T4 DNA Ligase

T4 DNA Ligase 使 用 说 明 包 装 量： 浓度： 5U/μ l 储运温度：-20℃（保存 6个月） 制品说明：T4 DNA Ligase 是从表达 T4 DNA Ligase 基因的大肠杆菌经诱导表后分离纯化而来的。它催化 相邻 DNA 链的的 5’-磷酸末端和 3’羟基末端以磷酸二酯键结合反应。该酶催化平滑末端或粘性 末端 DNA 的连接，修复双链 DNA、RNA、DNA/RNA 杂交中的单链中的单链切口。 适用范围：（1）DNA 片段和载体 DNA 快速连接； （2）限制酶切片段的克隆； （3）将 DNA 片段与 Linker 或 Adaptor 连接。 酶贮存缓冲液： 20mM Tris-HCl (pH7.5)， 0.1 mM EDTA， 1mM DTT， 50 mM KCl， 50% glycerol。 10×Ligation Buffer： 400 mM Tris-HCl， 100 mM MgCl2， 100 mM DTT，5 mM ATP(PH7.8)，其他成分。 建议连接反应体系： (以 10 μ l 反应体系为例) 反应循环的设置： 粘端连接：20～25oC反应 2～5 分钟； 平端连接：20～25oC反应 2小时或 16 oC 过夜。 NOT FOR HUMAN OR DRUG USE 目录编号 包装单位 170701 50U 170702 100U 170703 300U 标准反应管 阳性对照管 Vector μ l μ l PCR 产物 n ul ** / 对照插入 DNA 片段 / 1ul T4 DNA 连接酶(5U/ul) 2～5U 2～5U 10×Ligation Buffer 1ul 1ul 加去离子水至终体积 10ul 10ul