前列腺素E_2对鼠头盖骨钙代谢的作用

前列腺素E_2对鼠头盖骨钙代谢的作用 前列腺素 E对鼠头盖骨钙代谢的作用 2 李 强 , 史俊南 , 王鑫源 , 吴织芬 , 孙叶芳 ()第四军医大学口腔医学院 , 陕西 西安 710032 ( ) 目的 :观察前列腺素 EPGE对骨组织钙代谢的作用 。方法 :原子吸收分光光度计检测骨器 [ 摘 要 ] 2 2 2 + 2 + 2 + 官培养上清中 Ca浓度 。结果 :0. 01,0. 1ng/ ml 浓度 PGE促进 Ca吸收 ,10,100ng/ ml 浓度 PGE促进 Ca释 2 2 放 。结论 : PGE在骨钙代谢中的作用与其局部浓度有关 。2 [ 关键词 ] PGE; 钙 ; 骨器官2 () [ 文章编号 1005 - 2593 200103 - 0192 - 03 [ 中图号 R780. 2 [ 文献标识码 A () [ 牙体牙髓牙周病学杂志 ,2001 ,11 3:192 The effect of PGEon the calcium meta bolism of cultured rat calvaria 2 L I Qiang , SHI J un - nan , WANG Xin - yuan , et al ( )College of Stomatology , The Fourth Military Medical University , Xi ’an 710032 , China Abstract AIM :To observe the Ca metabolism in cultured rat calvaria treated with PGE. METHODS :Microele2 2 ment examination was carried out on the conditioned media . RESUL TS : Ca raleasing from bone will take place when the PGEconcentration was at 10,100ng/ ml . Ca resorption of bone will take place when the PGEconcentration was at 0. 01, 2 2 0. 1ng/ ml . CO NCL USIO N :The effect of PGEon bone Ca metabolism is associaed with its local concentrations. 2 Key words PGE; Ca ; Calvaria 2 () Chinese Journal of Conservative Dentistry , 2001 ,11 3:192 1. 2 方法 ( ) 前列腺素 EProstaglandin E, PGE是重要的 2 2 2 1. 2. 1 分组 炎症介质 , 钙是骨中无机物的主要成分 。研究证 PGE组 :分为 0. 01 、0. 1 、1. 0 、10 、100ng/ ml 共 5 个浓度 2 ( 实 , PGE对 骨 上 清 中 碱 性 磷 酸 酶 Alakline phos2 2 组 ,用 MGJ 培养基配至终浓度 。 b 1 ) phatase , ALP活性的作用与其浓度相关。以往 对照组 :MGJ 培养基 。b 45 的研究多采用Ca 掺入法观察骨组织培养中钙代 1. 2. 2 头盖骨制备 2 ,3 2 + 谢的变化,本组采用 MGJ 低 Ca培养基培养 b 处死仔鼠 ,无菌条件下剪 开 头 皮 , 沿 最 大 径 摘 除 头 盖 的鼠头盖骨方法 , 微量元素测定法测定培养基中 骨 ,仔细刮除骨片上软组织和骨膜 ,每块骨的表面 积 约 为 2 + 2 ( Ca浓度的变化 ,探讨 PGE在骨钙代谢中的作用 。 0. 25cm, 称 重 , 置 入 24 孔 培 养 板 , 加 入 MGJ 培 养 基 含 b 2 μ 100U/ ml 青霉素 ,100孵箱 ,g/ ml 链霉素 2ml ,然后置入 CO2 1 材料和方法 5 %CO、37 ?培养 。24h 后换液 ,在实验组加入不同终浓度 2 PGE的 MGJ 培养液 2ml 。