围产期孕母感染状态与脐带血中免疫因子及新生儿免疫状态的关系

围产期孕母感染状态与脐带血中免疫因子及新生儿免疫状态的关系 【摘要】目的 分析孕母在围产期的感染状态与脐带血淋巴细胞、免疫球蛋白，以及与新生儿免疫状态的关系。为临床诊治新生儿罹患感染性疾病提供具有潜在意义的指标。 抽取对照组与感染组脐带血，分析其T淋巴细胞组成，免疫球蛋白含量，以及新生儿患病情况。结果 与对照组相比，感染组脐带血中淋巴细胞CD+3、CD+4的百分比显著上升(P<0.05或<0.01)，淋巴细胞CD+8差异无统计学意义(P>0.05);而CD+19细胞则有明显下降(P<0.05)。感染组脐带血免疫球蛋白IgA、IgM的含量均明显增高(P<0.01);但IgG差异无统计学意义(P>0.05)。新生儿1周内的患病情况分析:对照组仅1例新生儿患肺炎;感染组新生儿死亡4例，肺炎13例，黄疸2例。结论 围产期脐带血CD+3和CD+4淋巴细胞比例的降低，以及脐带血IgA、IgM含量的增高可能与新生儿死亡和感染概率提高具有相关性，暗示脐带血可用来预测新生儿感染状态。 【关键词】 围产期;怀孕;感染;胎血;T淋巴细胞;免疫球蛋白 如何诊断并预测新生儿可能罹患某种疾病，既是当前临床研究的一大挑战，又是一大机遇。脐带血中的免疫相关细胞及免疫球蛋 白，已经成为预测新生儿过敏反应且具有潜在利用价值的指标[1-4]。本研究重点探讨孕母感染状态与脐带血免疫状态之间可能存在的关系，并通过定量分析，推测围产期孕母的免疫功能如何影响脐带血的免疫状态，并进而影响新生儿的免疫功能。因此，本研究对来源于有感染症状孕母的新生儿早期诊治具有重要临床意义。 1 资料与方法 1.1 一般资料 随机选择我院2008至2010年产科出生的体重2 500,4 000 g的足月新生儿，每组30例，分组标准:孕母无任何病理因素者为对照组;孕母患宫腔感染、急性全身感染或合并阴道炎，而无其他病理因素者为感染组。 1.2 标本采集 选择符合条件的妊娠孕妇，于胎儿娩出、断脐后，从母体端抽取脐带血1 ml于EDTA-2K抗凝管，2 ml于肝素锂抗凝管，4?保存待测。 1.3 方法 (1)T细胞亚群检测:采用美国BD公司的FAcscalibur流式细胞仪及IMK专用试剂，将每管分别加入相应试剂20 μl，以及EDTA-2K抗凝管脐带血100 μl避光10 min，荧光染色;加入溶血剂2 ml,8,10 min后离心5 min(800,1 000 r/min)，弃去上清液;加入PBS 2 ml混匀，离心5 min(800,1 000 r/min)， 弃去上清液;加PBS 0.8 ml，上机测定;e.Simul TEST数据分析。(2)免疫球蛋白测定:用美国AbboTTAEROSET2000全自动生化分析仪，免疫比浊法进行测定。将肝素锂抗凝管脐带血离心3 min(3 000 r/min)，分离出血清，取血清10 μl上机检测。 1.4 统计学分析 应用SPSS 13.0统计软件，计量资料以x-?s表示，组间比较采用t检验，计数资料采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。 2 结果 2.1 脐带血中T淋巴细胞亚群测定结果比较 与对照组比较，除CD+8以外，感染组其他淋巴细胞的比例均显著上升(P<0.05或<0.01)。见表1。表1 2组脐带血中T淋巴细胞亚群测定结果比较 2.2 脐带血中免疫球蛋白检测结果比较 与对照组比较，孕母的感染会导致IgA和IgM显著上升(P<0.01)，但对IgG含量无明显影响(P>0.05)。见表2。表2 2组脐带血中免疫球蛋白检测结果比较 2.3 新生儿死亡及常见免疫相关疾病发病情况 孕母的免疫状况与新生儿的免疫功能和生存密切相关。孕母感染会提高新生儿死亡、罹患肺炎、黄疸的比例(P<0.05)。表3 新生儿死亡及常见免疫相关疾病发病情况 3 讨论 脐带血是胎儿娩出、脐带结扎并离断后残留在胎盘和脐带中的血液，通常是废弃不用的。