【doc】 关于冰冻红细胞在制备过程中减少细胞损害的探讨
关于冰冻红细胞在制备过程中减少细胞损
害的探讨
?78?中华翻I合II岔床医学杂志?经验交流?2005年8月第七卷第8j明
2.杨锡强.易着文.儿科学.第六版.人民卫生出版社,2004:126,3.诸福棠,等.实用儿科学.第四版.人民卫生出版社,1985:485
141,459,
关于冰冻红细胞在制备过程中减少细胞损害的探讨
【关键词】冰冻红细胞离心力甘油
王惟李佳李丹
长春市中心血站吉林长春130033
冰冻红细胞保存期达10年.为需要稀有血型[Rh(D)阴
性1病人提供方便.为了更好地提高冰冻红细胞血液的质量,
笔者在红细胞冰冻保存以及解冻洗涤过程中,对减少红血球
损害.以及降低离心力,降低上清游离血红细胞蛋白含量等
问题进行了实验观察.现报告如下.
1,材料与方法
1.1试剂与耗材
57%甘油,9%氯化钠溶液,三珠冷冻袋,无菌四联袋(北
京博德桑特输采血器材科技开发中心),羟乙基淀粉溶液(济
南三九益民制药有限公司),0.9%生理盐水.
1.2制备方法
经过冰冻采用高浓度甘油(57.1%)慢速冷冻一80~C保存.
将Rh(D)阴性全血或红细胞悬液离心去上清.将红细胞转移
至三珠袋加甘油,甘油化的红细胞中甘油浓度40%.用浓度
梯度法洗涤:分别用9%NaC1溶液与羟乙基淀粉溶液洗涤.再
用0.9%NaC1溶液与羟乙基淀粉溶液洗涤.最后用0.9%NaC1
溶液反复洗涤.制备悬浮红细胞供临床使用.
1.3质量检测
对于不同离心力制备冰冻红细胞,采用血细胞计数仪检
测法.检定红细胞回收率,上清游离血红蛋白含量采用联本胺
法.体外溶血采用联本胺法,高碘双钠法检测甘油残余量.
1.4统计学处理
在制备冰冻红细胞过程中,适当降低离心力,既能很好
地去除甘油.又能减少因重离心对红细胞的破坏.笔者采用
对照方式进行数字式对比.
1.5
上清血红蛋白不超过1g,I;残余甘油含量在10g,I;红细
胞回收率8%;体外溶血实验?50%.
2.讨论
红细胞活性的基础.目前,冰冻红细胞所使用的防冻剂为渗
透性保护液甘油.由于甘油渗透压较高.在加入甘油时一定
要先控制速度,先20滴,分,3分钟后40滴,分,5分钟后60—
70滴,分,25分钟左右加完即可.由慢到快,逐渐提高滴速,并
使血液制剂的血袋始终保持震荡状态,血袋内有玻璃珠,起
搅拌作用,让甘油缓慢均匀的和红细胞混合.甘油加完毕后
一
定要静止30分钟.另外.加甘油前和加完甘油后都要排尽
血袋内空气,如果血袋内气泡太多,在形成大的气泡的过程
中,小气泡需不断破裂,这样对红血球是一个损害.另外,血
袋内有空气,在冰冻的过程中也易损坏血袋.在解冻去甘油
过程中应做到以下几个方面
2,1将冰冻的红细胞制备成解冻甘油红细胞关键的第一
步是在一80?冰箱取出红细胞后要迅速浸入37—40?水浴箱
中,水浴箱的水一定要浸没血袋,不断摇动,使血袋与水充分
接触,加速其融化,但不能用力去挤压血袋,减少红细胞在溶
化过程中的机械损伤.溶化好的血袋要在室温静止10分钟.
让血红细胞得到充分休息,增强血球的抗破坏能力.
2.2甘油化的红细胞的内环境是高渗的.为防止红细胞
遭到人为破坏,一般采用梯度洗涤法,先用高渗盐水9%NaC1
使甘油从红细胞内逐渐释放出来,逐渐降低渗液的浓度.这
一
步洗涤过程重点是高渗盐水的速度一定要缓慢些.30滴,
分逐渐提高滴速.7分钟加完即可,而且每次加完洗液后一定
要平衡5—10分钟后再离心.
2.3注意适当的下降离心力(见
1),对冰冻红细胞达
到各种质量标准起到绝对性作用.
红细胞甘油化前,保养液为ACD的血液制剂2天冰冻,
保养液为CPDA一1的血液制剂在6天内冰冻.这是保持冰冻79
表1
作者简介:王惟,女,主管护师.
参考文献
1.王培华主编.文献血技术学.第二版.北京人民卫生出版社.73—