HPLC法测定牛黄消炎灵胶囊中胆红素的含量

HPLC法测定牛黄消炎灵胶囊中胆红素的含量 HPLC法测定牛黄消炎灵胶囊中胆红素的 含量 ? 36O?中国药事2006年第2O卷第6期 HPLC法测定牛黄消炎灵胶囊中胆红素的含量 傅黎春,李桃英,刘映,吴琳(湖南省衡阳市药品检验所,421001) 摘要:建立HPLC法测定牛黄消炎灵胶囊中胆红素的含量.采用Eurospher--C柱; 流动相为甲醇一 氯仿一1%磷酸溶液(81:13:6);检测波长450nm.胆红素在0.02430~0.1458~g范围内 进样量与峰面 积呈良好的线性关系,平均回收率为99.66%,RSD=O.67.本专属性强,结果准 确,可用于牛黄 消炎灵胶囊的质量控制. 关键词:胆红素;牛黄消炎灵胶囊;高效液相色谱法 中图分类号:R927.2文献标识码:A文章编号:10O2,7777(2006)O6一O36O—O3 DeterminationofBilirubininNiuhuangXiaoyanlingCapsulesbyHPLC FuLichun,LiTaoying,LiuYingandWuLin(InstituteforDrugControlofHengyangCity,Hun an Province,421001)+ ABSTRACTAHPLCmethodwasestablishedfordeterminationofbilirubininNiuhuangXia oyanling Capsules.AEurospher--C18columnwasusedwithmethanolchloroform--19/6phosphoric acidsolution (81:13:6)asmobilephase.Thedetectingwavelengthwas450nm.Therewasagoodrelationsh ipwhen thecontentofbilirubinwas0.O243O, O.1458g.Theaveragerecoverywas99.66,andRSD=0.679/6. Themethodwasspecificandaccurate.ItcouldbeusedforthequalitycontrolofNiuhuangXiao yanling Capsules. KEYWORDSbilirubin;NiuhuangXiaoyanlingCapsules;HPLC 牛黄消炎灵胶囊收载于《卫生部药品标准中药 成方制剂第十册》口],由牛黄,黄芩,栀子等11味 中药经提取加工制成的中药复方制剂,具有消炎退 热,镇静安神作用,用于病毒性感冒,上呼吸道感 染引起的高热不退等症.现行质量标准中未收载含 量测定项目,不能有效地控制药品质量.方中牛黄 为君药,我们参考有关文献Ez,s],试用HPLC法测 定牛黄中胆红素的含量,方法简便,结果准确,效 果满意. 1仪器与试药 1.1仪器 SSI高效液相色谱仪(美国科学系统公司, SeriesHI型泵,SSI500紫外检测器),色谱之星分 析工作站,SCQ5o型超声仪(上海申波超声公 司). 1.2试药 胆红索对照品(中国药品生物制品检定所,批 号100077—200301);甲醇为色谱纯,水为超纯 水,其余试剂均为纯.牛黄消炎灵胶囊(市售 品),不含牛黄的阴性对照样品(按照标准中处方 比例及制备工艺自制). 2方法与结果 2.1色谱条件 色谱柱:Eurospher一100C18(4×250mm, 5m);流动相:甲醇一氯仿一19/6磷酸溶液(81: 13;6);柱温:3O?,流速1.2ml?min.".,检测 波长为450nm;进样量1O"l,理论板数以胆红素 峰计应不低于1500. 2.2线性关系考察 精密称取胆红素对照品0.00810g,置100ml 棕色量瓶中,加氯仿80ml,在水浴温度3O?以下 超声处理15分钟,迅速放冷至室温,并用氯仿稀 释至刻度,摇匀,制成对照品贮备液.精密量取对 照品贮备液0.30,0.6O,0.90,1.2O,1.5O, 1.80ml于10ml棕色量瓶中,加氯仿稀释至亥0度, 摇匀.分别进样1ol,记录胆红素峰面积值,以 中国药事2006年第2O卷第6期?361? 峰面积积分值(Y)对进样量(x)进行线性回归, 得回归方程:Y=8499379X一12804r一0.9999. 结果明,胆红素对照品在0.02430,0.1458mg 范围内进样量与峰面积呈良好的线性关系. 2.3对照品溶液的制备 精密量取"2.2"项下对照品贮备液5ml置50ml 棕色量瓶中,用氯仿稀释至刻度,摇匀,即得. 2.4供试品溶液的制备 取牛黄消炎灵胶囊内容物2O粒,精密称定, 研细,精密称取细粉适量(约相当于人工牛黄 35.7mg)置50ml棕色量瓶中,精密加氯仿一甲醇 一 5盐酸水溶液(90;10:0.3)25.00ml,密 塞,在水浴温度30.C以下超声处理l5分钟,迅速 ,取上层液用微孔滤膜 放冷至室温,稍静置 (O.45"m)滤过,取续滤液作为供试品溶液. 2.5空白试验 取不含牛黄的阴性对照样品照供试品溶液同法 制备阴性对照溶液,分别取对照品溶液,供试品溶 液,阴性对照溶液各1Ol,注入液相色谱仪,记 录色谱峰,结果供试品与对照品溶液在相同保留时 间出现色谱峰,阴性对照溶液在相同保留时间处未 出现色谱峰,见图. C I 图牛黄消炎受胶囊的HPLC色谱圈 a.对照品'b.供试品lc.阴性对照样品;1.胆红素 2.6精密度试验 取同一样品溶液(批号20030102),重复进样 6次,每次1Ol,记录峰面积,平均峰面积 724026,RSD=0.80(n=6),表明精密度良 好. 2.7重复性试验 精密称取同一样品(批号20030102),分别按 理论量的8O,100,120设定取样量,每组3 份,共9份,按上述色谱条件进行重复性试验,结 果平均含量0.2216mg/粒,RSD=1.9(n一9), 表明本方法重复性较好. 