动物李氏杆菌病

动物李氏杆菌病 拥壹亿憔奇弼 中国兽医条卷L25卷,第L蝴 动?物?李?氏?杆?菌?病 /饿聃苏22.,}中华凡共和国连云港动植物检症局.江苏20) 李氏杆菌病主要是由单棱细胞增多性李氏杆菌 【L~teriamonocytogenes)I起动物的种痰病,其致 死率较高自1926年Murray等首次分离到本病原 体以后,现已呈世界性分布它作为动物致病菌和腐 生植物致病苗而广泛存在于环境中并且已知它与 多种动物的严莺疾病有关.可引起动物不剧粪型的 牵氏杆茁病,如脑膜炎,流产,败血症等:最初,人们 只认为李氏杆菌仅引起动物发病,80年代以米随人 类固食用污染有李氏杆菌的动物性食物而发生李氏 杆菌病,才彻底认识到它还是人的一种食物源性病 原菌,同时也广泛的被人们所戋注=反刍动物的李聂 杆菌病大多数是因为吃了污染李氏杆菌的青贮饲料 而引起的,其疾病的类型已得到确认,但感染的流行 病学和致病机理仍然觖少足够的了解.车文主要就 李氏杆菌的分类及属性,毒力决定因子的羽I定和动 物李氏杆菌病等情况作一概述 1李氏杆菌置 1.1分类最{叮,李氏杆菌属仅有单核细胞增多性 李氏杆菌一个种,之后相继确认了绵羊李氏杆菌(L ivanovii),无害李氏杆菌(L.innocua),成斯梅尔氏李 Pligeri)llj期问曾将默氏李氏杆菌(Lmurrasi)和 格氏李氏杆菌.grayi)也划到本属中l{日最近研究 结果表明,它们是一个独立的特殊的屑默咀砭 属(?urraya)包括格氏默亚里菌格氏亚种?. gras?isubsp.grayi),格氏默里亚苗默氏亚种( grayisubspm”rr) 1.2李氏杆菌的特性李氏杆菌是一种小的,革兰 氏阳性杆菌.长1,m,宽0.m,在某些培养摹上 呈丝状.该菌可在3?,45C温度条件生氏,其最适 温度为30?,37?在pH高达9.6需氧或微需氧 条件下迅速繁殖,在匮氧和pH低于5.6的条件下无 法生长菌落形态为小的,光滑的,微扁平,乳白 色”李氏杆菌属产生过氧化氢酶,V—P试验和七叶 苷水解阳性,不形成吲哚和氧化酶,不水解尿素,不 还原硝酸盐,不液化明腔根据部分生化试验很难区 别李氏杆菌属种,常规鉴定试验见表1_|】 1.3定碴早期试验研究证实,李氏杆菌具有 菌体”0”和鞭毛…H抗原,为此使用超免血清的凝集 和粘附试验来进行定型,并鉴定出4巾血清型之 后学者们叉根据抗原的一些特性,将李氏杆菌分成 氏杆菌(L.Welshimeri)和西里杰氏李氏扦菌c.16巾血清变种,洋见表2[.. 表1李氏杆菌真的鉴别特征 注;上阳性,一阳性,V不定,?什强阳性 噬菌体定型是有献的,对血清群1挖和缺步噬 菌体的某蝗罕见血清变种的定型率较低.在前的 研竞中李氏杆菌苗株的总定型率为52,78,壤 近报道成用改良程序对血清群1/2的大部分菌株和 血清变种的大部分分离株可以定型:多酶电泳分 析法是一种同工酶定型方法,目前根据本洼将单核 细胞增多性李瞳杆菌分为两个主要类型:】/2b,3b 和曲血清变种属于一个类型,血清变种1/2a,1/2c 和3a属于另一个类型 2单核细胞增多性李氏杆菌的毒力因子 最近,已阐明了单棱细胞增多性李氏杆菌毒力 因子的性质,结构和生物学特性.它是?种具有单梭 细胞_--臣噬细胞系细胞的增殖方式,侵入细胞后 收穑日期:19g7-09—03 在细胞质内增殖,排出吞噬体并扩散到细胞中毒力 【珂子一李氏杆菌溶血素0(LLO),它是在巨噬细 胞中通过吞噬体膜合成,并释放到细胞质中的.. 另外,还鉴定出了其它几种与细菌存活有关的毒力 因子,如溶血性基因prfA,它控制着致病性菌株 【J10的表达,并编码1个27K1)a分子量的蛋白:磷 脂酰肌醇特异性磷脂酶C(PI—PLC)基因,它编码1 个分子量大约为36KDa的蛋白,但它在毒力因子的 确切作用尚不清楚.. 