几种类型的缺氧及外界因素对缺氧耐受性的影响及苁蓉益肾颗粒(中药)的药理作用

几种类型的缺氧及外界因素对缺氧耐受性的影响及苁蓉益肾颗粒(中药)的药理作用 缺 氧 中山医学院 04级16班 小组成员: 张宁锋 韩光 周惠玲 陈少谦 几种类型的缺氧及外界因素对缺氧耐受性的影响及苁蓉益肾颗粒(中药)的药理作用 一、几种类型的缺氧 目的要求 1、在动物身上复制缺氧性、血液性、组织中毒性缺氧，以了解各种类型缺氧对机体影响及其现特点。 2、观察缺氧时动物的一般情况，体温，呼吸和内脏血液颜色的变化。 实验动物:小白鼠(五只) 药品与器材 钠石灰(NaOH?CaO)，甲酸，浓硫酸，5%亚硝酸钠，1%美兰，0.1%氰化钾，生理盐水，柠檬酸钠抗凝剂。小白鼠缺氧瓶(100-125ml带塞锥形瓶或广口瓶)，CO发生装置。广口瓶，5ml和2ml刻度吸管，lml注射器，酒精灯，剪刀，锤子。(一氧化碳气体,可以用分液漏斗和烧瓶.烧瓶中装浓硫酸,分液漏斗中装甲酸(或草酸).将浓硫酸加热至有雾产生时,调整分液漏斗慢慢滴加甲酸即可.)体温计 实验步骤与观察 1、缺氧性缺氧 (1)取钠石灰少许(约5克)及成年小白鼠一只放入缺氧瓶内，观察动物的一般情况，呼吸频率、深度、皮肤和口唇的颜色，然后塞紧瓶塞，记录时间，观察动物缺氧后的表现与正常有何不同，直到动物死亡为止。记录死亡时间。 (2)用注射器抽取小鼠血液1ml于小试管中(预加少许柠檬酸钠抗凝剂)做好记号等待D二聚体(是否出现DIC)，再打开其腹腔，比较血液和内脏的颜色。 2、一氧化碳中毒性缺氧 (1)装好CO发生装置 (2)将小白鼠一只放入广口瓶中，观察其正常表现，然后与CO发生装置连接。 (3)取甲酸3ml放入试管内，加入浓硫酸2ml,塞紧,若CO产生不足，可用酒精灯在试验管底部加热，加速CO的产生，但不可以过热至液体沸腾，以防试管爆炸或CO产生过多过快，动物死亡。 (4)观察指标与方法同上。 3、亚硝酸钠中毒性缺氧 (1)取体重相近的两只小白鼠，观察正常表现后，向腹腔注入5%亚硝酸钠0.3ml，其中一只注入亚硝酸钠后，立即再向腹腔内注入1%美兰溶液0.3ml，另一只再注入生理盐水0.3ml。 (2)观察指标与方法同上，比较两鼠表现及死亡时间有无差异。 4、氰化钾中毒性缺氧 (1)取小白鼠一只，观察正常表现后，腹腔注射0.1%氰化钾0.2ml。 (2)观察指标同上。 5.观察在缺氧的情况下，体内应急系统对生存的影响。 药品:乙醚 小白鼠缺氧瓶 1 将乙醚放入缺氧瓶中，不塞紧瓶塞，观察小白鼠的清醒时间。如超过10分钟则停止观察。 2 将用昏迷的小白鼠做缺氧性缺氧实验。并与实验1 比较，观察应急反应对小白鼠生存时 间的影响。 注意事项 1、缺氧瓶一定要密闭，可用凡士林油涂在瓶塞边缘。 2、小白鼠腹腔注射，应稍靠左下腹，勿损伤肝脏，也应避免将药液注入肠腔及膀胱内。 3、氰化钾有剧毒，应妥善保存，使用时勿沾染皮肤、粘膜、特别是破损处，实验后将物品洗干净。 二、影响缺氧耐受性的因素 目的要求 观察神经系统机能状态的改变，外界环境温度的变化，以及CO浓度的增高对缺氧耐受性的影响。