SC 1093-2007 黄喉拟水龟8960
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65.150
黯
1093-2007
12 … 18 2008-03…如
布
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蹲在
牛二
的第 4 章:为强制性的,其余为推荐性的。
本标准命的附录 A、附录 B 为资料性附录,附:去 C 为
性附录。 本标准出农业部被业局提出。
本标准由全罚水产标准化技术委员会淡水养殖分技术委员会归口。
sc 1 号93-2007
本标准起草单位:农业部水产种质 H在督检验测 M;r??心(广州),中限水产
科学研究院珠江水产研
究所。
本标准斗边草人:朱新平、陈水乐、主塑成洁、刘毅辉、夹在光明
1
如
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sc 1093? 2自07
向阳机4 命币
? 范围
本标准绘的了鼓iifj[:fr~水龟L,vr,α旷'eJn.ys m.utica (Can1or ,
1842) J的主要形态构造特征、生长与繁殖、遗
传学特饺及检测:方法。
本标准运用}黄II侯拟水龟的种质检tm~与鉴定。
2 规范性引
F列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款a 凡必注目期的引用义件,其挂在后所有
的修改单〈不包括勘误的内容〉互l(i~LJ般均不滔用于本杯i管'.'然而,鼓励根据本标准达成
的各方研究
生可使府这些文件的最新版本。凡是不往日期的引用义f牛其主最新版本适肘子本标准。
GB/了 18654. 1 养藏结茨科质检验第 1 部分 z被驳
GBj丁 18651.2 养殖鱼类科质检骏第 2 部分.
Gflë T 18654.12 养殖鱼类种质检除第 12 部分?染色体组M分析
-
qJqd
隅ys mutica 时时, 1842)J
3.2
辛苦索动物 1;1 CChordata) 、脊椎动物亚门 CSu均勾七rm vcrtebrata人爬行纲 (ReptiJi川、龟鳖吕门、l.:::15t1]
d阳üa) 、淡水龟科 (??ataguridae) 、拟7l(龟黑 C1Waurem..y心 ο
4
4. 1
4. 1. 1 形态性状
体;呈长椭圆形,前部国各窄、部路究,中部积内 j出 G 头中等大,吻较尖突,上领小央其缺刽街头背光滑
@鼓胶圆形。背号lflj苦读蜂起,有 3 条纵棱,咱,~起1'1:;t鳞
棱电Jj号在.而侧脊棱较弱。主提照较小呈长方形,臀j雷
在最后缘形成尖突c 且复印较大, 11峪勺背甲之长相等,喉j市前辈辈稍内山;月工辈革形成深的三叙芳,缺主??; 甲
桥明握。凶股后才橱,前肢 5 爪,后肢 4 爪,击昌、地 i注IJ11金2菜。头倒 n 眼后至室主膜 L:方有?条窄的黄色纵
纹,头背及两侧;被才觉色或棕色号背 rp 、 u丑胶外侧1ft.尾背为棕黄色、褐位或棕然也。背 i手各盾片 lëlJ~逢为黑
色:头的!l!盖面、四肢内倒、腹吁1 、淫的跤面及裸露皮肤部分均为榕黄色或者是黄色,接甲各盾片上共对称的
棕黑也王军坟。成龟燎怀腹原烟喝雄性沿股市中线儿纵F日陷;成年娥危个
体大于j司自告牌fH色。
外部形态1]1. ~哥儿摊、雄势、1麦丽~W. 见罔 2 ??.
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4. 1.2 可数性状
4. 1.2 1 背'fl
颈盾: 1 枚。
中拉盾 :5 枚。
肋!蛮 :8 枚,左右各 4
辈革盾 !22 枚,左右各 11 枚。
臀脐 :2 枚,东右各 1 枚c 4. 1 2 2
照照 :2 枚,左右各 1 枚。 放詹 :2 枚,左右各 1 枚。
附庸 :2 枚,放右各 1 枚。 腹盾 :2 枚,在司有各 1 枚口 股盾 2 枚咆左右各 1 枚。 航盾 :2 枚,在七各 1 枚。
4. 1 2 3 'fl桥
且在盾 :2 枚,大有各 i 枚。
2
留 i
思 2 、腹克(告费右?}
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sc 1093 ?7
:2 枚,东右手平[枚。
;\,1, 注,各部位说明参见附录
4. 1.3
样才区范围 z雌龟体重: J? g~~ 1 160 g,平均 825.9 g 士 16 1. 0 g; 背Ifl民 mm;'--'204 mm~ .s ι 均
174.2mm士 13.0 mm; 背申发 102 mm~o144 mm. 平均 124.8 mm 土 1 1. 0 m白。雄也体重: 600 g~
1980 g.平均 1 267.4 g 士 319.4 部背甲长 161 mm~245 mm,平均 205.3 血m工 20.;] mm; 好甲宽
110 mm~~I 751丑rn,平均 144.1 mm牛 14.1 mmo 背甲 t乏与各7可靠主性状的比例见表 10
主七 倒
普原宽/背仁Pf三 0 , 72
3号;骂 f背甲长
腹fjl 沃/背币 1主
?一一一一-…甲一-?一一…… 一一?一一……E呈阳后半部长/背市长
2草原 àtI干部宽/背甲长
拉:各可量供校说明参Jil!.附录A. 2.
