[doc格式] 高效液相色谱测定银丹心脑通胶囊中丹酚酸B的含量

[doc格式] 高效液相色谱测定银丹心脑通胶囊中丹酚酸B的含量 高效液相色谱测定银丹心脑通胶囊中丹酚 酸B的含量 . 1048?安徽医药 AnhuiMedicalandPharmaceuticalJournal2008Nov;12(11) 高效液相色谱测定银丹心脑通胶囊中丹酚酸B的含量 刘彩虹,何 (1.安徽省池州市人民医院药剂科,安徽池州247000 勇,吕玲 ;2.安徽中医学院药学院制剂实验室,安徽合肥230038) 摘要:目的建立一种高效液相色谱法测定银丹心脑通胶囊中丹酚酸B的含量.方法以LabAlliance色谱柱(4.6mm×250 mm,5m)为色谱柱,流动相:甲醇一乙腈一甲酸一水(30:10:1:59),检测波长:286nm,流速1.0ml?min,.结果丹酚酸B在 0.0277,0.2774mg?L范围内呈线性关系(r=0.9998);平均回收率为98.89%,RSD=0.85%(n=6).结论本法操作简 单,结果准确,重现性好,适合该产品丹酚酸B含量的测定. 关键词:银丹心脑通胶囊;丹酚酸B;高效液相色谱法;含量测定 DeterminationofdanphenolicacidBinyindanxinnaotongcapsulesbyHPLC LIUCai.hong’.HEYong.L订Ling (1.OUPeopleHospital,Ch&hou247000;2.AnhuiUniversityofTraditionalChineseMedicine,Hefei230038) Abstract:AimToestablishamethodfordeterminingdanphenolicacidBinyindanxinnaotongcapsulesbyHPLC.MethodsThesta— tionaryphasewasLabAllianeeCl8(4.6mm×150mm,5I.rm).Themobilephasewasmethanol—acetonitrile-formicacid—water(30:10:1 :59).Thedetectionwavelengthwassetat286nm.Theflowratewas1.0ml?min,.ResultsThelinearrangeofdanphenolicacidB waswithintherangeof0.0277, 0.2774mg?L’.anditssamplerecoverywas98.89%.ConclusionThismethodissimple.reliable andwellrepeatable.ItcanbeusedforthecontentdeterminationofdanphenolicacidB. Keywords:yindanxinnaotongcapsules;danphenolicacidB;HPLC;contentdetermination 银丹心脑通胶囊具有活血化瘀,行气止痛,消食化滞的功 效.用于气滞血瘀引起的胸痹,症见胸痛,胸闷,气短,心悸 等;冠心病心绞痛,高脂血症,脑动脉硬化,中风,中风后遗症 见上述症状者.有”心脑同治”的功效.丹参为本品的君药 之一,具有祛淤止痛,活血痛经,清心除烦的作用.其中 丹酚酸B是丹参中活性最强的水溶性成分,对心,脑,肝 等器官均具有重要药理作用.本文选择以丹酚酸B作为 控制本品质量的指标,参照国家药典丹参项下的含量测定方 法及相关文献,采用HPLC法测定丹酚酸B的含量. 1仪器与试药 LC一10ATvp岛津高效液相色谱仪(Et本岛津);浙江大学 N2000色谱工作站;CP225D电子天平(十万分之一,德国赛多 利斯);AS3120型超声波清洗器(120W,40KHZ,奥特赛思); 丹酚酸B对照品(中国药品生物检定所,批号:111562— 200403);甲醇,乙腈为色谱纯,甲酸为分析纯,水(自制);银 丹心脑通胶囊样品及阴性对照品(自制). 2方法与结果 A丹酚酸对照品 2.1色谱条件色谱柱:LabAlliance色谱柱(4.6mm×150 Innl;5m),流动相:甲醇一乙腈一甲酸一水(30:10:1:59),检测 波长:286nm;柱温:25oC;流速:1.0ml?min,. 2.2对照品溶液的制备称取丹酚酸B对照品(置五氧化 二磷干燥器中放置24h)适量,加75%甲醇制成每1ml中约 含0.5548txg的溶液,即得. 2.3供试品溶液的制备取本品适量,研细,取约0.4g,精 密称定,置50ml量瓶中,加入75%甲醇40ml,超声处理 (120W,40KHZ)20min,放冷,用75%甲醇定容至刻度,摇匀, 滤过,取续滤液,即得. 2.4专属性考察按照处方比例,制备工艺制备成不含丹参 的阴性对照溶液.分别精密吸取丹酚酸B对照品溶液,丹参 阴性对照溶液与供试品各2Ol,注入液相色谱仪,按上述色 谱条件测定,色谱图,结果见图l.由结果可见,对照品 丹酚酸B峰的保留时间在14min左右,供试品中主峰与其他 峰分离良好,符合要求,阴性对照色谱在丹酚酸B峰处无吸 收,明在该测定条件下阴性无干扰. B银丹心脑通胶囊样品 图1色谱图 2.5线性关系考察精密吸取对照品溶液(含丹酚酸B 0.5548mg?L)O.5,1,2,3,4,5m1分别置于l0ml的容量 瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,作为不同浓度的对照品溶液, 分别吸取20l进样,记录色谱图峰面积,以对照品吸收峰面 积为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线,得到回归方程y C阴性对照样品 = 6×124X+18224(r=0.9998);表明丹酚酸B在0.02774, 0.2774mg?L呈现良好的线性关系. 