3动物李氏杆菌病 单棱细胞增多性李氏杆菌最早是从患病实卧而死亡,但牛患病持续时阐较长.直 晒温度正常或升高,潜伏期为2,6周:”. 表2李氏杆菌属的血清变种 注:(卓存在 脑的夫体病理学变化很啦发现组织学变化多 为单侧性的,延髓和脑桥最为严重.小If商,颈脊髓和 闻脑的损伤很少发现,即使发生其损伤也较轻特征 性损伤是病灶部位炎性细胞浸润,其相邻的血管周 围由巨噬细胞,浆细胞偶尔是中性牧细胞等类淋巴 细胞组成.严重病例在脑组织呈现大面积损伤脑膜 炎时常继发成为实质性损伤但很步有侵袭到室管 膜和脉络膜丛.绵羊的李氏杆菌性脊髓炎很罕见,一 旦发生可导致躯干麻痹. 多年来的研究结果认为,李氏杆菌只是经鼻呼 吸道和淋巴管侵入脯部,引起李氏杆菌性聃炎的,而 通过颈动脉内,瞄内,静脉内,肌肉内,皮1:,皮内注 射,结膜注射或瘤胃内接种等均未能复制成功 Osebold&Sawyer【1956)研究结果证实,颈动脉内接 种复制出典型脑费自然病例,并有明显的脉络膜炎 损伤.刺种嘴唇或口腕枯膜可导致白鼠李氏杆菌性 脑炎,24h内在三叉神经根部,4天时在延脑现炎 症.与之接触的11其山羊中有4只在攻毒后l7天, 28天产生神经性疾病,并其组织学损伤与自然病 例相似.接种绵羊前磨牙或切齿的牙髓肫,结果在20 天,4l天时产生李氏杆菌性脑炎典型神经学症状, 中枢神经的损伤相似于自然病例. 3.2流产单棱细胞增多性李氏杆菌j』引起反刍 动物及苴它驯养动物发生李氏杆菌性流产.已证实 绵羊李氏杆菌也可引起绵羊和牛的流产.但相比单 棱细胞增多性李氏杆菌发生率要低,且损伤程震要 轻在英国,李氏杆菌性流主要发生在绵羊t堪常 是零星发,偶有j0%的畜群被感染.口腔感染妊 娠母畜不会导致流产,而静脉内注射则很快引起流 产.胎盘损伤呈现针尖状,淡黄色坏死灶,形成于叶 问胎盘炎,流出红色或褐色渗出物.胎儿通常自溶, 偶尔见到遍及整个肝脏和脾脏的粟粒状坏死灶;组 织学检查,发现病灶有凝固性坏死及不同程度的 巨噬细胞和中性粒细胞浸润.感染胎儿的潜伏期为5 天,l2天…]. 3.3败血症新生或子宫内感染的动物可发生败 血症,但相当步见,其损伤是整个肝脏呈现针尖状, 淡灰白色小结节性坏死,坏死灶内有多形细胞和 榱细胞浸润.静脉内注射能很快地产生败血症,潜伏 期为2天,3天绵羊暴发李氏杆菌性败血症比较少 见.患畜发热,严重腹泻.在成年绵羊,单核细胞增多 眭李氏杆菌感染引起严重脑炎症状,皱胃褶广泛性 出血,皱胃和肠枯膜溃疡及Peyer氏斑块状脓 肿”“„. 3.4其它类型李氏杆菌感染在牛和绵羊,单棱细 胞增多性李氏杆菌感染也可引起虹膜炎和角膜结膜 炎,它常与李氏杆菌某些其它感染形式相联系,例如 脑膜炎或脑炎,临床上极少见有症状,偶尔可见眼半 闭或明显失明,虹膜和眼前房呈云雾状,但多数是单 侧性的,且通常发生在冬季用青贮饲料饲喂的动物: 牛李氏杆苗性乳房炎也有报道,但很少有病例记载= 在单胃动物淳氏杆菌病是不常见的,尽管败血 症和脑膜脑炎已有报道]家禽感染可导致败血症 和心肌坏死免感染可引起显着的单核细胞增多症 实验动物和啮齿动物败血症也有报道,其损伤相似 于反刍动物所见”“】. 40 4流行病学 绵羊是主要侵袭品种.Wilesmith&Gitter (1986)调查发现,在成年编羊脑炎的平均发病率为 2.5(0.1,133%),6周龄以内发病更为严重. 13arlow&McGorum(1985)记载的大多数病倒是4 月龄的羔羊或2岁以上的成年绵羊.Scott(1993)记 录的病例以2岁的母羊为主,而Green&Morgan (1994)认为6,12周龄的羔羊为多.在英国,本病有 一 定的季节性,脯炎病倒主要发生在2,3月,但感 染高峰是在妊娠后期0. 