季节 , 要及时清理犬舍的大小便 , 并要保持犬舍的通风透气。 这样做一方面可以减少蚊虫 的滋生 , 另一方面 , 粪尿产生的氮气等刺激性气体 , 可以损伤犬的呼吸道猫膜 , 给一些条件 227 致病菌的侵人创造条件 , 及时清除犬舍的粪尿和通风透气 一可以保持犬舍空气的清新 , 减少 呼吸道疾病的发生。 在饲养管理方面 , 一要降低犬的饲养密度 , 二要减少犬饲养管理地方 的频繁变动。 拥挤和频繁变更饲养环境 , 都会导致犬应激反应的发生。 4 . 4 . 2 青年犬和仔犬分区隔离饲养。 青幼年犬是犬传染性气管支气管炎的易感动物 , 在该病的流行地区 , 几乎所有的犬都会感染。 但青年犬感染后死亡率不高 , 而幼年犬特别 是未断乳的犬感染后死亡率高。 因此种犬和仔犬要与青年犬分区饲养 , 阻断病原通过空气 等途径传播给幼犬。 4 . 4 . 3 加强免疫。 目前常用犬支气管败血波氏杆菌和犬副流感的弱毒活疫苗给易感犬 进行免疫注射。 幼犬出生两周龄后 , 就可以进行窝咳疫苗的滴鼻免疫 , 或在该病流行季节 将要来临之即 , 可以给所有易感犬进行滴鼻免疫 , 免疫犬在3 天后就可以产生免疫力 。 该疫 苗对孕犬安全 , 也可以通过对母犬的免疫提高母源抗体的水平 , 防治幼犬在很小 日龄就发 病。 同时 , 提高母犬的繁殖年龄对推迟幼犬发病有着重要意义。 4 . 4 . 4 采用敏感抗生素进行群防群。 由于该病常年发生 , 治疗一般在一周以上 , 所以在 很多养犬集中的地方 , 如犬场 , 细菌发生耐药性的机会很高。 因此在对病犬进行治疗或进 行大面积药物预防的时候 , 一定要做药物敏感实验 。 在疾病流行季节 , 完全的隔离比较困 难 , 所以对所有的易感犬进行药物预防是很有必要的。 4 . 4 . 5 加强检验检疫工作。 对于没有该病流行的犬场 , 一定要注意对进人犬场的犬进 行检疫 , 以免造成该病在犬场暴发流行。 同时 , 个人的宠物犬或犬场的犬等要避免到该病 正在流行的区域活动 , 以免感染。 2 2 8