硫酸沙丁胺醇缓释片的制备及其在健康人体内的药动学研究

278 中 国 药 科 大 学 学 报 Journal of China Pharmaceutical University 1997。2S(5)：278～28l 2 一 。 硫酸沙丁胺醇缓释片的制备及其在健康 人体内的药动学研究 ／ 吕万良 屠锡德 蒋曙光 袁倚盛1"4赵飞浪 李 克 — — — — 一 ， — — — 一 (中国药科大学药剂学教研室，南京 219909；-解放军南京军区南京总医院，南京 210002) 摘 要 制备了硫酸抄丁胺醇骨架型缓释片(8 ms／片)，以释放度为指标筛选出了适宜处方， 并对该处方缓释片与市售昔通片对照进行了健康人体单剂量及多剂量随机交叉给药药动学研究。 用高技液相荧光色谱法测定了血浆中的药物浓度。援释片的药动学参数 l曲， ～，肌 及 PTF (波动分数)分别为(4．6士0．8)h．(7．9士1．4)ng／n~．(121．1士12．3)h·ng／蚰 及 0．93士0．26．而普 通片的相应药动学参数则分别为(1．4士0．4)h，(15、l士2．4)ng／n~．(103．3士8．7)h·ng／rnJ及 1．3l 士0．27，经取单傍检验两制剂埘 ． 无显著性差异．而丹甲则有显著性差异．援释片相对于普通片 的生物刺用度为1Oe．O ，缓释片具有给药次数少(一日二次)、给药后血药浓度波动较小的特点． 关键调 硫酸 丁胺醇援释片 药动学 生物利用度I高效液相荧光色谱 缘歪 ．-———⋯ — — ～ 0 ^ 沙丁胺醇是一种选择性 凸2肾上腺素能 受体激动荆 】，主要用于支气管哮喘的治疗， 常用其硫酸盐。该药在临床上广泛使用的剂 型有普通片剂、气雾剂等。普通片需一天给药 3～4次，给药时间不易掌握，且其血药浓度 波动大，不易保持在安全有效的治疗浓度范 围内；而气雾剂吸入时难以精确定量，同时多 次给药易引起肺音 疾病。本课 旨在通过控 制药物在体内的释放速度，使血药浓度平稳， 从而延长疗效、降低副作用，减少给药次数。 l 仪器与试剂 HPLC(1090M，惠 普 )，荧 光 检 测 器 (HP1046，惠普)。硫酸沙丁胺醇普通片(盐城 制药厂，批号 940201，2．4 mS／片)，硫酸沙丁 胺醇缓释片(自制，批号 930829，8mS／片)。 乙腈、甲醇均为色谱纯。 2 缓释片制备 2．1 处方I艺 以释放度为指标，筛选出适宜处方为：硫 收稿 日期 1997—03—30 酸沙丁胺醇 8．0 g，聚丙烯酸树脂 I 15．0 g， 羟丙甲纤维素适量，期精适量，十八醇 30，0 g，硬脂酸镁适量，粘合剂适量，制成 1000片。 将硫酸沙丁醇与糊精，聚丙烯酸树脂 1 与羟丙甲纤维素、硬脂酸镁分别过 40目筛后 混匀，将混匀钧与十八醇按等量递增法混合 均匀，加粘合剂制软材，过 2O目筛制粒，50"C 以下干燥，l8目整粒，加入润滑剂，混匀压 片，即得。 3 释放度测定 取缓释片，照溶出度测定法小杯法(桨 法)，以稀盐酸(9~1000)250 为溶剂，2 h 后以pH 6．8磷酸盐缓冲液 250 为溶剂， 转速 l 00 r／rain，依法操作，于规定时间取样 1 0 m1，过滤，并即时在操作容器内补充相应 溶剂 lOm1。取续滤液在 276『1In波长处测定 吸收度。 另精密称取硫酸抄丁胺醇对照品适量， 加相应溶剂溶解，并定量稀释至每毫升含 32 g硫酸沙丁胺醇的溶液，在 276 nm处测定 维普资讯 http://www.cqvip.com 5期 吕万良等：硫酸抄丁胺醇缓释片的制备及其在健康人体内的药动学研究 279 吸收度。将样品液的吸收度除以相同溶剂对 照品溶液的吸收度，即得释放度。 4 体内试验 4．1 试验设计 选健康受试者 10名，年龄(22．4士2．1) 岁，体重(59．04-4．7)kg。受试者随机平均分 为A、B两组，采用交叉设计进行试验。 单剂量给药试验：每位受试者 po硫酸沙 丁胺醇缓释片 l片(8 mg)或硫酸沙丁胺醇普 通片 3片(7．2 mg)，间隔一周后交叉服药。缓 释 片组于服药后第 0，1．0，2．0，3．0，4．0， 6．0，8．0，10．0，12．0，15．0，24．0，36．0 h，普 通片组于服 药后第 0，1．0，2．0，3．0，4．0， 6．0，8 0，12．0，l5．0，24．0 h取静脉血，分 取血浆玲藏备测。 多剂量给药试验：每位受试者每 12 h Do 硫酸沙丁胺醇缓释片 1片，或每 8 h Do硫酸 沙丁胺醇普通片 2片，缓释片组于第 120 h (服第一剂量时开始计时)服完最后一个剂 量，普通片组于第 128 h服完最后一个剂量， 间隔一周后交叉服药。缓释片组于第 120．0， 121．0． 122．0， 124．0， 126 0， 128．0． 132．0，1 35．0，1 44．0，l56．0 h，普通片组于 第 120．0，120．5，121．0， 122．0， 123．0， l26．0， 128．0， 129．0， 1 30．0， 132．0． 135．0，144．0，156．0 h，取静脉血，分取血浆 冷藏备测。 4．2 血 药浓度测定方法 沙丁胺醇血浆药物浓度用高效液相荧光 色谱法检测， 柱为 4．6Ⅱ1In×250 11311"1 YWG—sjo。，5 m。