3例类孟买血型鉴定及分析

3例类孟买血型鉴定及分析 3例类孟买血型鉴定及分析 中国输血杂志2006年z月第19卷第1期ChinJBloodTransfusion.Feburary,2006.Vo1.19,No.1 3例类孟买血型鉴定及分析 黄文华闰建明黄锦红(福州市中心血站..福建福州350004) 摘要:目的鉴定并分析类孟买型的特点.方法运用血型血清学吸收放散与唾液血型物质抑制等试验方法 与基因分型,对3名类盂买型献血者血型鉴定结果3名献血者血型均为?型类孟买血型.经典血清学方法结果 与基因分型结果一致,交叉配血试验37?抗球蛋白介质中与红细胞反应强度为W+,1+.结论类孟买型人着需 要输血应考虑到抗一A,抗一B,抗-H的实际情况,选择在37?反应最弱的ABO同型去白红细胞输注. 关键词:ABO血型类孟买型鉴定 中图分类号:R457.11文献标识码:A文章编号:1004—549X(2006)01—0031—02 类孟买血型为罕见的稀有血型,是由于H基因缺乏活1.3PCR反应参数扩增采用热启动技术即95?预温 性.不能正常合成ABO血型物质.但在&基因的作用下,分5min,然后95?30s,60?30s,72?90s进行3O个循环.72? 泌液中仍存在正常ABH物质的一类血型.近来笔者在献延伸5min. 血者血型筛查中连续发现3例类孟买血型,为此作了血清学1.4PCR产物检测经4.0琼脂糖凝胶中电泳25min, 及基因分型鉴定,报道如下.紫外灯下检测,结果. 1与方法 1.1样本来源例1(女,23岁)为福建省福清市人}例2 (女,22岁),例3(女,24岁)均为福建省福州市人.分别于 2003,2004年到无偿献血,3人血型均因反定型中O细胞出 现凝集而送血型室进一步检查. 1.2试剂与方法单克隆抗一A,抗-B(20030l1O, 20031121),抗一AB(20020424,20040517).抗一H(20020612) 血清,ABO试剂红细胞(20030529,20040322,20040508),筛 选细胞(20030530,20040203,20040512),谱细胞 (20030331,200402i0,20040421)均由上海血液生物医药责 任有限公司生产;人源抗血清取自健康正常ABO血型献血 者.已知O型红细胞及O型红细胞由深圳输血医学研 究所提供正反定型,抗体筛选试验,吸收放散试验与唾液 血型物质抑制试验测定参照文献[1]方法.ABO基因分型使 用G&T公司ABO基因分型试剂盒(B98O1),聚合酶链反应 一 序列特异性引物(PCR—SSP)扩增ABO血型基因,内对照为 扩增人类生长激素(HGH)基因,扩增产物为207bp(表1). 表1AB0基因分型参数 *已于2005年10月并人福建省血液中心 2结果 2.1血型血清学鉴定 2.1.1ABO血型鉴定结果见表2. 衰2ABO血型血清学鉴定结果 倒1 倒2 例3 2.1.2抗体的筛选与鉴定献血者血清与1,3号筛选细 胞均呈阳性反应.与1,1O号谱细胞反应均阳性,强度与0 细胞反应一致;例1,3的血清与已知O型红细胞不凝集, 例2的血清与已知的On型红细胞不凝集,说明3者血清中 古有抗一H或抗一HI. 2.1.3吸收放散试验3名献血者洗涤3次后的浓缩红细 胞及对照()型红细胞分别与人源抗一A,一B,一H吸收放散:例 i,3的放散液可与Bc反应,不与Ac,()c反应.说明放散出 抗一B,未放散出抗一A,一H,证实红细胞上有弱B抗原,无A,H 抗原;例2的放散液可与Ac反应,不与Bc,Oc反应,说明放 散出抗一A,未放散出抗一B,一H,证实红细胞上有弱A抗原,无 B,H抗原;对照红细胞未放散出抗体,最后1次洗涤液(第6 次)无抗体活性. 2.1.4唾液血型物质检测例l,3检出微量B和H物质, O0000000O 件件抖件仆仆 抖卅件什件件件 件什件卅件卅计件件 0O00OOO0O 0O0000000 代眦代眦眦 ?32?虫虽缒坦叁壹;99年_2月第19卷第1期 ChinJBloodTransfusion,Feburary,2006,Vo1.19.No.1 例2检出微量A和H物质 2.1_5唾液中和抑制试验3名献血者的血清与O分泌型 人唾液中和后,与.型红细胞的凝集均被抑制,提示3者血 清中所含抗体为抗一H. 