4.2
主韭 龟
施围
口.74户--0 , 66
轧生i俨-0.32
心JlJt具有静脉窦.&二心!若一一心窄,心寒 j与其不完全的分限,)
窍不完全双循环;肺为海绵状,两E十 ;flf
两ut;肾]对;消化道儿育膀:雌雄异体乡雄性亵丸 1 对,有交院iI~,雌性
卵巢 i 对。
户d
5 1
5.2
2竟做拟水龟;不同年龄组~测平均背Ifl氏、背 rp 2,
、宽和实测体重重
51 6-
16. JR工1. 6;7 I 17.59* 1. 95
3
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sc 1 自93--2007
5.2. 1 '性成熟年龄
雌、直在龟件成熟年龄地为 5+龄。
5. 2. 2
每年 4 JJ ~8 月,其小 5 月 ----6 月 ;)J高峰期。
5.23 产那类型
一年多次产卵。
5.24
每头i鲜豆角A每年产1. j黯 ~--4 ??号,一般 2 沟---<1 衍 l 枚/
衍C-~9 枚/衍,平均 3 枚/
525 孵化时间与孵化滋j度
孵化时间见表 3
?
6. 1
体细胞染色体数 2n=52 o ë陈~公式, A十另十Cι9一? 5- 1.~~;染色体
将数(NFJ , 7口,黄~侯tU7]d乱染
色体组型见孩I :3, A 组为中部著丝点染i3f丰(r世〉和叹'??部辛苦丝点染色体 (S;1); 1号主巨为\lJi.端部染色体
(ST)和靖部着绘点(丁) ; (二;在为微小染色体 (111) 0
J飞 立在
露 恶毒 戴辛
R 撞撞 品
啪锣牺伊
毒器 感趣事 草草草前最棒信奉普钱嚼 4在晦向 C
4如附 4辛辛如 #毒罩主 #鲁晓 唱也在酶
5 f.Ln:
3 黄喉拟水龟染色体组型军军
6. 2
技拟7/(龟!JT组织乳酸:脱氧酶 (LDl!) I司土耳草也泳郎和扫拍照见段14 , fp]工瞬硝带相对迁移京见
表 4 楼时提拟7l<龟肝组织乳酸脱室主德 (LI月1) 向二E隧榄带榕对
迁移王军
4
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7 检测方法
7. 1
+
4 黄眼拟水龟E干组织乳酸册,氨酶(LDH) 向工酶电泳扫描图
按 GBìT 1吕 65 ,1. 2 的
执行。
7.2 性状测定
sc 1093-2007
根据龟外部形态小的可数性状及可崖;性状进行ëjW王军,其可数、可量件状的测定参JJI.附录 A ,
7.3
根据龟背i:p l布是互助盾的同心致密窄限,戒线路上的 L J)豆豆女街纹进行!鉴定每一个问心致街窄
园或 L形致密纹为必。
7.4 染急你的检ili!J
10 g 体主甜蜜给龟2草除射植物戚球凝聚宣言(1'技A) ,处理 以
2.1 h ,以 5μgë g._.6μ吕/g 体重开IJ
法腹腔内?牛耳;秋水仙素, 3.5 h 后写议将且在. O. 037 5 moU L KClj
廷渗 15 I Iliw-,, 20 min 0 氏 CCarnoy's)
F引发被(甲醇 , ëJ](附:骏=3: 1)回应。染色体标本的制片、染色和计数按心日ëT 18654.12 的~X)??执行。
龟豆花色体的核均i模式投以下杯横排列 :A 为中苦;若主主点染色体(M)和亚牛部容主主点染色体飞SM);B
生日为端?骂着纹,点(T)和收端部染色体CST) ;C 级为微小染色体(m) 。皮子敛小染f主体太小.在统计染色
体字字数时,.1己为1,
7.5 肝组织乳酸脱室主酶酶潜
7. 5. 1
耳注目于组织 1.0 筐,放入离心管 .4;C冰箱保存。每个样品取 0.'1 g.1JIl 0.1 rnol! L , pH=7. 2 磷酸绞叫:
液(兑附录仁川 1 600μL唔加 4? μL5%皮糖挥手持益,冰浴条作 F fiJ F靡,全部研潜f>半后ìJi??人离心管,在
14 日在o r/ 江山条件下 ,1.1 0(;冷冻;吕奇心立o rmn,且iU二 ~t号液絮于?归?冰箱保手J'条用 c
7. 5. 2
出'1.5%分离校在12.5%浓缩胶制成聚丙烯攒胶垂直板、寄去胶口各科凝胶制备溶液配方兑毒是C. 1 ,旨是
胶制备商己方见表 C.2 0
7.53
在七下电级摆'1'分别加入上、问曹?时提缓冲j:ìlt (1)1.附录c. 3) ,1!X样品上1击波 JOO fJ日泊%首:价
50 ,uL 和 0.05%漠酸在在 10 fJ-L ,说匀JiiJfJ滋垒注射榕;j',é;、阪总(8 f1L 注入点样子L中乡背于 4飞:冰箱,在稳压
。
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自c 1093-2?7
220 V 条件下进行咆泳,至涣驾 r;战指示剂到下槽玻璃…r~~LL:o 7ι5 , 4
染色斗寄电泳胶放;人预先制经好的染色浓 (IJ~ 附录C. 4) 中, :,日OC
温条件 r染色 3日出口---, 45 min ,
E在得到清晰的梅带 i扎
褪色户在 2.5%的冰踏~爱中褪色至Jrë:极清晰、透明 o 扫描:透明后巨1I ;iiú凶扫描仪X.J褪在H立的凝胶进行扫描、保存。
3 检验规则与结巢判定
按 G??/ T 1865 ,1. 1 的规定执行。
d
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附录 A
Al 数怯状
2
颈{盾:椎照方嵌予左右辈辈f言之间的一块小照片 9
椎病 z 背LfI应中的 i 列照片;
f劝Jì'??' : 1情詹左右两侧与左右缘盾之间的 2 列宽大的盾
片;
去是历:背 rp左右边缘 2 歹u较小的盾片:
臀j露:背 rp后辈革正中的 i 到缘盾;
瞧!首:!装甲f在前辈辈夜中央的盾片;
自主盾:自侯盾和胸痛之间的黯片;
1萨dI常 z胶盾;在1腹盾之间的后汁.
庄重盾 :??在j盾和日j段JF??'之间的盾片;
股股:J反盾和盾之间的盾片,
胚的??:腹甲后泌的盾片;
3夜f首.面j胳腋凹的Fυ片;
月号!雷: ì茧l胳躇凹的黯片。
1背甲长背甲的最大丰线长度;
甲觉:背甲她最大攻线宽度,
骂:腹 IV与背甲之间的最大直线高度;
腹部长 :ft支串的;最大φ直线长&;
腹 rp后半部长:It是甲膀j首王三臀)泞的缕的工医育最大室线长度 z
E草申 lru半部究:腹巾被盾J??守最大;直线宽度;
旗号1后半部前宽3腹盾与股脑接合处直线宽度; 2支甲半部后觉2股fE;13月[盾接合处立线宽度;
1于1桥民二:腋j言到腾f泞的线长度; E挟厨宽,峨的最大直线宽度;
喉质量堂长?收1市中缝;直线长EEp 且主盾缝长:J!金庸中缝J'??线袄度; 2句的缝长 :H句 f市中缝直线长:
腹盾辈革长:腹届中缝线妖度 g
段;需主量民 2股后缝3至线长fft :
且L后缝长 2月丁年!i雪中缝豆豆线长度。
sc 1自??
7
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sc 1093 2007
附录 B
{资料性附录}
8. 1 体重量、背'Il长和营'Il
8. 2
8
式中
\Vt~ =15. 3?7eo,6<;9<-,j (1; -'0. 90 f1 G) ..........,....