分别于 2 、5d 取出培养液 0. 1ml , 2 b - 20 ?保存 ,待测 。 材料 1. 1 1. 2. 3 检测 ( ) PGESigma ,美国为纯化产物 ,24 孔培养 板 , SD 大 鼠 2 用日 立 180 - 80 ZEEMAN 原 子 吸 收 分 光 光 度 计 检 测 () ( ) (仔鼠 1,3d第四军医大学动物中心,MGJ 培养基 Sig2 b 2 + 0. 1ml上清液中 Ca浓度 。 ) ( ma ,美国 ;日立 180,80ZEEMAN 原子吸收分光光度计 日 2 + 0, 2d 、2 , 5d 培 养 基 Ca浓 度 测 出 后 , 由 下 式 确 定 ) 本。 2 + 4 ( ) Ca的释放率 T %: 收稿日期 :2000 - 10 - 26 ;修回日期 :2001 - 03 - 21 () 作者简介 :李强 1963,, 男 , 汉族 , 河南籍 。博士 , 主治医师 、 2 + 2 + ( ) () 2,5dCa- 0,2dCa讲师 钙离子释放率 % = 2 +( ) 0,2dCa ()牙体牙髓牙周病学杂志 2001 年 5 月第 11 卷第 3 期 总第 43 期 Chinese Journal of Conservative Dentistry ,2001 May. Vol . 11 No . 3 ?193 ? 2 + 2 + ( ) 实验组 Ca释放率 T %与对照组 Ca释放浓度 PGE具有明显的骨吸收活性 ,与上述是吻合 2 37 ( ) 。统计分 率 C %之间的差异定为骨吸收活性 认为 100ng/ ml 浓度的 PGE 对体的 。史风琴等2 析为方差分析 。外分离的破骨细胞所形成的吸收陷窝数和陷窝面 积有抑制作用 ,证明高浓度 PGE对成熟的破骨细 2 ()2 结果 图 1 胞有直接抑制作用 。本组 100ng/ ml 浓度 PGE促 2 进骨吸收 ,二者结果差异的原因可能是实验方法的 不同 。前者采用的是皮质骨加体外分离的破骨细 胞 。本组采用活的完整的骨组织培养 ,更接近于生 8 物 体 内 环 境 。Miyauchi 等证 实 鼠 龈 沟 中 给 予 () PGE0 . 01,1 . 0mg/ ml,出现剂量依赖的牙周膜相 2 对应的牙槽骨边缘破骨细胞数和吸收的骨凹面破 骨细 胞 前 体 细 胞 数 增 加 。因 此 , 我 们 认 为 10 , 100ng/ ml 浓度 PGE的骨吸收作用是通过其活化和 2 增加了培养骨组织中的破骨细胞来实现的 。 最近的研究指出 :主导地位的靶细胞不是成熟 图 1 PGE对骨器官培养钙代谢的影响 2 9 的骨细胞 ,而是其前体细胞。成骨细胞为破骨细 从图 1 可见 , PGE对培养骨组织钙代谢的作 2 胞形成所必需 ,PGE可直接抑制破骨细胞 ,证实了 (2 ) 用依赖其浓度 ,高浓度 10,100ng/ ml促进骨释放 2 + 2 + 成骨细胞上有特异性 PGE受体 。骨中的 PGE主 (2 2 ) Ca,低浓度 0 . 01,0 . 1ng/ ml促进骨吸收 Ca。 要由成骨细胞产生 ,而成骨细胞产生的 PG 有复杂 3 讨论 的双向作用 ,即骨吸收和形成可能依赖于局部 PG () 浓度 ,这可以解释低浓度 PGE0 . 01,0 . 1ng/ ml的 2 生理状况下骨组织通过成骨细胞 、破骨细胞作 骨形成作用 。用而不断地改建 。骨形成 、吸收的重要标志为钙代 2 + 2 +谢 。Ca释放量的增加说明有骨的吸收 , 而 Ca 吸收表明了成骨作用 。因此 ,检测骨组织培养上清参考文献 : 2 + 2 + 中 Ca含量 ,可以了解骨器官 Ca的代谢 ,继而了 2 + 1 解成骨或破骨 。多年以来 , 人们对骨 Ca代谢的 李强 ,史俊南 ,王鑫源 ,等 . PGE对鼠头盖菌培养上清 2 45 中 ALP 活 性 的 作 用 J . 牙 体 牙 髓 牙 周 病 学 杂 志 , 研究多采用Ca 掺入法 ,用放射免疫检测获得微量 2 + () 2000 ,10 2:71 钙代谢的信息 。