李氏杆菌属广泛存在于环境中,可以从土壤,腐 烂植物和牧草,青贮饲料,污泥,工厂排出物和河水 中分离到.尽管病原体普遍存在,但李氏杆菌感染与 青贮饲料特别有关,饲喂青贮饲料的畜群其李氏杆 菌发病率明显增加i”. 鼠口服李氏杆苗后,在其脾雠秆肝脏迅速繁殖, 发病后可产生免疫反应,其免疫应眷状况相似于绵 羊,很象饲喂青贮饲料发生的亚临床感染.这些动物 能保护性的抵抗李j乇杆菌性败血症,仳不能完全有 效地保护抵抗脑炎”李氏杆菌的致病尚不清 楚,在某些畜群脑炎和流产发生较少,其中脑炎的发 生叉较流产和败血症为多闸发病和免疫抑制在李 氏杆菌病发生中的作用还不清楚=Vandegraff等 (1981)认为多种因素如低铜血症,贫血症和肠寄生 虫感染都可影响李氏杆菌病的发生,但间发病则与 本病的发生没有相互影响?. 5李氏杆菌感染的诊断 孝氏杆菌病实验室诊断可通过病原体的培养, 组织或体液中病原的证实,特异性免疫应答的检测, 以及特征性组织学损伤来确定 病原体的培养通常使用简易试验培养基,但韧 代培养分离是比较困难的,因为痫料中所含的痫原 体数量往往较少=应用辟增菌技术能增加分离的成 功率.分离单核细胞增多性李氏杆菌的选择性培养 基报道应用的很多,但最常用的是McBride和Mar tin培养基 荧光抗体技术和过氧化物酶一抗过氧化物酶染 色法已经应用,但应用多克隆血清时必须慎重,因为 与其它细菌也可出现类似的交叉反应.应用EL1SA 可捡测李氏杆菌性脑膜炎的脑脊液(CSF)中的可溶 性抗原,如蛋白质浓度>0.4g/L,白细胞数为1.2× l0/L,则可预示动物发生了李氏杆菌性脑膜炎,但 可靠性较低,也就是说不是所有李氏杆菌性情炎病 例都是如此.通过PCR扩增单核细胞增多性李氏杆 菌侵袭关联P.蛋白基因(1ap)和LLO基因(hylA), 可以检测非常低量的病原体.虽然这种方法准确性 高,但难以推广应用 单核细胞增多性李氏杆菌感染抗体检测的血清 学方法应用报道的很多.热灭活菌株悬液的血清凝 集(肥达试验)可捡测抗苗体抗体,而应用福尔马林 处理菌体则用于检测鞭毛抗体,但本法对复杂抗原 中罔兽医杂志1999年(第25卷/第1期 群不能鉴定,同时不能排除非特异性反应,周为应用 本法在无李氏杆菌感染病史的健康动物血清中也时 常检测到抗体.试图用2巯基乙醇对血清进行处理 来提高凝集试验的特异性.仇数军不哪鼎= 6治疗和控制 由于本病原体是定居在细胞内的,所以应用抗 生素治疗动物李氏杆菌病的效果不太理想.据报道t 氨苄青霉素和羟氯苄青霉素比较有效,而氯霉素,红 霉素,链霉素和四环素刚无效绵羊脑炎病例的抗生 素治疗效果较差,必须大剂量口服=其它娄型的李氏 杆菌病如流产璎,多数可自愈.车病的控制主要是慎 用青饲料=由于该病原体是细胞内寄生.并j]是细 胞诱导免疫,故目前还没有有效的疫苗. 主要参考文献 1,~:eliger,H.PR&Jones,DListeriaBergey?sMauual ofSvstematicBacteriology.(volome?).cdsPHA Sheath,NS.Mair,M.ESharpe邑JG.HoltB:dti WillJamsandWilkins.1986,】235,1215 2Rocourt,』.,Bocrlin.P.,Grimont…Fta1.一lnternation alJournalofSystematicBactedoloy一1992.4217l,17d 3Gray—M.L.&Killinger,A.HBacteriology?Reviews, l966—30909,382 4RorourttJ..schrettenb…….A.&Seeliger,HPR. 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