树舌灵芝粗提物体外抗肿瘤作用的研究
作者:周忠波~ 马红霞~ 图
力古尔
【摘要】 目的探讨树舌灵芝各溶剂提取物的抗癌
作用。
采用系统溶剂法从树舌灵芝得到一系列提取物~
运用MTT法研究了各提取物对体外培养的人乳癌MCF-7细胞
增殖的影响。结果氯仿提取物对肿瘤细胞的增殖有明显的抑
制作用~其余各层样品抑制作用不明显。结论树舌灵芝抗肿
瘤成分可能在氯仿部分。
【关键词】 树舌灵芝, 氯仿提取物, 抗肿瘤
Study on Antitumor Action of Rude Extracts from Ganoderma lipsiense (Batsch) G. F. Atk. in vitro
Abstract:ObjectiveTo investigate the in vitro antitumor action of the different extracts of different solvents from Ganoderma lipsiense. MethodsAll the extracts were obtained by the technology of
solvent-refining~and MTT method was used to test the cytotoxicity of the extracts on breast cancer of MCF-7 cells.ResultsThe chloroform extract showed the significant antitumor action when compared with the controls~and the others did not show obvious antitumor action .ConclusionThe chloroform extract may contain antitumor components.
Key words:Ganoderma lipsiense, Chloroform
extract, Antitumor
树舌灵芝,平盖灵芝、扁灵芝,Ganoderma lipsiense
(Batsch) G. F. Atk为灵芝属,Ganoderma Karst.,的真菌。
近缘种有层迭灵芝Ganoderma lobatum (Schw.) Atk、有柄
灵芝Ganoderma gibbosum (Nees) Pat等,1,。树舌灵芝性
平~微苦~用于治疗乙型肝炎、食道癌和肺结核,2,。树舌
灵芝抗肿瘤活性的研究屡有报道,3,~但多集中于多糖等水
溶性成分方面。本文应用MTT法,4,研究了树舌灵芝的乙
醇提取物、乙醚提取物、醋酸乙酯提取物、氯仿提取物以及
石油醚提取物对人乳腺癌细胞,MCF-7,存活率的影响。
1 材料与方法
1.1 药材树舌灵芝~购于吉林省延吉市中医药药材公司~经吉林农业大学菌物研究所图力古尔教授鉴定为Ganoderma lipsiense (Batsch) G. F. Atk。粉碎~过40目筛子~备用。
1.2 细胞株人乳癌细胞(MCF-7)~购于吉林省肿瘤医院。
1.3 试剂RPMI 1640培养液,美国Gibco产品,、FCS,小牛血清~杭州四季青生物工程材料有限公司产品,、四甲基偶氮唑盐MTT,Sigma公司产品,、DMSO,二甲基亚砜,、95%乙醇、乙醚、正丁醇、醋酸乙酯、氯仿等,以上均为国产分析纯,。
1.4 仪器旋转蒸发仪、微量移液器、震荡器、酶标仪、CO2恒温培养箱、超净工作台、倒置显微镜、离心机、培养瓶、96孔培养板、液氮罐等。
1.5 方法采用系统溶剂法对预处理后的树舌灵芝粗粉进行提取~减压浓缩提取液~得乙醇、氯仿、乙醚、醋酸乙酯和正丁醇浸膏。
实验设试剂对照组、肿瘤细胞对照组及各种药物的试验组。采用培养的处于对数生长期的MCF-7细胞~调细胞浓度为1×105个/ml~5种受试药终浓度PDD为500~100~50~25~12.5~6.25及3.125 μg/ml~5-Fu终浓度为25 μg/ml。
取肿瘤细胞悬液~每孔100 μl~接种于96孔培养板~次日加受试药物~每孔加药量100 μl~每种剂量3个平行孔。37 ?~5, CO2饱合湿度培养48 h后~再离心弃上清后每孔加MTT20 μl~培养4 h后~每孔加100 μl二甲基亚砜,DMSO,~微量振荡器振荡5 min~置酶标仪上测定各孔在550 nm波长处吸光度值。
抑制率,%,,,1,OD用药组/OD对照组,×100 ,
2 结果
树舌灵芝各溶剂层样品对MCF-7细胞存活率影响见表1,5。
表1 树舌灵芝氯仿提取物对MCF-7细胞的抑制
率,略,
从表1中可看出~树舌灵芝氯仿提取物在体外对MCF-7细胞有较强的抑制作用~当药物浓度1?10和1?50时抑制率可达89.4 %和82.6 %。除氯仿层外~其余各层样品对MCF-7细胞几乎无抑制作用。
表2 树舌灵芝乙醚提取物对MCF-7细胞的抑制率,略,
表3 树舌灵芝乙醇提取物对MCF-7细胞的抑制率,略,
表4 树舌灵芝醋酸乙酯提取物对MCF-7细胞的抑制率,略,
表5 树舌灵芝石油醚提取物对MCF-7细胞的抑制率,略,
3 讨论
本文应用MTT法研究了树舌灵芝的乙醇提取物、乙醚
提取物、醋酸乙酯提取物、氯仿提取物、石油醚提取物在体外对人乳腺癌细胞,MCF-7,的存活率的影响。结果表明氯仿提取物对MCF-7细胞有较强
1抑制作用~其余各层样品抑制作用不明显。肿瘤实际上是细胞增殖失控、分化丧失或细胞异常~抑制增殖循环是目前治疗肿瘤、减少其转移和复发的方向之一。寻求抑制肿瘤细胞增殖的廉价而有效的药物是当前的研究热点。本研究为寻找树舌灵芝抗肿瘤的有效部位~对树舌灵芝进行深入开发奠定了基础。
【参考文献】
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