本组采用 MGJ 低 Ca培养基培 b 2 + 2 David L , Cochran , Cheryl AR. The effect of conditioned 养仔鼠头盖骨 ,微量元素检测培养上清中 Ca含 medium from connective tissue fibroblasts and epithelium on 量 ,以了解 PGE在培养仔鼠头盖骨钙代谢中的作 2 用 。日立 180,80ZEEMAN 原子吸收分光光度计可 calcium release from mouse calvarial organ culture J . - 9测出 10 mol/ L 级离子浓度 ,有较高的灵敏度 。仔 Aach Oral Biol ,1993 ,38 :61 鼠头盖骨的代谢是成骨大于破骨 ,因此本组采用常 α 3 Wang CY , Stashenko P. The role of interleukin - 1 in the 2 + 用的 MGJ 低 Ca培 养 基 , 无 血 清 培 养 仔 鼠 头 盖 b pathogenesis of periapical bone destruction in the rat model 骨 。结果证明此法是可行的 。 system J . Oral Microbial Immunol ,1993 ,8 :50 PGE是一种骨吸收因子 , 具有广泛的生物学 2 4 Hausmann E , Raisz Lg , Miller WA , et al . Endotoxin : 活性 ,在骨中主要由成骨细胞产生 ,已证明 PGE与 2 stimulation of bone resorption in tissue culture J . Sci 2 炎症的整个过程相关 ,如增加血管的通透性 、炎细 ence ,1970 ,168 :862 5 胞的趋化性 、疼痛 、骨吸收等。在完整的骨中 ,前 5 Cohen J S , Reader A , Fertel R , et al . A radioimmunoassay ( ) 列腺素 PG通过破骨细胞增加骨吸收是间接的 , determination of concentration of prostaglandins Eand Fin 2 2 成骨细胞可能起主要作用 。PG 能增高骨细胞环磷 painful and asymptomatic human dental pulps J . J En 2 () 酸腺苷 cAMP水平 ,从而解除了 PG 对破骨细胞的 dodont ,1985 ,11 :330 抑制作用 ,导致成骨细胞刺激破骨细胞的能动性 , 6 6 Chambers TJ , McSheehy PMJ , Thomson BM , et al . The ef2 活化破骨细胞而致骨吸收。本组 10 ,100ng/ ml fect of calcium - regulating hormones and prostaglandin on bone resorption by osteoclasts disaggregated from neonatal rabbit bone J . Endocrinology ,1985 ,116 :234 7 史风琴 ,于世风. 牙周炎牙槽骨吸收的基础研究 ——— Histometic analysis J . J Periodontol ,1992 ,63 :405 现代口腔医 9 Rouleau MF , Mitchell J , Goltaman D. In vivo distribution PGE对破骨细胞性骨吸收的作用 J . 2 () 学杂志 , 1993 ,7 1:4 of parathyoid hormone receptors in bone : evidence that a predominant osseous target cell is not the mature osteoblast 8 Miyauchi M , Ijuhin N , Nakai H , et al . Effect of exoge2 J . Endocrinology ,1988 ,123 :187 nously applied prostaglandin Eon alveolar bone loss ——— 2 1 382 名农村小学生龋病调查 马国强 ()市第二医院 , 浙江 金华 311016 [ 关键词 ] 农村 ; 小学生 ; 龋病 () 200103 - 0194 - 01 [ 中图号 R781. 