五淋化石胶囊的质量标准研究

五淋化石胶囊的质量研究 五淋化石胶囊的质量标准研究 山东中医杂志2007年8月第26卷第8期 五淋化石胶囊的质量标准研究 邱宏聪,覃潇,孟夏临,饶伟源 (广西中医药研究所,广西南宁530022) ?57l? [摘要]目的:建立五淋化石胶囊的质量标准.方法:采用TLC法对方中的延胡索,黄芪进行定性鉴别;用HPLC法测定 槲皮素的含量.结果:在薄层色谱中能检出延胡索,黄芪;槲皮素在0.0177tO.3540g 范围内线性关系良好,规定本品每粒 含石韦以槲皮素计,不得少于0.1mg/粒.结论:所建立的方法对处方中各主要药材能准确快速进行定性,定量分析. [关键词]五淋化石胶囊;质量标准;TLC;HPLC;槲皮素 [中图分类号]R284.1[文献标识码]A[文章编号]0257—358X(2007)08—057卜O2 五淋化石胶囊是根据五淋化石丸进行剂型改革 的品种,为广西中成药优势品种,本品是由金钱草, 鸡内金,石韦,黄芪,延胡索等药经加工精制而成的 胶囊剂,具有通淋利湿,化石止痛之功效,用于淋证, 癃闭,尿路感染,尿路结石,前列腺炎,膀胱炎,肾盂 肾炎,乳糜尿.为控制其质量,采用TLC法对方中 的延胡索,黄芪进行定性鉴别,用HPLC法测定槲 皮素的含量. 1仪器与试剂 日本岛津公司IC—IOA高效液相色谱仪;SPD- IOA紫外器;威玛通用多媒体色谱数据工作站. 延胡索乙素对照品,黄芪甲苷对照品,槲皮素对照 品:由中国药品生物制品检定所提供.乙腈,甲醇为 色谱纯,水为重蒸水,五淋化石胶囊及缺石韦,缺延 胡索,缺黄芪的阴性对照样品,由广西梧州三鹤药业 有限公司提供. 2定性鉴别 2.1延胡索薄层鉴别取本品物6g,加甲醇 5Om1,超声处理30min,放冷,滤过,滤液蒸干,残渣 加水10ml使溶解,加氨试液使呈碱性,用乙醚提取 3次,每次15m1,合并乙醚提取液,蒸干,残渣加甲 醇1ml使溶解,作为供试品溶液.另取缺延胡索的 阴性样品6g,同法制成阴性对照溶液.再取延胡索 乙素对照品,加甲醇制成每毫升含1mg的溶液,作 为对照品溶液.薄层色谱条件:吸取供试品溶液,阴 性对照溶液各1O,151,对照品溶液21,分别点 于同一硅胶G板上,以石油醚一氯仿一甲醇(5:3: 0.5)为展开剂,置氨蒸气饱和的展开缸内,展开,取 [收稿日期]2oo7—0326 [基金项目]广西科学研究与技术开发计划项目(编号:桂科攻 0424008—3C) [作者简介]邱宏聪(1982一),男,广西柳州人,硕士研究生,主 要从事药物质量标准研究工作. 出,晾干,喷以稀碘化铋钾溶液.供试品色谱中,在 与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;阴 性样品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,无相 同颜色的斑点. 2.2黄芪薄层鉴别取本品内容物5g,置索氏提 取器中,加乙醚100ml,加热回流2h,滤过,弃去滤 液,滤渣挥去乙醚,加甲醇100ml,加热回流4h,滤 过,滤液回收甲醇并浓缩蒸干,残渣加水50ml,微 热使溶解,用水饱和的正丁醇振摇提取2次,每次 10ml,合并正丁醇提取液,用水洗涤2次,每次 20ml,弃去水液,正丁醇提取液蒸干,残渣加甲醇 1m1使溶解,作为供试品溶液.另取缺黄芪的阴性 样品5g,同法制成阴性对照溶液.另取黄芪甲苷对 照品适量,加甲醇制成每毫升含1mg的溶液,作为 对照品溶液.薄层色谱条件:吸取供试品溶液,阴性 对照溶液各1O1,对照品溶液51,分别点于同一 硅胶G板上,以氯仿一甲醇一水(65:35:10)的下层 溶液为展开剂,展开,取出,热风吹干,喷以1O硫 酸乙醇溶液,在105?