目。;;..,.,. (B. 1)
LI =4. ~~?6 吕?川 (r-O. 990 9) ….....……. (B. 2)
W; - 3. 589 3'1咐阳。 (r-O. 988 r:) ...... ...... ….. ‘(丑
3)
料 n 龄衬龟体重.单佼为克(g);
L, 一-t 酋?对龟背甲长。单位主j毫/K- (mm); W; t 龄时龟背印究,单ìi7:为主重米 (mm) 。
T-f乱的;f.i!击,龄。
甲 'Il
W; 口号. 201 7 L川 J0 Cr=C ?9R :jl …目...号。目............ (旦,
4)
L,=l. 040 二百Ti2 r) ~9 3 (r-O ‘ 999) ………. ...................
m.5)
王立巾:
\V t1 t ??古拉j 龟体重,单位为克 (g) ; 1. 1_ 一一…4 龄时龟背市长 p单为毫米(mm) ,
W; - t 龄时il1背'Il宽,单位为毫未 (mrn) ;
7 … 鼠的吓龄,龄。
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sc 1093-2白白7
附录 C
i规荡性附录)
同:ζ器靠各种试剂的配和j
c. 1 磷酸缓冲液{自 1 mol/L 幻的就制
磷酸缓冲乎在出 A液和 b液续 72 :泌的比例浪含而成,现院现用 υ C 11 A 液(0.1 mol/ L. NιleHPO,)院制:取 18.30 g 含一个结品7}:的磷酸氢二锅(Na2HP01 ?? H,())
容于 1 ?o mL 蒸馆7其中,或取 35.82 g 1奇两个结品水的磷酸氢一锅 CNa, HP04 ?? 2江,())定容
1000 mL惹恼水小,即成。
C. 1.2 Bëi夜 (0. 1 mol/ NaH月 Po.,)扼制.欲 18. 吕o g 含一个结晶水的谈酸二室主纳 (]\aH, po.l' 0)
定容于 1000 mL 蒸馆水中,或取 15. 创 g f于两个结品水的磷做工氧纳 (NaH, PC\ ?? 2日,, 0) j:主容
1000 mI 蒸饱水中,即成。
C. 2 凝胶制备
C 2 1
各种凝胶树得溶液p1j己h3i,表C. L
C. l
;奋 在主 自己靠自方法
i 取 Tris 悦. 7S g 古IT 20C mL蒸馈7/( , J召浓I 51 幸在校援冲液
盐酸夜 pIl J.J 8 弘力I~~锚水1iTI1 2~O raL
问疑ti~-1何液 [取丙烯f在黯 93. 7~ g , f\, 只'-~巨甲慕双内;涂改胶 2. 50 区好?蒸媲1;j(中。EE辛辛到 2巳OmL
I AP I J在过就被接 17..') 吨,溶幸V? :ìilJ 10 mL 水Ij-l
写马胶生〔岳王?Jj!( T王三石,加品百豆再豆,浓革雨声玉 6.7 , lln豆高忑如o 1三百二一
2 2 分离胶和浓缩般的制在哥
汹 7.5%分离胶和12.5%浓缩胶制成聚丙;悔自古胶禁药:板胶。凝lYii'm过备配方见;只c. Z.
7.5%分离胶
分离胶缓j中液萝u.L 凝胶{r昌液,严I. AP , uL τEMElJ(N ,氏, FJI 略了?阿甲基乙二黯)步,,[
全电JJιμI.
总f本积, μL
C. 3
表C. 2
2.5瓦浓结跤
51盯
3000
625
33G
!??'l.i'&缓冲;夜分上槽屯恢缀冲浪母液和[下槽电极喜爱
冲液 f;J:梭,也泳时分别辛苦1释 l?? 倍辛苦 5 俗,其自己方
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$主唱 1093-2007
见点c. ;) 0
楼
上槽电极吉普叫。ëili Ji士被
被
pH…R. 3C电:在日才稀释 10 倍)
;、 1密电极左置冲在E母贯主(电泳H才稀释 l〉悄〕
C4 同工酶染色液的配制
C3 电极缓;中液章并j备
i 巳 111l方法
I J取 T,.i只 6 , 00 g 甘幸在辈辈 28, 80 g.J??蒸销*定王军至lJ ] OOO .êëlL
I ~呈 ris tiι7G g加 200m!.)};: 用浓放酸腮 pH J:r 8, 9 , 如l蒸母露水到 2巳OmL
先配制染色地各烧;夜见袁{二.生,再配制j染色浓见表已几
C4 染色用
荒草 在是 配制方法
1. 2) mnL/ L TrIs--HCl 染 ??.缓冲液 (pH~ 罪(Tris 18[ ‘ 71 g 7容于此 1 时,蒸锵/其中罗网鼓酸苦苦节至 p旦为立 5. 再月
9, 5) 菜馆水稀辛辛到 1 Cf)O rnL
j氯化石自基因氮~\~\军 (N??T)
问)嚓甲黯硫酸盐
乳酸统
1C
浓 ?5ü mg :\'BT溶于 250mL蒸烧水中 34 , 5 mg 济1' 1? mL 蒸惚水吁:
i 垠 203.76叫…呵*混合用…节问
7 , O.再用蒸f窗水定容到 1000 mL