【doc】静脉注射受体阻断剂酚妥拉明,赛庚啶和纳洛酮对LRN下行性抑制作…

【doc】静脉注射受体阻断剂酚妥拉明,赛庚啶和纳洛酮对LRN下行性抑制作… 静脉注射受体阻断剂酚妥拉明,赛庚啶和纳 洛酮对LRN下行性抑制作… 贵阳医学院Vo1.19No.2 JOURNALOFGUIY^NGMEDICALCOLLEGEl99d 静脉注射受体阻断剂酚妥拉明,赛庚啶和纳 洛酮对LRN下行性抑制作用的影响 伍国锋陈婉梅阎剑群f^j一一1t,, (贵阳匮学院神经病学教研室西安医科大学神经研究室) 提要本实验采用徽电极细胞外,以清醒大鼠脊髓背角广动力范围(WDR)神经元 的伤害性诱发放电频率(即晚串放电频率)为指拓=.观察静酥注射受体阻断荆酚妥拉明赛 庚啶及纳洛酮对延髓外侧网状核(LRN)下行抑制作用的影响.结果明,村澈LRN对,V阻 神经元的下行抑制作用部分是通过NE和5-HT实现的,LRN的这种下行抑制作用可能并不涉 及内源性阿片肽. 关键调受体阻断剂延髓外侧网状核广动力范围神经元 中图分类号R971? 脊髓背角WDR神经元在伤害性信息 的传递过程中起重要作用,我们先前的工 作表明.电刺激LRN能明显抑制WDR神 经元对外周伤害性刺激的反应,为进一步 探讨LRN对W'DR神经元下行抑制作用的 神经递质.我们于1990年7月至l991年 5月对大鼠进行了研究. 1实验材料及方法 1.I动物准备 实验选用体重为240g,340g的SD大 鼠帅只,雌雄不拘,常规麻醉及插管.继 而在TI3,L部位行椎板切除术并将动 物固定于立体定位仪上,调节动物头部使 其左右对称,切开头皮,根据O.Paxinos大 白鼠脑定位图谱挫出相当于LRN的颅骨 部位并钻一小孔备用.动物清醒后静注三 碘季胺酚制动(40ms/ks),同时施与人工 呼吸,实验过程中监测动物心电及直肠温 度,并根据需要随时追加三碘季胺酚. 1.2W'DR神经元单位放电的记录 记录用玻璃微电极于L脊髓节段垂 直插入脊髓背角.在距脊髓表面lS00Vm 的范围内引导WDR神经元的放电.神经 元的放电经微电极放大器输入示波器显 示.放电信号由示波器输入计算机处理.以 叠加十欢的W'DR神经元放电散存入磁盘 作为的依据. I.3刺激 '外周电刺激:用一对不锈钢针电极插 入动物后肢足跟部作刺激电极.在寻找神 经元的过程中,用低强度(5,10mA,2ms. IHz.不易兴奋C纤维)和高强度(10, 30mA,2.IHz,可奋绝大部分C奸 维)的经皮电刺激作检验刺激j2l探测W'DR 期 2 第年 替盼 : 第 82贵阳医学院l9卷 神经元. 外侧网状核刺激:根据G.Paxinos大 白鼠脑定位图谱找出LRN的坐标(前囟向 后l3.Omm,13.8ram,中线旁开1.5mm, 2.0ram.深10.5A1n1,llmm).用手动推进 器把刺激电极(外径为0.3mm的单极同心 针电极)垂直插入LRN内,刺激参数为;频 率0.3Hz,强度100,3O,波宽200~s, 串长171ms,LRN刺激停止9ms后即经由 另一刺激器施与外周电刺激并同时触发计 算机对WDR神经元的放电进行记录分 析. 1.4给药途径及剂量 阿片受体阻断剂纳洛酮0.3,O.5rag/ kg.5-HT受体阻断剂赛庚啶l,3rag/ks,q 受体阻断剂酚妥拉明0.4,0.5rag/ks,三 种药物均由静脉注射.时问Imin. 1.5组织学定位 LRN内刺激电极尖端位置的定位采 用电解铁离子沉淀法.即在刺激电极上通 以20,3O的正向电流,时同为30s,电 解完毕后即经左心室进行心脏灌流,然后 取出脑干置于lo:醛溶液中固定3,毒 日,继而取出作40,5m的蔗续冰冻切 片观察电极尖端位置 2实验结果 2.1静脉注射受体阻断剂酚妥拉瞻对 LRN下行抑制作用的影响 共在2O个WDR神经元进行了观察. 