但脐带血中含有可以重建人体造血和免疫系统的造血干细胞，可用于造血干细胞移植，治疗多种疾病。因此，脐带血已成为造血干细胞的重要来源，特别是无血缘关系造血干细胞的来源。也是一种非常重要的人类生物资源。此外，抽取脐带血对孕妇和新生儿影响很小，如果利用其作为预测新生儿可能罹患何种疾病的研究对象，则具有重要的临床意义。同时，脐带血中含有多种免疫细胞及免疫相关因子，因此，本研究重点聚焦于免疫相关疾病。即主要研究脐带血的淋巴细胞组成、免疫球蛋白含量与新生儿患病情况之间的相关性。 淋巴细胞是在适应性免疫中起关键作用的白细胞，主要指B淋巴细胞和T淋巴细胞，二者表面抗原受体具有高度多样性，经抗原激发可分化为抗原特异性效应细胞，分别介导体液免疫和细胞免疫。因此，这些细胞有可能作为母亲与婴儿之间免疫功能的桥梁，成为预测新生儿免疫功能的一个指标[1]。通过研究，发现T细胞CD+3，CD+4和CD+8和B淋巴细胞CD+19在感染组具有明显的组成性变化。因此，孕母的感染会改变脐带血的免疫细胞组成，从而降低新生儿的免疫能力。 免疫球蛋白是B系细胞的产物，而IgG是唯一能通过胎盘的免疫球蛋白。由于脐带血的IgG等于或稍高于母体水平，因此可用来代替孕母的IgG水平[5]。胎儿体内最先出现的是IgM，在胚胎晚期已能合成，正常情况下因无抗原刺激，胎儿自身产生IgM甚 微，又因IgM不能通过胎盘，故脐带血含量甚微，若脐带血含量增高，提示宫内感染。IgA不能通过胎盘，故脐带血IgA增高同样提示胎儿有宫内感染[6]。 本次研究结果说明脐带血IgA、IgM增高有助于新生儿感染的早期发现与诊治，但IgG无预测价值。 分析新生儿出生1周时间内所患疾病情况，发现新生儿的患病情况与孕母的健康状态成正相关。同时孕母的感染会导致淋巴细胞和免疫球蛋白的改变，说明孕母的感染状态、脐带血中免疫相关因子的组成和新生儿的健康状况之间，可能存在内在联系。 综上所述，通过分析脐带血淋巴细胞的组成和免疫球蛋白的含量，有助于新生儿感染的早期发现与诊治。通过产前了解母体的感染状况有利于事先估计胎儿出生后的健康状况，对新生儿的出生做好充分准备。 【参考文献】 1 Neves SF，Elói-Santos S，Ramos R，et al.In utero sensitization in Chagas disease leads to altered lymphocyte phenotypic patterns in the newborn cord blood mononuclear cells.Parasite Immunol,1999,21:631-639. 2 罗珂，张平，林芳.感染高危因素、分娩方式、胎龄对新生儿免疫功能的影响.宁夏医学杂志，2009,31:415-416. 3 施霄音，魏小荣.新生儿感染时体液免疫状态的临床分析.浙 江实用医学，2003,3:159-159. 4 Moore DC，Elsas PX，Maximiano ES，et al.Impact of diet on the immunological microenvironment of the pregnant uterus and its relationship to allergic disease in the offspring-a review of the recent literature.Sao Paulo Med J,2006,124:298-303. 5 金汉珍，黄德珉，官希吉主编.实用新生儿学.第1版.北京: 人民卫生出版社，1990.549-554. 6 汪翼，郭学鹏，王玉林，等主编.儿科学.第1版.北京:人民 卫生出版社，2004.173-175. 作者:马文霞 郭卫平 卢艳辉 李亚军 赵晓霞作者单位: 075000 河北省张家口市，河北北方学院附属第一医院儿科(马 文霞、郭卫平、卢艳辉、李亚军)，妇产科(赵晓霞)