2.6进样精密度试验精密吸取同一对照品溶液20l连 续进样6次,记录其峰面积,RSD=1.43%,结果显示进样精 密度良好. 安徽医药 AnhuiMedicalandPharmaceuticalJournal2008Nov;12(11).1049. 高效液相法测定三金软胶囊中羟基积雪草苷含量 张磊 (安徽省食品药品检验所,安徽合肥230001) 摘要:目的建立高效液相色谱法测定三金软胶囊中羟基积 雪草苷含量的方法.方法以C,柱(250mm×4.6mm,5.0 m)为固定相,梯度洗脱,检测波长为204nm.结果羟基 积雪草苷在0.1005,0.8040g?L范围内呈良好的线性 关系,相关系数为0.9998,平均回收率为98.20%,RSD= 0.61%.结论该法简便,快捷,灵敏,准确,重现性好,可用 于三金软胶囊中羟基积雪草苷含量的测定. 关键词:三金软胶囊;羟基积雪草苷;高效液相色谱法 三金软胶囊系由金樱根,菝葜,羊开口,金沙藤,积雪草经 加工制成的软胶囊.功能清热解毒,利湿通淋,益’肾.用于下 焦湿热,急,慢性’肾盂肾炎,膀胱炎,尿路感染属肾虚湿热下注 证者.制剂积雪草中的羟基积雪草苷曾以薄层扫描法测定积 雪草苷的量,但薄层扫描法测定结果误差大,参考有关文 献…并结合实际情况,我们采用高效液相色谱法测定制剂积 雪草中的羟基积雪草苷对其进行研究. 1仪器和试药 1.1仪器LC—IOATvp型输液泵(日本岛津);SPD一10Avp 型检测器(日本岛津);N一2000色谱工作站(浙大智达公司); KromasilCl8柱(250am×4.6mm,5m,大连江申公司);超 声提取器(SB2000型). 1.2试药羟基积雪草苷对照品由中国药品生物制品检定 所提供(批号:110756—200210),乙腈为色谱纯,水为重蒸馏 水,其它试剂均为分析纯. 2方法与结果 2.1色谱条件的选择以C.柱为色谱柱;进样量:10txl;采 用梯度洗脱j;以乙腈为流动相A,水为流动相B,按表1进 行梯度洗脱;流速每分钟1.0ml;检测波长204nm.理论板 数按羟基积雪草苷峰计算应不低于5000. 表1羟基积雪草苷梯度洗脱程序 2.2对照品溶液的制备取羟基积雪草苷对照品约10mg, 精密称定,置25ml量瓶中,加甲醇超声使溶解并稀释至刻 度,摇匀;即得(每1ml含羟基积雪草苷0.4mg),见图1. 2.3供试品溶液的制备取本品20粒,挤出内容物混匀,取 5g,精密称定,用乙醚50ml振摇洗涤2次,滤过,弃去乙醚 液,药渣挥干乙醚,精密加入70%甲醇100ml,称定重量,超 声(功率250W,频率40kHz)提取30分钟,放冷,再称定重 量,用70%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过.精密量取续滤 2.7稳定性考察取同一供试品溶液,在0,2,4,6,8,10h 分别进样,记录峰面积,RSD:1.6l%,结果表明丹酚酸B在 10h内稳定性良好 2.8精密度一重现性试验分别精密取同一供试品6份,按 制备方法分别制成样品溶液,在上述色谱条件下测定,计算含 量,RSD=1.78%,结果表明本品在所建色谱条件下重现性较 好. 2.9检测限取0.5548mg?L对照品溶液,用流动相依 次稀释成一系列由高到低的梯度溶液,在上述色谱条件下分 别进样,以信噪比为3计,最低检测限为55ng. 2.10加样回收率试验精密称取已知含量的银丹心脑通胶 囊样品6份,分别精密加入一定量的丹酚酸B对照品,按样品 制备方法项下制备供试品液,在上述色谱条件下进样分析,丹 酚酸B的回收率为98.89%,RSD为0.85%(n=6).结果表 明本品中丹酚酸B的加样回收率较好,本色谱条件适宜本品 的测定,所测成分之间无干扰,见表1.平均回收率为 98.89%,RSD为0.85% 表1丹酚酸B加样回收试验数据表(n:6) 2.1l样品测定按上述供试品制备方法制备成供试品溶 液,进样按外标法计算丹酚酸B的含量,测定了本品3批样品 含量分别为每粒含丹酚酸B20.12,20.08,20.19mg,结果表 明三批样品的含量稳定,结果准确可靠. 3小结 本品的含量测定条件曾参考中国药典2005年版一部中 “丹参”项下含量测定方法,以甲醇一乙腈一甲酸一水(30:10:1: 59)为流动相,经验证,分离度好,理论塔板数高.通过对本品 的专属性考察,线性关系考察,稳定性试验,重复性试验及加 样回收率实验等方法学考察,结果表明采用该色谱条件测定 银丹心脑通胶囊中丹酚酸B的含量,方法稳定,可靠,能有效 的控制药品的质量. 参考文献: [1]国家药典委员会.中国药典(一部)[S].北京:化学工业出版 社,2005:52 [2]王晓静,王曙,吴静.不同产地丹参药材中丹参酮?A的含 量比较[J].华西药学杂志,2004,19(2):142. [3]尹音,王峰,徐向阳.丹酚酸B研究进展[J].中国药师, 2007,10(10):1034—7. [4]张化然.HPLC法测定天王补心丸中丹酚酸B的含量[J].安徽 医药,2007,l1(1):889—90. [5]湛月娥,徐江平.丹酚酸B药理作用的研究进展[J].华南国防 医学杂志,2007,21(2):37—9,54. (收稿日期:2008—06—11)