1 [ 文献标识码 E [ 文章编号 1005 - 2593 为了解本地区农村小学生替牙时期龋病发病情况 ,于 3 1 382 名受检者不同性别患龋情况 表 1999 年下半年对 1 382 名在校学生进行了口腔检查 , 现报 性别 受检人数 患龋人数 患龋牙数 患龋率 患龋者龋均 受检者龋均 658 366 1127 55. 62 3. 08 1. 71 男 告如下 。 724 423 1317 58. 43 3. 11 1. 84 女 P > 0. 05 1 调查对象 4 讨论 10 所乡村学校 7,12 岁小学生 ,共 1 382 金华市乾西乡 本组显示 ,本地区 7,12 岁农村儿童的总患龋率 名 ,其中男 658 名 ,女 724 名 。 为 57. 09 % , 患 龋 者 龋 均 为 3. 10 , 明 显 高 于 国 内 平 均 水 12 平,但与周宇翔等的报告接近。各年龄间相比 , 7 , 82 调查方法 岁时的患龋率和龋均已达峰值 ,9 岁以后 ,患龋率和龋均逐 - 牙周病全国统计调查表》进行检查 。自 按《龋病 渐下降 ,8 岁年龄组患龋率与 9 岁年龄组间有显著性差异 然光线下采用口镜 、镊子 、探针对受检者牙齿逐个 进 行 检 ( ( ) P < 0. 05,与 10 岁以后年龄组相比有极显著性差异 P < 查 。主要依靠视诊和探诊 ,未作 X 线片检查 。乳恒牙的龋 ) 0. 01,表明替牙时期的患龋率是随年龄增长而下降的 。 恒失补均作为龋齿 。整个过程由笔者一人完成 。 牙的患龋率也随年龄增长而升高 。其中对六龄牙的 保护在青少年当中极为缺乏 ,应当给予足够的重视 。 乳牙 龋的发生以乳磨牙为主 ,下颌患龋率明显高于上 ()3 调查结果 表 1 、2 、3 3 颌 ,均明显高于国内一般资料。乳牙龋的好发牙位排序 : 表 1 1 382 名小学生各年龄组患龋情况 下颌乳磨牙 、上颌乳磨牙 、上颌乳切牙 、下颌乳切牙 、上颌乳 4 年龄 受检 患龋 患龋 患龋者 受检者 尖牙 ,不同于其它资料。 患龋率 ()岁 人数 人数 牙数 龋均 龋均 ()()229 173 1 671 1 75. 81 3. 88 2. 93 7, ?()()238 193 6 722 11 3. 74 3. 03 8,81. 09 ()()?248 178 12 523 20 2. 94 2. 11 9, 71. 77 ??()()211 107 17 232 31 2. 17 1. 10 10,50. 71 参考文献 : ()()??271 78 26 123 49 1. 58 0. 45 11, 28. 78 ()()??185 60 37 173 72 2. 88 0. 94 12, 32. 43 1 黄婉蓉 ,主编. 口腔内科学 M . 北京 :人民卫生出版 ()()1382 57. 09 3. 10 1. 77 789 99 2444 184 合计 社 ,1986. 161 注 : ?括号内为恒牙 ; ??与 ?: P < 0. 05 , ?与 ??: P < 0. 01 周宇翔 ,陈卓 ,张宪 ,等 . 替牙期儿童龋病情况调查分 2 () 析 J . 牙体牙髓牙周病学杂志 ,1999 ,9 3:247 表 2 2 260 个乳牙龋的牙位分部 杨是 ,石四箴 ,主编 . 口腔预防医学及儿童口腔医学 55 ,65 54 ,64 53 ,63 52 ,小62 计 5715 , 6,81 5 74 ,84 73 ,83 72 ,小82 计 71 ,81 3 M . 第 2 版 . 北京 :人民卫生出版社 ,1997. 85 患龋牙数49 7 3555 48 59 964 728 5437 12 6 129 6岳松龄 ,主编. 口腔内科学 M . 第 2 版 . 北京 :人民 % 21 9.9 15 7.1 0. 22 2 .12 2. 61 42 .65 32 .21 24 .03 0. 31 0 .53 0. 27 57 .35 卫生出版社 ,1989. 84 4 P < 0. 01 收稿日期 :2000 - 08 - 27