血浆样品采用固相分离技 术预处理，固相分离小柱以 C．·原料高压填 充，然后用蒸馏水 1．0 ml在真空泵作用下洗 涤，将血浆样品 1．5 ml通过该柱，以蒸馏水 200 LLI洗涤后，再以乙腈 200 I洗涤，抽尽洗 涤液，以甲醇 500 洗涤两次，在真空泵作用 下将吸附在硅烷化 C a固定相上的硫酸沙丁 胺醇洗出，洗涤液在 60℃以下用压缩空气吹 干。残渣以流动相200山溶解，精密吸取 120 山注入HPLC分析柱。 以沙丁胺醇与内标物吗啡峰高比对浓度 进行回归，曲线定量。该法的检测限为 0．8 ng／ml，日内 脚 为 6．2~A～7．7 ，日间 脚 为 8．O~A～9．4 ，见表 1，图 l。 1曲 1 P d罩i0II of e determination Iittmatt 帅 a ． ^ B C Fig 1 Chfoma幻gr曲 皓 of 1 mI pIas a emr^c ^ Btln／c n ． I B Blank plasma gpiked with lO ng 8albutnmol and I {n_ ternal standard{C．P 目 from volunteer 10 h af【时 0f 埘． J|Ijn № tion 0f 8Ⅱ 宰B】butamoi SlIT．Peaks I 1．S h衄 m I 2． 1n~rnli gL d 5 数据分析 药动学参数用PKBP—N1计算机软件进 行处理。7 ，G 是由药物浓度经时曲线用 单室模型进行嵌合得到，消除速度常数 K，是 根据非线性最小二乘法由单剂量给药经时曲 线血药浓度半对数曲线末端相嵌合得到， 删G一一是基于梯形面积法经计算机求出。稳 态血 药浓 度峰 谷 波动 系数 肿 (peak． tTollgh Fluctuation)按下式计算：肿 =2( “- c一 )／(G一 + ， )。 统计分析采用双单侧检验。将区间分解 为 和 两个单侧进行检验： 0：in 一In ≤ in日I 维普资讯 http://www.cqvip.com 280 中 国 药 科 大 学 学 报 28卷 或 1n 一ln uR≥In ／-／J：In日J< In 一l-1 < In 统计量为： 二 二 s 孔一 T二 s√詈 uT、 分别为样品和对照品样本均敦，s 为交叉设计方差分析时的误差均方的平方 根， =0．8， 一I．25， ， 服从自由度为 和 分布，若 a取 0．05，当 ≥t (v)， ≥t (v)同时成立，则拒绝 假设，接受备 择假设 ，即可认为达等效。 6 结果与讨论 制备的硫酸沙丁胺醇缓释片的释放度曲 线见图2。缓释片处方中，羟丙甲纤维索为亲 水性高分子材料，形成亲水凝胶骨架，聚丙烯 酸树脂 I辅助骨架形成兼具阻滞作用，十八 醇为疏水性阻滞荆，糊精为填充剂利于压片 筛选过程中发现，亲水性高分子材料与阻滞 剂的甩量与比例是缓释片制备的关键，这是 由于硫酸抄丁胺醇水溶性大，其释放速度难 以适度控制。制备的缓释片在体外能持续 l2 h释药，药物释放完全 ，骨架片胀大但仍完 整。 ． 两种制剂给药后，沙丁胺醇平均血药浓 度经时曲线见图 3、4，药动学参数 T一、 ⋯ 册 ， 一见表 2。硫酸沙丁胺醇缓释片相 对于普通片的生物利用度为 106．0 。 曼 里 i I， F 2．Re]e~Je p|口fⅡe 0f susmincd-r~ 诅He忸 of删 hJt-md uulfa~ * ‘ h (一I 6) F喀3·Me蚰 —础 。嘶cet．啪It —d口|e pro／i~ 0f咖 Ltmm for F ●．Mean 蛳 |c叩∞du丑‘ioII steady巾m 10 u ct|foOow~mg mII n岫 Hon ot-呻t|lr 一 le|融 (一▲一 ) bun皿0I啪 -璐阻bed—r。k鼬 hbku(a mB ev— tItnet(e mE，一▲--)坩 州 v蚰d曲 hb●嘲 (2．●mgx 3， 唧 12 h)f(一△ 一)删 hut^mm sI．1 忸nw呲k幢1叭，Im 一 △ 一 ) (●．amg ev．ry 8 h) TIb 2-A o眦n r of廿Ie m蛆n wdu∞ of Ih。ph-帆 ∞Ijnnk 呻J|m t时i defiv．d f抑m 也 ∞n。蛳 唰 帆 一cIrm cur嘴 of SRT (e mB)蛐 dc (2．4ⅢBx3) 一^E＼- v． c5 ‘ESld 维普资讯 http://www.cqvip.com 5期 吕万良等：硫酸抄丁胺尊缓释片的削备及其在健康人体内的药动学研究 281 统计结果显示，两种制剂 AUC 无显著 性差异，而其 c一、 册 均存在显著性差 异。硫酸沙丁胺醇缓释片与普通片相比，单 剂量给药后血药浓度峰值显著降低；高剂量 给药后血浓波动较小，而且有效血药浓度可 4 维持 8～10 h(其 有效血浓约 5～7 n&／ m1[ ‘ )。 文献[． 已报道了市售制荆的药动学研 究结果。本文的结果与文献[ 的结果相近。 参 考 文 献 1 Cu]]i~m VA ．F~mem JB，Jack D． dL ~ 3t4rumloJI-n州 7 leleu-'：Ive 一ad~ ptive f|∞州 -Ⅱmu-ltlL J ． 1969．I|t 141 2 Powe1]M L+ w dEbH r M ，Gm l R，t ．