加热约5min,至斑点显色清 晰.供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上, 显相同颜色的斑点;阴性样品色谱中,在与对照品色 谱相应的位置上,无相同颜色的斑点. 3槲皮素含量测定 3.1色谱条件色谱柱:kromasilC18柱(4.6mm ×250mm,5m),流动相为乙腈一甲醇一O.4磷酸 溶液(8:31:61)为流动相;流速1.0ml/min;检测 波长为360nm;室温,进样量为2O1;理论板数按 槲皮素峰计算应不低于4000. 3.2溶液制备?对照品溶液:精密称取槲皮素 对照品适量,加甲醇一25盐酸(4:1)混合溶液制 成每毫升含3.5g的溶液,即得(冰箱保存).见图 1.?供试品溶液:取本品内容物,研细,取约1g,精 密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇一25盐酸 (4:1)混合溶液50ml,称定重量,加热回流1h,立 ?572? 即冷却,再称定质量,用甲醇一25%盐酸(4:1)混合 溶液补足减失的质量,摇匀,滤过,即得.见图2. ?阴性对照液:取缺石韦的处方药,制备不含石韦的 阴性对照样品溶液,结果明在槲皮素峰处无干扰. 见图3. 图1对照品图谱 图2供试品图谱 图3阴性样品图谱 3.3线性关系考察精密称取槲皮素对照品 11.06mg,置5Oml量瓶中,加甲醇一259,6盐酸(4: 1)混合溶液使溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取 2Oml置5Oml量瓶中,加甲醇一259,6盐酸(4:1)混 合溶液稀释至刻度,作为对照品贮备溶液.精密量 山东中医杂志2007年8月第26卷第8期 取对照品贮备溶液0.25,0.5,1,3,5ml,分别置 25ml量瓶中,加甲醇一259,6盐酸(4:1)混合溶液稀 释至刻度,摇匀,作为对照品溶液.按正文拟订的色 谱条件分别进样2Ol测定峰面积值,以峰面积值 (Y)对进样量(X)进行回归,计算得回归方程:Y一 4055412X-2362.97(r一0.9998).表明进样量在 0.0177~0.3540g范围内时,线性关系良好. 3.4精密度试验对同一供试品溶液,按含量测定 方法,连续测定5次,结果槲皮素含量RSD为 0.509,6. 3.5重复性试验取同一批样品,平行制备6份, 进样2Ol,按含量测定方法测定.结果平均含量为 0.61mg/g,RSD一0.969,6. 3.6稳定性试验取同一批样品,按含量测定方 法,分别在0,1,2,4,8,12h测定,共测定6次,结果 RSD为0.63,表明样品溶液在12h内稳定. 3.7回收率试验取已知含量的五淋化石胶囊6 份,每份精密称取0.5g,分别精密加入槲皮素对照 品溶液6.24ptg/ml50ml,按供试品溶液制备项下 方法处理,测定含量并计算回收率,结果见表1,加 样回收良好. 表1槲皮素回收率试验结果 3.8样品测定取3批样品,依法制成供试品溶 液,依上述色谱条件进行测定,记录峰面积值,槲皮 素含量分别为0.14rag/粒,lO.13rag/粒,0.14rag/ 粒. 4讨论 4.1对方中的广金钱草,石韦,车前子三味药材进 行薄层鉴别试验考察,均有阴性干扰. 4.2对方中的延胡索(延胡索乙素)进行含量测定 研究,结果含量低于万分之一,对控制质量没有意 义.故测定甘草中槲皮素含量来进行质量控制. [参考文献] [1]国家药典委员会.中国药典(2005年版一部)[M].北京:化学 工业出版社,2005:附录55.