LC50和LD50、EC50

LC50和LD50、EC50 LC50和LD50、EC50 半数致死浓度LC50和LD50在动物急性毒性试验中使受试动物半数死亡的毒物浓度用 LC50表示。经口服、腹腔、静脉或皮下注入皮肤染毒方式引起急性中毒的半数致死量以LD50Lethal Dose表示以吸入的染毒方式引起急性中毒的半数致死浓度以 LC50表示。 半数效应浓度EC50测定工业废水和其他化学物质对鱼类等水生生物的急性毒性试验方法以在一定暴露时间内的―平均耐受限‖TLm表示。TLm是指在急性毒性试验中使受试水生动物半数存活或半数死亡的毒物浓度即TLm等于 LC50。 LC50 Lethal Concentration 50致死中浓度/半致死浓度/半数致死浓度表示杀死 50 防治对象的药剂浓度单位为PPm 。 50 effective concentration 半数有效浓度 半数致死量median lethal dose简称LD50即Lethal Dose 50。半数致死浓度是衡量存在于水中的毒物对水生动物和存在于空气中的毒物对哺乳动物乃至人类的毒性大小的重要参数。毒物的致死效应与受试动物暴露时间有密切关系。如果用 LC50表示水中毒物对水生生物的急性毒性必须在LC50前标明暴露时间如24小时LC50、48小时LC50和96小时LC50等。如果用LC50表示空气中毒物对哺乳动物的急 小时或4小时后的试验结果可不注明吸入时间但性毒性一般是指受试动物吸入毒物2 有时也可写明时间参数。例如LCt50是指引起动物半数死亡的浓度和吸入时间的乘积时间t一般用分钟表示。 形成和发展 1945年美国学者提出工业废水或化学物质对淡水鱼的急性毒性试验方法后来发展成为测定工业废水和其他化学物质对鱼类等水生生物的急性毒性试验方法以在一定暴露时间内的―平均耐受限‖TLm表示。TLm是 年美国指在急性毒性试验中使受试水生动物半数存活或半数死亡的毒物浓度。1975公共卫生协会、给水协会和水污染控制联合会提出以半数致死浓度LC50和半数效应浓度EC50代替平均耐受限。 平均耐受限和半数致死浓度是意义相同的两个术语即TLm等于 LC50。半数效应浓度是在一定暴露时间内使半数受试水生动物产生某一效应如丧失平衡、发育异常或畸形等的毒物浓度用以表示短期暴露的亚致死毒性。由于以LC50和EC50分别表示毒物短期暴露的致死毒性和亚致死毒性较为明确自70年代中期以来LC50已逐渐成为水生动物急性毒性研究的常用术语用TLm者渐少。 环境中化学物质还对人类产生毒理学后果因此环境毒理学还必须阐明化学物质对哺乳动物的毒作用规律。1927年特里文采用―半数致死量‖LD50的概念并提出剂量反应关系。由于化学物质的广泛应用毒理学实验也必须考虑和模拟人暴露或接触毒物的真实情况。在环境毒理学中经口服腹腔、静脉或皮下注入皮肤染毒方式引起急性中毒的半数致死量以LD50表示以吸入的染毒方式引起急性中毒的半数致死浓度以 LC50表示。但空气中的物理因素如核辐射引起哺乳动物半数死亡的剂量用LD50表示。 计算方法 计算毒物对水生动物的 LC50常用直线内插法即根据不同暴露时间以及在等对数间距的各个试验浓度下测试动物的死亡率求出不同暴露时间的LC50值。计算时必须有使受试动物存活半数以上和半数以下的各种试验浓度。根据毒物或废水试验浓度和受试动物的死亡率用半对数纸作图在死亡率50处划一垂线至浓度坐标即可求出不同暴露时间内的LC50。增加试验次数和适当缩小试验浓度间距可提高LC50值的精确度。运用法Litchfield and Wilcoxon法可计算出LC50值的可信限从而估算出与受试动物同类的动物死亡50的毒物浓度范围。 计算毒物对哺乳动物的 LD50和LC50较为简便、精确的方法是图解法。由于染毒方式不同动物的中毒反应往往有很大差异。为便于对吸入染毒和其他方式染毒引起的动物急性中毒进行比较可按一定的换算公式将染毒浓度换算成吸入的毒物剂量。 意义和作用 在比较 各种污染物的毒性不同种或不同发育阶段的动物对污染物的敏感性以及环境因素对毒性影响等方面的研究中都以LC50为依据。水生动物的种类不同对毒物的感受性有很大差异。如镉对金鱼的96小时LC50为2.13毫克/升而对一种端足类动物则为0.085毫克/升。同一种毒物对处于不同发育阶段的同一种动物的毒性也不同。如镍对刚孵化出的鲤鱼苗的96小时LC50为6.10毫克/升而对体长为45厘米的鲤鱼鱼种则为35.0毫克/升。因此目前国内外用于研究污染物对水生动物急性毒性试验的动物除鱼类以外还有浮游动物、软体动物、甲壳类、环节动物、棘皮动物、水生昆虫和蠕虫等。