Comparable bioavaihbfliW 棚 ptutrmeoxklreetics of three fccmula~om 。f bu【叮d．J Ⅲ ，19BS．7I：217 BJ¨ d RE．Tan~ r R3，Ctu~'n W H．d ． ‘曲 m1．Il‘f。．1口F -lbu哪 l c~noenraaflong hum-n r solid-pb越f exⅡa fdon ln h培h P廿 nn蚰ce Uquid chtQccmmlga~y wi廿-flaor~一 ∞n de暗瞄∞ ．J 丹_nn届*r ．i990．●一S9l 钾 k悄 RS．Re ME．M斗e士MC，d ．Relative biaavaU— abdllty of_c~ntro]]ed r。k●●e elbuterol formulaflm',r∞ twi~~ dmlly use． 蛐 。 t1989．●：551 M a y．RRS．Mal~otre．sI n ● fccmulat of sa]bu— mmol ．D’ D A 用 口_ ，1991．IT；iS7I H● F，E D量眦 EEz． Ⅱ甜 。d tde_雎 smbummol sul一 Iik 丌ld倒 tltblets ulh E’mr t”I - 婶 口 l— 口 ．1990．1●：5●1 Hmmey F．K ．Dean KH ．Powell JR．d ．Al~ ol ex“ 一 ed—n4E●蟑 predect~ effect 0f food 呻 口 脚n哪 。口l d虹 。f Volw~x，Prevm ti!and Repatab~in healthy male valuta ‘∞髑 J c 脚_ ，1991．1l：991 Study on Sustained Release Tablets of SalbutamoI Sulfate and Its Pharmacokinetics in Healthy Human Volunteers Lu W angliang，Tu Xide，Jian8~'luguang，Yuaa Yisheng ，Zhao Feilang’，Li Ke 们瑚 ，Chima 们加鲫正缸 衄 脚，Ⅳ哟 210009；’PLAⅣ积知 GE Ho~dta／，Ⅳ删细 210002 Alto(tact HydmpldHc gel matrix tablets of salbut~aol svlfate(SRT)were developed．Formulation of SRT was selected by determination of the release rate． It w∞ found that the ratio of hydrophilic HPM C to hyd~ophobic stca~ic alcohol could be a key tO the~stabtiehment of SRT mattjx．The bicevai]一 ability of SRT was compared with conventional tablets(CT)in 10 healthy human volunmers under ran— domized crossover design．Each subject orally received 8Ⅱ1县of SRT and 7．2 mg of CT for g'mgIe d administration．and received 8 mg of SRT every 12 h and 4．8 mg of CT every 8 h for multiple dose administration．Plasma concefl~atioI1s were determined b HPLC with fluorescence detectiou ．1’he阳 一 rameters of sI ， — and ⋯ were found to be (4．60士0．8)h and(7．9士L 4)ng／ml respective． 1y．The relative bioavailability of SRT was l06．O ，compared to cr．No statistically significant dif- forence was observed in AUC0⋯ but difference was found in peak-to-~ough fluctuation(PET)．it was concluded that twice daily admi nistration of SRT provided a be tter n]tenative than three or four times daffy administration of cT． Key word~ Salbutamol sulfate{Sustained —release tablets}Pharmacokinetics}Human bioavailability： HPL C—fluorescence detection 维普资讯 http://www.cqvip.com