静脉注射酚妥拉明前,电刺激LRN明显抑 制WDR神经元的早晚串放电,静脉注射 20min,电刺激LRN对 酚妥拉明后lO, WDR神经元的抑制作用减弱(表1) 表1静脉注射酚妥拉明对LRN下行抑制作用的影响一20) Tab?lTheeffectofsystemicphontolamine0nthedeljng inhibitionproducedbystimulatingLRN(B=2O) 】尸<0.Ol 静脉注射酚妥拉明后30min.电刺激 LRN对WDR神经元的抑制作用恢复到前 对照水平. 2.2静脉注射5一}rr受体阻断剂赛庚啶 对LRN下行抑制作用的影响. 静脉注射赛庚啶后,电刺激LRN对 WDR神经元早串放电的抑制作用无明显 变化,但对WDR神经元晚串放电的抑制 作用减弱,给药30rain后尚未恢复到前对 照水平(表2). 3.3静脉注射阿片受体阻断剂纳洛酮对 u下行抑制作用的影响 静脉注射纳洛酮后,电刺激LRN仍明 显抑制WDR神经元的早,晚串放电,与给 药前相比无显着差异(表3). 2期静脉注射受体阻断剂酚妥拉明,赛庚嚏和纳洛酮对LRN下行性抑制作用的影响83 表2静脉注射赛庚嚏对LRN下行抑制作用的影响"一10) Tab.2Theeffectofsystemiccyproheptadine0nthedesendinginhibition producedbystimulationinLRN"=l0) P<0.55 表3 Tab.3 静脉注射纳洛酮对LRN下行抑制作用的影响=7) Theeffectofsystemicna.1oxoneOllthed~dinginhibition producedbystimulationinLRN(n=7) 3讨论 本实验直接以脊髓背角WDR神经元 的伤害性诱发放电(即晚串放电)频率为 指标,研究LRN下行抑制作用的神经递 质.结果表明,静脉注射.受体阻断剂酚妥 拉明或5,HT受体阻断剂赛庚啶都可部 分阻断刺激LRN对WDR神经元的下行抑 制作用,而阿片受体阻断剂纳洛酮对刺激 LRN产生的下行抑制作用无明显影响,提 示刺激LRN对WDR神经元的抑制作用部 分是通过NE和5-HT实现的,而内源性阿 片肽似乎不参与调制刺激LRN产生的下 行抑制作用. 神经解剖学资料表明,LRN与脑干中 的At核团(NE能神经元)相重迭而存在, LRN区域必然含有较多的NE能神经胞 体[,而且LRN区域有纤维直接投射到脊 髓背角,故刺激LRN对WDR神经元的抑 制作用很有可能是LRN区域的NE能神经 元直接受到刺激而使其脊髓末梢释放去甲 肾上腺素(NE)的结果.另有研究表明,5一 HT能神经元不存在于LRN内而位于其内 侧及背侧[],LRN与PAG,脑桥LC/sc及 延髓NRM之间互有纤维联系[I],而LC/ sc和NRM分别是脊髓内NE能和5-HT 能末稍的主要起源部位,因此刺激LRN有 可能通过多突触系统激活来自LC/SC的 NE能纤维或来自NRM的5-FIT能纤维, 这些披激活的纤维在脊髓水平抑制背角 WDR神经元对外周伤害性刺激的反应.然 而,在LRN内微注射兴奋性递质各氨酸对 甩尾反射的抑制作用并不依赖于投向LC/ SC的纤维环路,而A区确有NE能纤维投 向脊髓],因此刺激LNR激活的NE能系 84贵阳医学院l9卷 统并不涉及LC/SC刺激LRN时激活的5—3 HT能神经元起源部位尚不清楚.很有可 能来自延髓尾靖缝际核群川 不论是n受体阻断剂酚妥拉明还是 5-HT受体阻断剂赛庚啶都不能完全阻断' 刺激LRN对WDR神经元的下行抑翻作 用,因此还有可能激活了其它下行抑制通 路-而这些下行通路可能不是阿片肽能,多 巴胺能,GABA能,胆能或P物质能的. 因为鞘内应用相应的受伴阻断剂对刺激6 LRN产生的下行抑制作用无明显影响[8]. 