25甲胎蛋白( AFP ) 东莞常平医院
免疫实验室
文件编号:
DGCPH-IMN-SOP-01-25
甲胎蛋白( AFP )
版序:2003-1
页码:第1 页,共2 页
[前言]
AFP是哺乳类动物胎胚期肝细胞内合成的糖蛋白,属于肿瘤相关抗原,分子量65000~70000。血中AFP含量升高,有生理性(如新生儿、孕妇)和病理性(如原发性肝细胞癌、畸胎瘤、新生儿肝炎等)两种。检测血中AFP含量,为肝癌的人群普查、早期诊断、疗效判断、预测复发提供了一种满意的手段。正常人AFP含量≤20ng/ml。...
东莞常平医院
免疫实验室
文件编号:
DGCPH-IMN-SOP-01-25
甲胎蛋白( AFP )
版序:2003-1
页码:第1 页,共2 页
[前言]
AFP是哺乳类动物胎胚期肝细胞内合成的糖蛋白,属于肿瘤相关抗原,分子量65000~70000。血中AFP含量升高,有生理性(如新生儿、孕妇)和病理性(如原发性肝细胞癌、畸胎瘤、新生儿肝炎等)两种。检测血中AFP含量,为肝癌的人群普查、早期诊断、疗效判断、预测复发提供了一种满意的手段。正常人AFP含量≤20ng/ml。
[原理]
本试剂盒采用针对不同抗原决定簇的双单克隆抗体制备成包被板和酶标记物,利用夹心法检测人血清或血浆中AFP含量,具有灵敏度高、特异性强等优点。
[试剂厂家]
Everlong Inc.
[试剂盒组成]
1、包被板条 96 孔
4、AFP
品:0,5,20,50,150,300 ng/ml
2. 标本稀释液 5. 显色剂A,B
3、酶标记物溶液 6. 终止液
[标准品]
试剂盒配置的标准物
[试剂的稳定性与贮存]
试剂自生产日起避光贮存于2-8℃,有效期内稳定。
[标本的收集与处理]
标本为血清、肝素或EDTA抗凝血浆。
[校准方法]
利用标准品制备曲线。
[操作步骤]
1. 加入 20 ul 标本及标准品后,再加入 100 ul 标本稀释液,混和 10 秒。
2,室温( 18--25 C )放置 30 分钟。
3,蒸溜水洗板 5 次。
4,加入酶标液 150 ul,混和 5 秒。
5,室温放置 30 分钟,洗板 5 次。
6,加入已配好显色剂 200 ul,室温放置 20 分钟。
7,加入终止液 50 ul,450 nm比色。
东莞常平医院
免疫实验室
文件编号:
DGCPH-IMN-SOP-01-26
甲胎蛋白( AFP )
版序:2003-1
页码:第2 页,共2 页
[结果判定]
1、酶标仪检测(选择波长450nm):每孔终止液1滴后,用空白孔校零,测定各孔OD值。
2、计算:同T3。
[质量控制]
每批检测同步进行标准和质控品测定,绘制室内质控图 。其它按室内质量控制管理规定进行。
[正常参考值]
参考值:健康成年人≤25ng/ml。
[临床意义]
(1)原发性肝癌:肝癌病人的肝细胞恢复合成AFP的能力,血中的AFP比正常人明显升高10倍至数万倍。一般认为诊断原发性肝癌的标准应大于400μg/L,但AFP持续升高在200μg/L以上达8周时,要考虑原发性肝癌并有手术适应症。原发性肝癌者中有20-30%的低水平AFP〈30μg/L的病人,要引起足够的重视。
(2)肝炎:急性肝炎、慢性肝炎活动期、肝硬变患者AFP增高,一般不超过300μg/L。普通肝炎AFP增高的时期不长,如转氨酶(ALT)恢复正常随着肝细胞的修复,AFP逐渐减少到正常水平。
(3)其他:先天性总胆管闭锁,开放性骨脊裂的胎儿,生殖腺胚胎性肿瘤等疾病AFP有所增高。
(4)正常孕妇在妊娠3-5个月时AFP达最高峰(一般不超过200μg/L),以后逐步下降,到胎儿出生后恢复正常。
[注意事项]
1、不同批号的试剂不可混用。
2、试剂盒用前先平衡至室温。含血球的标本易出现假阳性,应避免使用。
3、未用完的板条应及时封存于易封袋中。
4、滴加试剂前,应将滴瓶翻转数次混匀。滴加时瓶身应保持垂直。
5、若浓缩洗涤液出现结晶,可于37℃放置至溶解。洗涤要充分,各孔均需加满,防止孔口内游离酶不能洗净。
6、对AFP弱阳性,建议复查并定期动态观察。检测AFP为辅助诊断指标之一,确诊需结合临床等综合判断。
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