2.8回收试验 取阴性对照样品约0.4g,精密称定,置50ml 棕色量瓶中,分别精密加入0.1021mg?ml的对 照品溶液2.OO,2.50,3.00ml,各3份,分别精 密加氯仿一甲醇一5盐酸水溶液(9O.10:0?3) 稀释成25.00ml,照"2.4"项下方法超声处理, 滤过,按上述色谱条件进行测定,结果见表1. 2.9稳定性试验 取同一供试品溶液分别在0小时,4小时,6 小时,8小时进样测定,平均峰面积值为698825, RSD=1.4,供试品溶液在8小时内峰面积基本 稳定. 2.1O样品测定 取对照品溶液及供试品溶液各1%1,注入液 相色谱仪,记录峰面积,以外标法计算含量,结果 见表2. 衰1回收率试验结果 裹2样品测定结果(n一2) 批号2003040320021001200201012003010220031001 平均含量O . 14O2O.2196O.O241O.22920.1876 (rag/粒) 3讨论 取同一批号样品,按供试品溶液制备方法分别 超声处理10分钟,l5分钟,2O分钟,测定结果表 明,提取15分钟,20分钟样品含量无明显变化, 提取时间以15分钟为宜. 因胆红素对光和热的稳定性较差,所以在提取 ? 362?中国药事2006年第2O卷第6期 化纤口服液中黄芪,赤勺的定性定量分析 陈道振,林海伦(浙江省宁海县长街中心卫生院,宁波315601;宁波市药品检验所) 摘要:本文建立了化纤口服液中黄芪和赤芍的薄层色谱鉴别方法,井采用HPLC法 测定该制荆中主药 赤芍的有效成分芍药苷的含量,以HyperilBD. SCs为色谱柱;流动相为甲醇一O.05tool?L磷酸二氢 钾(30:70);检测波长为230nm;流速为0.6ml?rain_..芍药苷的线性范围为0.5, 3.O/xg(r一 0.9999),平均加样回收率为97.2O,RSD=O.92(n=5).鉴别与含量测定方法简便,准确, 可用于 化纤口服液的质量控制. 关键词:薄层色谱法;HPLC法;芍药苷 中图分类号:R917.1;R927.2文献标识码:A文章编号:1o02—7777(2006)O6,O362 一O3 QualitativeandQuantitativeAnalysisfortheQualityControlofHuaxianOralLiquid ChenDaozhenandLinHailun(ChangjieCentralClinic,NinghaiCounty,NingboCity,Zhejiang Province,315601;InstituteforDrugControlofNingboCity) ABSTRACTATLCmethodwasestablishedforidentificationofRadixAstragaliandRadixPaeoniae RubrainHuaxianoralliquid.AHPLCmethodfordeterminationofpaeoniflorininHuaxianoralliquidwas established.AHyperilBDSCl8columnwasusedwithmethanol一0.05mol?L一 PotassiumDihydrogen Phosphate(30:70)asmobilephase.Thedetectingwavelengthwas230nm.andflowratewas0.6ml? min.Thelinearrangewas0.5, 3.0g(r=0.9999),theaveragerecoveryratewas97.20%,RSD=== 0.92(n=5).Themethodwassimpleandaccurate,couldbeuseforqualitycontrolofHuaxianOral Liquid. KEYWORDSTLC;HPIC;Paeoniflorin 化纤口服液由黄芪,赤芍,制首乌,灵芝,垂 盆草,丹参等十一味中药组成,具有消炎和抗肝细 胞外基质过度沉积,调节肝细胞代谢失衡状态的作 用;用于抗乙型肝炎肝纤维化,疗效较好.原质量 标准(系医院制剂质量标准,收载于宁波市医院制 剂质量标准汇编)中无专属性的质量控制指标.方 中黄芪和赤芍为主药,黄芪甲苷和芍药苷分别为其 主要成分.为了有效控制该制剂质量,现对化纤口 服液进行了薄层色谱鉴别和HPLC法的含量测定 研究. 1仪器,试药和样品 HP1100高效液相色谱仪(自动进样仪),二 极管阵列紫外检测器;硅胶G板(青岛海洋化工 厂分厂生产),化纤口服液,缺黄芪阴性对照和缺 赤芍阴性对照(宁波市肝病医院).黄芪甲苷对照 品(批号:0781--200311),芍药苷对照品(批号: 操作过程中应选用棕色量瓶,并注意控制超声时水 浴温度在3O?以下.制备样品溶液时,加入微量 酸性水溶液,有利于胆红素的提取. 作者共对河南,山西,吉林,贵州四个生产厂 家的样品进行测定,结果表明各生产厂家所生产的 样品之间胆红素含量差异较大,从0.0241mg/粒 至0.229mg/粒不等,说明通过制定胆红素含量测 定方法来有效控制该药品质量很有必要. 参考文献: [1]中华人民共和国卫生部药品标准Fs].中药成方制荆.第 十册.I995t29 [2]刘乃强,张晓丹,李振国.等.感冒通片中胆红素的吉量测 定FJ].中国药学杂志,8000.35(II).769 [3]张蕾,刘乃强,张富堂.高效液相色谱法测定镇痛片中胆 红索的含量口].中国药事,2003,17(9).580