水的温度、pH值、溶解氧量、硬度、盐度等环境因素对污染物的毒性也有明显影响因此某种毒物毒性时要有环境因素的记录。 影响毒物对哺乳动物的毒性的因素很多而且情况比对水生动物复杂。如纯度为95以上的八氟异丁烯分别给小鼠吸入染毒和腹腔注入染毒其试验结果前者的LC50为2ppm后者LC50在500毫克/升以上。经换算并进行比较前者属于剧毒类而后者属于中等毒类。此外毒物的化学结构和性质受试动物种类、种系、性别、年龄、体重和健康状况以及诸如气温、气压、湿度、季节等环境因素也与LC50或LD50有密切关系。 在水污染控制方面化学物质对水生动物的LC50值有以下用途?对可能进入水体的化学物质进行毒性过筛以控制剧毒物质的生产和应用?根据LC50值并运用应用系数推算出安全浓度为制订水质提供依据?检查废水处理效果为制订废水排放标准提供依据?作为污染源监测和水污染生物评价的依据。由于新的化学制品不断增多广泛进行水生动物的慢性毒性试验受到许多限制评定毒物安全浓度的简易生物测试法还不完善因此 LC50仍然是控制水污染必不可少的生物学参数。 哺乳动物毒理学研究已积累了丰富的资料。根据人类的经验和从动物实验获得的化学物质LD50和LC50值可以估计化学物质对人的可能致死剂量。根据对人的可能致死剂量中国一般将化学物质的毒性分为剧毒、高毒、中等毒、低毒和微毒等五个等级。尽管目前对毒性分级的方法、标准以及毒性等级的用语还不统一但在新的化学制品不断出现和广泛应用的情况下测定化学物质对哺乳动物的LD50和LC50进行毒性分级对于保护人类环境和预防职业性中毒都有重大意义。 药物半数致死量LD50的测定 Determination of Drug Median Lethal DoseLD50 【目的和原理】 了解药物LD50测定的意义、方法、计算过程。 LD50是指使一群体动物中半数死亡的剂量是衡量药物毒性大小的指标是评价药物优劣的重要参数。了解药物单次给药或短时间内多次给药后动物所产生的毒性反应及其严重程度为临床安全用药及监测提供一定的参考。 LD50的测定方法很多较为常用的有改良寇氏法、简化概率单位法、序贯法、孙瑞元点斜法和Bliss-Finney法。本实验介绍结果较准确、计算简便、可计算出全部有关参数的改良寇氏法及及计算机应用程序中的Bliss-Finney法。 【实验动物】小白鼠体重18-22g??各半实验前禁食12 h不禁水。 【实验器材和药品】 计算机BL-410机能实验系统、计算器、电子秤、量筒10ml、注射器1ml、小鼠笼盐酸普鲁卡因procaine hydrochloride。 【实验步骤和观察项目】 改良寇氏法 一、预备实验 1.探索剂量范围根据经验或文献找出动物100及0死亡的剂量即上下限剂量DmDn。对于无毒性参考资料的药物一般先配制最大浓度药剂然后按等比关系如21稀释成多个剂量方法是每组取410只小鼠按估计剂量给药如果全死则降低剂量如果全活则增加剂量进而确定出Dm Dn。 2.确定组数、计算各组剂量 组数G5-8组 各组剂量各组剂量要按等比级数排列按下列公式求出公比r: 按公比求各组剂量D1D2D3D4D5……Dm 其中D1Dn 最小剂量D2D1? rD3 D2? r……Dm D n-1?r 3配制等比稀释溶液 要求各小鼠给药容积一样0.1ml/kg0.2ml/kg按下列公式计算浓度 C母Dm/等容注射量 二、正式实验 1.分组编号随机将小鼠分为五组每组10只 ??各半。 r G-1 Dm/Dn 2.给药分别将配制好的等比稀释液按0.2ml/10g由ip给药。 3.观察记录记录小鼠死亡数。 结果 记 录 表 组别 稀释倍数 倍数 剂量D mg/kg 动物数n 只 死亡数F 只 死亡率PF/n 1 2 3 4 5 注小鼠分为五组每组10只??各半。 计算LD50及95可信限 LD50lg –1Xmi?P0.5 Xm最大剂量的对数值 i相邻两组比值的对数lgr P各组死亡率 ?P 各组死亡率总和 LD50的95平均可信限 LD50?4.5LD50?SX50 其中SX50为LD50的标准误 SX50i 三、计算方法——SPSS的 Bliss法被认为是目前最精确的方法受到我国《新药临床前毒理学研究指导原则》耐萍黾扑阆嗟备丛佑τ眉扑慊 砑 扑阍蚣虻ヒ仔小?1 启动微机运行BL-410程序进入其数据处理选项再进入半数致死量选项。 2 一次输入各组剂量、动物总数、动物死亡数等相关数据。 3 单击―计算‖按钮计算LD50等参数。 【注意事项】 药物称量、配制及给药的准确程度是本实验成功与否的关键。 1.实验过 注意观察中毒症状及其发生时间、死亡时间。 【思程中给药剂量一定要准确。 2. 考题】 测定LD50有何药理意义