2.1.6抗体性质测定3名献血者的血清用巯基乙醇(2? Me)处理后,在3种温度下与Ac,Bc,Oc的反应均消失,提示 血清中抗体属IgM型. 2.1.7献血者血清中的ABH抗体效价测定3例的抗一H 在37"C均有活性,其中例3抗一B为冷抗体(表3). 表3献血者体内ABH抗体在不同温度下的效价 温度(?)抗一A抗一B抗H 例1 倒2 例3 2.2PCR—SSP基因分型例1,3为?..例2为Ao2O】 (图1).上述基因定型的结果与经典血清学方法检测唾液 中ABH物质的结果相符合(基因检测由深圳输血医学研究 所进行). 倒1 例3 例2 ?图1基因分型结果电泳扩增图 2.3交叉配血把3名献血者当做受血者.取ABO同型血 (O与A型皿交叉,0与B型血交叉)各3O份交叉配皿. 发现37?抗球蛋白介质中与红细胞的反应强度均为W+, 1+. 2.4家系调查取样困难(1名献血者双亲离异,其余2名 双亲常年在外省打工)未能进行. 3讨论 类孟买血型为罕见的红细胞血型.属于Hh血型系统, 主要特征为红细胞H抗原全部或部分缺失,而分泌液中可 能存在或不存在H抗原[2].遗传学上用双结构基因的理论 来解释类盂买血型的形成机理,即H(FUT1)位点基因控制 造血组织的a(1,2)岩藻糖基转移酶的活性.决定H抗原在 红细胞膜上的表达;&(FU丁2)位点基因控制分泌组织的 (1.2)岩藻糖基转移酶的活性,决定H抗原在分泌液的表 达口].当H(FUT1)基因依赖的(1.2)岩藻糖基转移酶缺 乏时.红细胞表面缺乏ABH抗原,而唾液中的ABH物质的 分泌由于受另外1个基因座位&(FUT2)控制,因此在唾液 等分泌液中可找到ABH血型物质. 血型血清学试验显示3例均符合Race的类孟买型?型 分类命名标准],推测例1,3有B,H,&基因,应定为ok 型;例2有A,H,&基因.应定为()型.3例正反型均符 合"O"型,均因0细胞凝集而送检,在临床工作中极易被认 为存在抗高频抗体而被漏检,因此笔者认为此种情况抗.H 和抗一A,B血清应常规应用.有可疑再作进一步检查.由于 未能采集到3名先证者有关家系的血样.此3例类孟买型的 血清学遗传规律尚待进一步研究. 类孟买型易定为0型[5],曾有报道1例先后输用0或 同型红细胞.未发生输血反应,可能因其血清中所含少量抗一 H为冷抗体.与0型血配血(37?)相舍而未被发现.理 论上讲类孟买血型可能因带有分泌型基因,血清中的相对抗 体弱,在37?常无反应[",因此类孟买血型的人可输O或同 型(在37?交叉配血无反应)的红细胞.但笔者鉴定的这3 例的抗一H在37?仍有活性,若输注.型血.往往引起严重 的输血反应.因此笔者认为当类孟买型人群需要输血时,最 好为H抗原缺乏的同型输血或自体输血,如无条件,应考虑 到抗一A,一B,一H的实际情况,宜选择37?与输血者反应最弱 的ABO同型去白红细胞输注].并保持37?左右的输血环 境.减少输血反应.由于类孟买血型极其罕见,加上其给I临 床输血选择带来的特殊性,因此该类血型人群的建档具重要 的意义. (感谢深圳市输血医学研究所的吴国光教授,喻琼,苏宇 清,梁延连老师对本文的大力支持!) 参考文献 1肖星甫主编.输血技术手册[M].成都:四JII科学技术出版社, 1992,494,5O7 2苏宇清,吴围光,魏天莉,等.类孟买型的.FU丁1和.FU丁2等位基 因突变的分析[J].中国输血杂志,2005,18(3):192 3陈继庭,吕巍尧.H血型系统(H.018),见:李勇,杨贵贞主编. 人类红细胞m型学实用理论与实验技术[M].北京:中国科学技 术出版社,1999,48,51 4陈忠,张莉尼.孟买与类孟买型口].中国输血杂志,199I,4(3); 154. 5胡永红,高小华.一例4次误定为0型的OfI型分析[J].中 国输血杂志,1994,7(1)i32 6杨兴.一例类孟买O的实验报告[J].中国输血杂志,1994,7 (3):140 7向东,张雄民,朱自严,等,1例类盂买血型的鉴定及输血[J]. 中国输m杂志,2004,17(4),276 8周哗.邓安梅,仲人前.类孟买型Bh及输血1例报告[J].临床 检验杂志,2003,21(1):59 (2004—12-20收稿,2006—01—11修回) 本文编辑;蔡辉 8844442 0 娜. 826i:缀 毖4卯{:;