参考文献 1Ch'ielloJ.eta1.idmtifica- tionofnoradrenafineand8tdfP.4~liDosynthesizing ne啪r瑚inthecatventrolateralmedulla.JCl舢D Neural1986.253:216—230 2BjccHundA-eta1.Descendingmono-aminergic projeaiomtothe8p~t]cord.IniBminstemc叽. trolspinalcordmechani~.Amsterdam:Elscvi- erNorthHdland.1982.55—58 BowkerRM,etal-0rigir.of8口.t1erprojet- H0r蟮tothe叩机alcordinratlAnimmu|1ocyco_ cbemi曲nqade~lsport8恤J.BraitlRes, 1981.226:187—199 Lo~vo"AD.daLEf&?cutm~tionaofthe ve叫Ta1medulla~obl删1gataintherat.BraRes, 198I.3:63—80 (cH,etProjectionfrom叩henucleito thelateralreticularrluclel弼inthecat.ArchIra1 Bid.1983-121:249—257 HudsonMEeta1.Spinalprojectio~sofnc~'adren- erEicandadrm~jcn即呻esinthemedulla吐 leegata:newevidencein~tralcardive~lar ~m'o1.SoyNe~rcsciAbst~,1986:12:534 7UhlGR.吐a1.mapping enka~~nlngcellb.dj龉.fibersand n凹veterminalsinthebrainstemoftherat..晰n Res,1979-I66:75—94 8Geb]~rtGF.etaI.Ch毗c把ri丑ti.r.0fthesplasl nociceptivetail-flickreflexintberatfr<xnthe medullarylateralreticularnucleus.JNeulz~d. 1986-6:703—713 (I994一O1—20收稿,1994--03--29修回) TheEffectofIntravenousReceptorAJl诅鲫姆bonthe DescendingInhibitionfromLRN WuGuofeng.etaI 柏能耐oyl曲岫.吣'朋啦 Recentstudieshaverevealedthatthelateralre~eularde璐(LRN)inthecaudalnedlIIla oblongataplaysaveryimportantroleinthedescendinginhibitoryc~trolsofnc~iceptionThe presentstudywa,gdesignedt0examinetheeffectofintravenousrece仃 00antaganistsonthede- scendiIIg.mhibj廿0I1fromLRNbythemethodofreO口 dingunitdischargesofWDRfieurofiesinthe ratdorsalhorn,20WDRfieRroneswel'~studiedIntravenousphentoiamineaswellas cypraheptadinecouldat七enutethedes呦 dinginhibiBonproducedbyLRNstimulationbutnalox— oHehadlittleeffect,indicatingthatthe~imulafion— producedinhibitiOnfr,a.--'nLRN0nWDRr一 r?isl:~rflymediatedbyNEand5-HT?andendogeneousopioldpeptidesaptcasnottobein- volved. Keywords:receptorat~rdst;1areticularnucleuslwidedynamicrangei'letH'oIl~