了解条件因素在缺氧发病中的重要性，以及临床应用冬眠和低温治疗的实用意义。 实验动物:小白鼠(八只) 药品与器材 1%普鲁卡因，0.25%氯丙嗪，生理盐水，钠石灰，碎冰块。 小白鼠缺氧瓶，温度计，粗天平，剪刀，镊子，注射器、 实验步骤与观察 1、环境温度变化对缺氧耐受性影响 (l)取小白鼠缺氧瓶三个。各放入钠石灰少许。 (2)取500m1烧杯(或小搪瓷盆)二个，一个加碎冰块和冷水、将其水温调到0?-4?，另一个加入热水，其温度调到40-42?。 (3)取体重相近的小白鼠三只，称重后，分别装入缺氧瓶内，另一只置于室温中，瓶塞盖紧后开始计时。 (4)持续观察各鼠在瓶中的活动情况，待小鼠死亡后，计算存活时间。比较三只小白鼠表现及死亡时间有无差异。 2、神经系统机能状态不同对缺氧耐受性的影响 (1)取体重相近的小白鼠三只 甲鼠:腹腔注射咖啡因0.1m1/10克体重。 乙鼠:腹腔注射0.25%氯丙嗪0.1ml/10g体重 . 丙鼠:腹腔注射0.25%生理盐水0.1ml/10g体重。 (2)约15-20分钟后，将三只小白鼠分别放入有钠石灰的缺氧瓶内，密闭后开始计算存活时间。比较三只小白鼠有何差异。 3(CO浓度的增高对缺氧耐受性影响 取小白鼠缺氧瓶两个，其中一个加入一定量的co(用上述装置制备即可) 取体重相近的小白鼠两只，称重后分别装入缺氧瓶中，瓶塞盖紧后开始计时。 持续观察各鼠在瓶中的活动情况，待小鼠死亡后，计算存活时间。比较两只小白鼠表现及死亡时间有无差异。 三、苁蓉益肾颗粒对常压，低压缺氧条件小鼠存活时间和心肌耗氧量影响 目的要求:观察苁蓉益肾颗粒对常压缺氧条件小鼠存活时间和心肌耗氧量影响 实验动物:健康成年小鼠 药品与器材 苁蓉益肾颗粒,内蒙古兰太药业有限责任公司,批号040825;生理盐水; WCX小鼠氧耗检测仪，减压泵，真空瓶。 实验步骤与观察 1.苁蓉益肾颗粒对常压缺氧条件小鼠存活时间和心肌耗氧量影响。取健康小鼠3只,分别随机分为正常对照(NS)组,苁蓉益肾颗粒高(0.4ml)、低(0.2ml)剂量组(临用前配制成) 。上 述各组均按0. 4 ml/10 g剂量灌胃, bid, 3 d,于末次给药1 h后将小鼠分别置于联结WCX小鼠氧耗检测仪容量为250 ml放有5 g钠石灰的磨口瓶内,密闭观察记录小鼠存活时间和1,5 min氧耗量。 2.苁蓉益肾颗粒对低压缺氧条件小鼠存活时间的影响取健康小鼠3只,分组、给药剂量和方法同上,于末次给药1 h后,分别取小鼠置于密闭耐压玻璃容器中,迅速用减压泵抽气使容器内压维持在560 mmHg,记录小鼠存活时间。 (作为补益药苁蓉益肾颗粒主要有巴戟、肉苁蓉、菟丝子、五味子、茯苓和车前子等7味中药组成,其临床主要药理作用为滋阴壮阳。本实验表明苁蓉益肾颗粒能够明显降低常压条件下小鼠单位时间内心肌的累积耗氧量、分钟时段净耗氧量和小鼠的整体氧耗,延长常压和减压条件下小鼠存活时间,提示该药可能主要是通过抗应激作用降低心肌耗氧,保护缺氧小鼠,这与该复方中肉苁蓉的有关报道较为一致)